Ежедневный прием омега-3 плюс низкие дозы аспирина в нехирургической терапии агрессивного периодонтита

Методология исследования соответствует CONSORT-STATEMENT 2010 для рандомизированных контролируемых клинических испытаний.

Дизайн исследования Исследование разработано как проспективное, интервенционное, параллельное, слепое, рандомизированное, контролируемое клиническое исследование превосходства.

Источник данных Население для этого исследования будет набрано среди пациентов, направленных в Институт науки и технологий - ICT - Сан-Жозе-дус-Кампус, Колледж стоматологии. Пациенты будут заполнять анкету истории болезни, чтобы убедиться, что они имеют медицинскую квалификацию для участия в этом исследовании. На основании расчета мощности для этого исследования будет включена популяция из 38 пациентов. Принимая во внимание α 5% и 10% ошибки β-типа (мощность 90%), чтобы обнаружить разницу не менее 1 мм в уменьшении глубины зондирования карманов ≥ 5 мм между группами, для стандартного отклонения 0,94 от предыдущего исследования, оценивающего различные противомикробных препаратов при лечении GAgP (Xajigeorgiou et al., 2006), в каждой группе потребуется 19 пациентов.

Клинические параметры Все клинические параметры будут оцениваться одним ослепленным, обученным и сертифицированным экспертом (CFA) перед пародонтальной терапией (базовый уровень) и через 3 и 6 месяцев после использования ручного датчика. Измерения будут проводиться в шести местах на каждый зуб (мезиощечный, щечный, дистально-щечный, дистолингвальный, лингвальный и мезиолингвальный) во всех зубах, кроме третьих моляров.

Будут оцениваться следующие клинические параметры: 1) индекс зубного налета во рту (FMPI); 2) Кровотечение при зондировании (BoP); 3) Глубина зондирования (PD): расстояние от дна борозды/кармана до десневого края; 4) Рецессия десны (GM): расстояние от свободного края десны до цементно-эмалевой границы (CEJ); 5) Уровень клинического прикрепления (CAL): расстояние от дна борозды/кармана до CEJ. CEJ будет идентифицирован тщательным зондированием шейной области.

Калибровка и рандомизация Первоначально будут отобраны десять пациентов с GAgP. Назначенный эксперт (CFA) измеряет CAL и PD у всех пациентов дважды в течение 24 часов с интервалом ≥ 1 часа между обследованиями. Затем измерения будут представлены для внутриклассового корреляционного теста, и экзаменатор будет считаться откалиброванным, если достигнет 90% совпадения.

Пациенты будут разделены на две группы в соответствии с компьютерным списком. Распределение будет осуществляться исследователем (NC), который не принимал непосредственного участия в процедурах обследования или лечения.

Протоколы лечения

Всем пациентам будет проведена пародонтологическая терапия посредством одноэтапной ультразвуковой обработки полости рта (FMUD). За один сеанс пациенты получат местную анестезию и пародонтальную санацию с помощью ультразвукового оборудования (Cavitron - Dentsply EUA) и поддесневых насадок (UI25KSF10S, Hu-Friedy). Все больные участки будут обработаны за один сеанс. Сеанс санации будет выполняться одним опытным и обученным пародонтологом (NA), отличным от экзаменатора. Непосредственно перед механической терапией пациенты распределяются по одному из двух протоколов лечения:

Тестовая группа (n = 19): FMUD + 3 г полиненасыщенных жирных кислот омега-3 и 100 мг аспирина ежедневно в течение 180 дней; Контрольная группа (n = 19): FMUD + таблетки плацебо.

Все пациенты начинают принимать таблетки непосредственно перед сеансом FMUD.

Микробиологическая оценка Поддесневые микробиологические образцы будут собираться на исходном уровне, через 3 и 6 месяцев после терапии. Участок изолируют стерильным ватным валиком, наддесневую биопленку осторожно удаляют пародонтальными кюретками, а стерильную бумагу вставляют в пародонтальный карман на 30 с (Hartoth et al., 1999). Образец будет храниться в стерильных микропробирках. Затем образцы лиофилизируют и отправляют в отделение пародонтологии Университета Флориды, где они будут проанализированы.

Оценка цитокинов Для анализа иммунологических изменений десневая жидкость (CGF) будет собираться исходно, через 3 и 6 месяцев после лечения. Каждый участок будет изолирован стерильным ватным валиком, а наддесневая биопленка будет удалена. После этого CGF будет собран полосками Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA), вставленными в карман на 15 секунд. Будет измерен объем собранной жидкости (Periotron 8000, Oraflow). Полоски Periopaper будут храниться в стерильной пробирке, содержащей 300 мкл фосфатно-солевого раствора (PBS) с 5% Tween-20, и храниться в морозильной камере при температуре -20 °C до мультиплексного теста. В CGF будет измеряться уровень следующих цитокинов: интерферон (IFN)-γ, интерлейкины (IL)-10, -1β, -4, -6, -8, фактор некроза опухоли (TNF)-α, макрофаги воспалительные белок 1α (MIP1α), хемотаксический белок моноцитов 1α (MCP-1α). Набор высокой чувствительности 10-plex (Millipore Corporation, Биллерика, Массачусетс, США) будет использоваться в соответствии с инструкциями производителя и анализироваться с использованием платформы MAGpixTM (MiraiBio, Аламеда, Калифорния, США). Образцы будут анализироваться индивидуально (каждый карман отдельно), а концентрации будут рассчитаны с использованием стандартной 5-параметрической кривой в программе Xponet (Millipore Corporation). Концентрация каждого маркера будет дана в пг/мл. Все анализы концентраций цитокинов будут проводиться в двух повторностях.

Статистический анализ Будет проведено два анализа: по протоколу и по назначению лечения (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Для каждого из них будет рассчитано среднее значение и стандартное отклонение по каждому из параметров. PI, GI, PD, CAL и GR для всего рта будут подвергнуты тесту Шапиро-Уилка для оценки распределения этих данных, а затем подвергнуты тесту дисперсии для внутригруппового и внутригруппового сравнения. Кроме того, количество карманов ≥ 5 мм, частота закрытия этих карманов, среднее снижение PS и прирост CAL этих карманов будут оцениваться до и после терапии путем проведения внутригруппового и межгруппового анализа.

Концентрацию каждого цитокина анализируют методом дисперсии для внутригруппового и межгруппового сравнения.