Omega-3 Plus Codzienna suplementacja niskimi dawkami aspiryny w terapii niechirurgicznej w leczeniu agresywnego zapalenia przyzębia

Metodologia badania jest zgodna z CONSORT-STATEMENT 2010 dla randomizowanych kontrolowanych badań klinicznych.

Projekt badania Badanie zostało zaprojektowane jako prospektywne, interwencyjne, równoległe, zaślepione, randomizowane, kontrolowane badanie kliniczne o wyższości.

Źródło danych Populacja tego badania będzie rekrutowana spośród pacjentów skierowanych do Instytutu Nauki i Technologii - ICT- São José dos Campos, College of Dentistry. Pacjenci wypełnią kwestionariusz historii zdrowia, aby upewnić się, że są kwalifikowani medycznie do udziału w tym badaniu. Na podstawie obliczeń mocy dla tego badania zostanie włączona populacja 38 pacjentów. Biorąc pod uwagę α 5% i 10% błąd typu β (moc 90%) w celu wykrycia różnicy co najmniej 1 mm w redukcji głębokości kieszonek ≥ 5 mm między grupami, dla odchylenia standardowego 0,94 z poprzedniego badania oceniającego różne antybiotyków w leczeniu GAgP (Xajigeorgiou i in., 2006), w każdej grupie będzie potrzebnych 19 pacjentów.

Parametry kliniczne Wszystkie parametry kliniczne będą oceniane przez pojedynczego zaślepionego, przeszkolonego i skalibrowanego egzaminatora (CFA) przed rozpoczęciem leczenia periodontologicznego (linia wyjściowa) oraz po 3 i 6 miesiącach od użycia ręcznej sondy. Pomiary zostaną wykonane w sześciu miejscach na ząb (mezja policzkowa, policzkowa, dystalno-policzkowa, dystalna, językowa i mezjalno-językowa) we wszystkich zębach, z wyjątkiem trzecich zębów trzonowych.

Oceniane będą następujące parametry kliniczne: 1) wskaźnik płytki nazębnej pełnej jamy ustnej (FMPI); 2) Krwawienie podczas sondowania (BoP); 3) Głębokość sondowania (PD): odległość od dna bruzdy/kieszonki do brzegu dziąsła; 4) Recesja dziąsła (GM): odległość od wolnego brzegu dziąsła do połączenia cement-szkliwo (CEJ); 5) Kliniczny poziom przyczepu (CAL): odległość od dna bruzdy/kieszonki do CEJ. CEJ zostanie zidentyfikowany za pomocą dokładnej sondy w okolicy szyjki macicy.

Kalibracja i randomizacja Początkowo zostanie wybranych łącznie dziesięciu pacjentów z GAgP. Wyznaczony egzaminator (CFA) dokona pomiaru CAL i PD u wszystkich pacjentów dwukrotnie w ciągu 24 godzin, z przerwą ≥ 1 godziny między badaniami. Następnie miary zostaną poddane testowi korelacji wewnątrzklasowej, a egzaminator zostanie uznany za wykalibrowanego, jeśli osiągnie 90% zgodności.

Pacjenci zostaną przydzieleni do dwóch grup zgodnie z listą wygenerowaną komputerowo. Alokacja zostanie wdrożona przez badacza (NC), który nie był bezpośrednio zaangażowany w procedury badania lub leczenia.

Tabele zabiegów

Wszyscy pacjenci zostaną poddani leczeniu periodontologicznemu poprzez jednoetapowe, pełne oczyszczenie ultradźwiękowe (FMUD). Podczas jednej sesji pacjenci otrzymają znieczulenie miejscowe i oczyszczenie przyzębia za pomocą ultrasonografu (Cavitron - Dentsply EUA) oraz końcówek poddziąsłowych (UI25KSF10S, Hu-Friedy). Wszystkie chore miejsca zostaną poddane instrumentacji podczas tej jednej sesji. Sesja oczyszczania zostanie przeprowadzona przez jednego doświadczonego i przeszkolonego periodontologa (NA), innego niż egzaminator. Bezpośrednio przed terapią mechaniczną pacjenci zostaną przydzieleni do jednego z dwóch protokołów leczenia:

Grupa badana (n = 19): FMUD + 3 g wielonienasyconych kwasów tłuszczowych omega-3 i 100 mg aspiryny dziennie przez okres 180 dni; Grupa kontrolna (n = 19): FMUD + tabletki placebo.

Wszyscy pacjenci rozpoczną przyjmowanie tabletek bezpośrednio przed sesją FMUD.

Ocena mikrobiologiczna Próbki mikrobiologiczne poddziąsłowe zostaną pobrane na początku badania, 3 i 6 miesięcy po zakończeniu leczenia. Miejsce zostanie odizolowane sterylnym bawełnianym wałkiem, a biofilm naddziąsłowy zostanie ostrożnie usunięty za pomocą kiret periodontologicznych, a sterylna bibułka zostanie umieszczona w kieszonce przyzębnej na 30 sekund (Hartoth i in., 1999). Próbka będzie przechowywana w sterylnych mikroprobówkach. Próbki zostaną następnie liofilizowane i wysłane do Wydziału Periodontologii na Uniwersytecie Florydy, gdzie próbki zostaną przeanalizowane.

Ocena cytokin W celu analizy zmian immunologicznych płyn dziąsłowy dziąseł (CGF) zostanie pobrany na początku badania, 3 i 6 miesięcy po leczeniu. Każde miejsce zostanie odizolowane sterylnym wacikiem i usunięty biofilm naddziąsłowy. Następnie CGF zostanie pobrany za pomocą pasków Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA), włożonych do kieszonki na 15 sekund. Zostanie zmierzona objętość zebranego płynu (Periotron 8000, Oraflow). Paski papieru Perio będą przechowywane w sterylnej probówce zawierającej 300 μl soli fizjologicznej (PBS) z 5% Tween-20 i będą przechowywane w zamrażarce w temperaturze -20°C do czasu testu multipleksowego. W CGF zostanie zmierzony poziom następujących cytokin: interferon (IFN) -γ, interleukiny (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, czynnik martwicy nowotworów (TNF) -α, czynnik zapalny makrofagów białko 1α (MIP1α), białko chemotaktyczne monocytów 1α (MCP-1α). Zestaw 10-plex o wysokiej czułości (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) będzie używany zgodnie z instrukcjami producenta i analizowany przy użyciu platformy MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, USA). Próbki będą analizowane indywidualnie (każda kieszonka z osobna) a stężenia zostaną obliczone przy użyciu standardowej 5-parametrowej krzywej w programie Xponet (Millipore Corporation). Stężenie każdego markera zostanie podane w pg/ml. Wszystkie analizy stężeń cytokin zostaną wykonane w dwóch powtórzeniach.

Analiza statystyczna Przeprowadzone zostaną dwie analizy: zgodnie z protokołem i zgodnie z zamiarem leczenia (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Dla każdego z nich w każdym z parametrów zostanie obliczona średnia i odchylenie standardowe. PI, GI, PD, CAL i GR dla całej jamy ustnej zostaną poddane testowi Shapiro-Wilka w celu oceny rozkładu tych danych, a następnie poddane testowi wariancji w celu porównania wewnątrz- i wewnątrzgrupowego. Ponadto przed i po terapii zostanie oceniona liczba kieszonek ≥ 5mm, częstość zamykania tych kieszonek, średnia redukcja PS i przyrost CAL poprzez wykonanie analiz wewnątrz- i międzygrupowych.

Stężenie każdej cytokiny będzie analizowane za pomocą testu wariancji dla porównania wewnątrz i międzygrupowego.