Expressão de IL-7 e IL-7R em pacientes com AR com doença ativa versus inativa tratados com DMARD ou CIMZIA

Amostras de sangue serão coletadas de pacientes que foram diagnosticados com AR com base nos critérios de classificação do ACR. O estudo incluirá 200 doadores. O número total de indivíduos é dividido em dois grupos para produzir um poder de 95% em um nível de erro tipo I de 5% [determinado com base nos dados preliminares]. No primeiro grupo, 200 doadores serão tratados com metotrexato, plaquenil e/ou prednisona (medicamentos antirreumáticos modificadores da doença; DMARDs) que atingirem a remissão (escore de atividade da doença, DAS28<2,6) ou não atingirem a remissão (DAS28>2,6) . 50 doadores serão utilizados conforme eles respondem aos DMARDs e atingem a remissão (DAS28 <2,6) e 150 doadores que não responderem aos DMARDs serão transferidos para o segundo grupo. No segundo grupo, 150 doadores serão tratados com metotrexato, plaquenil e/ou prednisona e Cimzia® (fornecido pela UCB).

No primeiro grupo de pacientes, amostras de sangue serão obtidas de pacientes com AR tratados com drogas antirreumáticas modificadoras da doença (DMARDs), como metotrexato, plaquenil e/ou prednisona, que atingem a remissão (DAS28<2,6). Os pacientes que atingem a remissão (DAS28<2,6), o sangue será coletado apenas uma vez na consulta de rotina do paciente.

O segundo grupo será composto por pacientes com AR que não responderam aos "DMARDs". Esses pacientes receberão (DMARDs), como metotrexato, plaquenil e/ou prednisona, bem como Cimzia® (fornecido a nós pela UCB) gratuitamente. Cimzia® é um medicamento aprovado pela FDA e é um tratamento padrão. Amostras de sangue serão obtidas de pacientes tratados com DMARDs, incluindo metotrexato, plaquenil e/ou prednisona e Cimzia® (fornecido a nós pela UCB) que apresentam remissão inativa (DAS28<2,6). Neste grupo, amostras de sangue serão coletadas no início do estudo, bem como 3 e 6 meses após o tratamento com Cimzia na visita do paciente através de nossa colaboração com os reumatologistas mencionados acima. Os pacientes que receberam injeções intra-articulares de esteroides serão excluídos do estudo.

Células mononucleares PB serão isoladas de sangue total RA e colocadas em tubos de coleta de sangue e isoladas por centrifugação em gradiente histopaco. Monócitos serão isolados de células mononucleares RA PB por seleção negativa (conforme mostrado nos dados preliminares) e metade dos monócitos serão diferenciados para macrófagos por 7 dias. Os níveis de expressão de IL-7 e IL-7R serão determinados por reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa em tempo real (RT-PCR) e análise por citometria de fluxo.

Em nossa análise estatística, faremos primeiro uma análise estratificada para avaliar os níveis de expressão diferencial em pacientes com AR com doença ativa e inativa, controlando o tipo de tratamento. A análise dos dados será realizada em colaboração com um estatístico do UIC Center for Clinical and Translational Science. Especificamente, faremos a comparação da expressão de IL-7 e IL-7R entre pacientes com AR com atividade (DAS28>2,6) vs. doença inativa (DAS28 <2,6) para o grupo DMARDs (grupo 1). Em seguida, faremos uma comparação semelhante para o grupo de terapia DMARDs e Cimzia® (grupo 2). A análise estratificada pode ajustar o potencial efeito de confusão do tratamento recebido e permite a detecção de possíveis relações diferenciais entre os níveis de expressão de IL-7 ou IL-7R e o estado da doença. Também faremos uma análise de regressão agrupada na qual o logaritmo de expressão de IL-7 ou IL-7R de pacientes é regredido no indicador de grupo de tratamento [DMARDs (grupo 1) versus DMARDs mais terapia com Cimzia® (grupo 2)] e doença estado (doença ativa ou inativa) que demonstraria a interação entre os grupos de tratamento e a atividade da doença. Essa análise reúne indivíduos de dois grupos de tratamento e pode, portanto, aumentar o tamanho da amostra e, portanto, potencialmente o poder de detectar as relações entre os biomarcadores e o estado da doença. As amostras de RA serão coletadas ao longo de um período de 2 anos e os dados serão analisados ​​no último ano da proposta.