IL-7- und IL-7R-Expression bei RA-Patienten mit aktiver vs. inaktiver Erkrankung, die mit DMARD oder CIMZIA behandelt wurden

Blutproben werden von Patienten entnommen, bei denen RA basierend auf den ACR-Klassifikationskriterien diagnostiziert wurde. Die Studie umfasst 200 Spender. Die Gesamtzahl der Probanden wird in zwei Gruppen eingeteilt, um eine Trennschärfe von 95 % bei einem Typ-I-Fehler von 5 % zu erzielen [bestimmt auf der Grundlage der vorläufigen Daten]. In der ersten Gruppe werden 200 Spender mit Methotrexat, Plaquenil und/oder Prednison (Disease Modifying Anti Rheuma Drugs; DMARDs) behandelt, die entweder eine Remission erreichen (Disease Activity Score, DAS28 < 2,6) oder keine Remission erreichen (DAS28 > 2,6). . 50 Spender werden verwendet, wenn sie auf DMARDs ansprechen und eine Remission erreichen (DAS28 < 2,6) und 150 Spender, die nicht auf DMARDs ansprechen, werden in die zweite Gruppe überführt. In der zweiten Gruppe werden 150 Spender mit Methotrexat, Plaquenil und/oder Prednison und Cimzia® (bereitgestellt von UCB) behandelt.

In der ersten Patientengruppe werden Blutproben von RA-Patienten entnommen, die mit krankheitsmodifizierenden Antirheumatika (DMARDs) wie Methotrexat, Plaquenil und/oder Prednison behandelt werden und eine Remission erreichen (DAS28 < 2,6). Die Patienten, die eine Remission erreichen (DAS28<2,6), Blut wird nur einmal beim Routinebesuch des Patienten abgenommen.

Die zweite Gruppe besteht aus RA-Patienten, die nicht auf „DMARDs“ angesprochen haben. Diese Patienten erhalten zusätzlich (DMARDs) wie Methotrexat, Plaquenil und/oder Prednison sowie Cimzia® (von UCB zur Verfügung gestellt) kostenlos. Cimzia® ist ein von der FDA zugelassenes Medikament und ein Behandlungsstandard. Blutproben werden von Patienten entnommen, die mit DMARDs behandelt wurden, einschließlich Methotrexat, Plaquenil und/oder Prednison und Cimzia® (uns von UCB zur Verfügung gestellt), die eine inaktive Remission (DAS28 < 2,6) aufweisen. In dieser Gruppe werden in Zusammenarbeit mit den oben genannten Rheumatologen Blutproben zu Beginn der Studie sowie 3 und 6 Monate nach der Behandlung mit Cimzia beim Patientenbesuch entnommen. Patienten, die intraartikuläre Steroidinjektionen erhalten, werden von der Studie ausgeschlossen.

Mononukleäre PB-Zellen werden aus RA-Vollblut isoliert und in Blutentnahmeröhrchen gezogen und durch Histopaque-Gradientenzentrifugation isoliert. Monozyten werden durch Negativselektion (wie in den vorläufigen Daten gezeigt) aus mononukleären RA-PB-Zellen isoliert, und die Hälfte der Monozyten wird 7 Tage lang zu Makrophagen differenziert. Die Expressionsniveaus für IL-7 und IL-7R werden durch Echtzeit-Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) und durchflusszytometrische Analyse bestimmt.

In unserer statistischen Analyse werden wir zunächst eine stratifizierte Analyse durchführen, um die unterschiedlichen Expressionsniveaus bei RA-Patienten mit aktiver und inaktiver Erkrankung zu bewerten, wobei die Art der Behandlung kontrolliert wird. Die Datenanalyse wird in Zusammenarbeit mit einem Statistiker des UIC-Zentrums für klinische und translationale Wissenschaft durchgeführt. Insbesondere werden wir den Vergleich der IL-7- und IL-7R-Expression bei RA-Patienten mit aktiver (DAS28>2,6) vs. inaktive Erkrankung (DAS28<2,6) für die DMARDs-Gruppe (Gruppe 1). Wir werden dann einen ähnlichen Vergleich für die DMARDs- und Cimzia®-Therapiegruppe (Gruppe 2) durchführen. Die stratifizierte Analyse kann den potenziellen verwirrenden Effekt der erhaltenen Behandlung anpassen und ermöglicht die Erkennung der potenziellen unterschiedlichen Beziehungen zwischen den Expressionsniveaus von IL-7 oder IL-7R und dem Krankheitsstatus. Wir werden auch eine gepoolte Regressionsanalyse durchführen, in der der Expressionslogarithmus von IL-7 oder IL-7R von Patienten auf den Behandlungsgruppenindikator [DMARDs (Gruppe 1) versus auf DMARDs plus Cimzia®-Therapie (Gruppe 2)] und Krankheit regressiert wird Status (aktive oder inaktive Krankheit), der die Wechselwirkung zwischen Behandlungsgruppen und Krankheitsaktivität aufzeigen würde. Eine solche Analyse fasst Probanden aus zwei Behandlungsgruppen zusammen und kann daher die Stichprobengröße und damit möglicherweise die Aussagekraft zum Nachweis der Beziehungen zwischen Biomarkern und Krankheitsstatus erhöhen. Die RA-Proben werden über einen Zeitraum von 2 Jahren gesammelt und die Daten werden im letzten Jahr des Vorschlags analysiert.