Omega-3 Plus Suplementación diaria de dosis bajas de aspirina en la terapia no quirúrgica para tratar la periodontitis agresiva

La metodología del estudio está de acuerdo con CONSORT-STATEMENT 2010 para ensayos clínicos controlados aleatorios.

Diseño del estudio El estudio está diseñado como un ensayo clínico prospectivo, intervencionista, paralelo, ciego, aleatorizado y controlado de superioridad.

Fuente de los datos La población de este estudio será reclutada entre los pacientes derivados del Instituto de Ciencia y Tecnología - ICT - Facultad de Odontología de São José dos Campos. Los pacientes completarán un cuestionario de antecedentes saludables para asegurarse de que estén médicamente calificados para participar en este estudio. Sobre la base del cálculo de potencia para este estudio, se incluirá una población de 38 pacientes. Considerando un α del 5 % y un 10 % de error tipo β (90 % de poder) para detectar una diferencia de al menos 1 mm en la reducción de la profundidad de sondaje de bolsas ≥ 5 mm entre grupos, para una desviación estándar de 0,94 de un estudio previo que evaluó diferentes antimicrobianos en el tratamiento de GAgP (Xajigeorgiou et al., 2006), se necesitarán 19 pacientes en cada grupo.

Parámetros clínicos Todos los parámetros clínicos serán evaluados por un solo examinador cegado, capacitado y calibrado (CFA) antes de la terapia periodontal (línea de base) ya los 3 y 6 meses después de usar una sonda manual. Las mediciones se realizarán en seis sitios por diente (mesiovestibular, bucal, distovestibular, distolingual, lingual y mesiolingual) en todos los dientes, excepto los terceros molares.

Se evaluarán los siguientes parámetros clínicos: 1) índice de placa en toda la boca (FMPI); 2) Sangrado al sondaje (BoP); 3) Profundidad de sondaje (PD): distancia desde el fondo del surco/bolsa hasta el margen gingival; 4) Recesión gingival (GM): distancia desde el margen gingival libre hasta la unión cemento-esmalte (CEJ); 5) Nivel de inserción clínica (CAL): distancia desde la parte inferior del surco/bolsa hasta la LAC. El CEJ se identificará mediante un sondeo cuidadoso en el área cervical.

Calibración y aleatorización Inicialmente, se seleccionará un total de diez pacientes que presenten GAgP. El examinador designado (CFA) medirá CAL y PD en todos los pacientes dos veces en 24 horas, con un intervalo de ≥ 1 hora entre exámenes. Luego, las medidas serán sometidas a la prueba de correlación intraclase y el examinador será juzgado calibrado si alcanza el 90% de concordancia.

Los pacientes serán asignados en dos grupos de acuerdo con una lista generada por computadora. La asignación será implementada por un investigador (NC) que no estuvo directamente involucrado en los procedimientos de examen o tratamiento.

Protocolos de tratamiento

Todos los pacientes serán tratados con terapia periodontal a través del desbridamiento ultrasónico (FMUD) de una etapa y de boca completa. En una sola sesión, los pacientes recibirán anestesia local y desbridamiento periodontal con equipo de ultrasonido (Cavitron - Dentsply EUA) y puntas subgingivales (UI25KSF10S, Hu-Friedy). Todos los sitios enfermos serán instrumentados en esta única sesión. La sesión de desbridamiento será realizada por un único periodoncista (NA) experimentado y capacitado, diferente al examinador. Inmediatamente antes de la terapia mecánica, los pacientes serán asignados a uno de los dos protocolos de tratamiento:

Grupo de prueba (n = 19): FMUD + 3 g de ácidos grasos poliinsaturados omega-3 y 100 mg de aspirina como suplemento diario durante un período de 180 días; Grupo de control (n = 19): FMUD + pastillas de placebo.

Todos los pacientes comenzarán a tomar las pastillas inmediatamente antes de la sesión de FMUD.

Evaluación microbiológica Se recolectarán muestras microbiológicas subgingivales al inicio, 3 y 6 meses después de la terapia. El sitio se aislará con un rodillo de algodón estéril y el biofilm supragingival se eliminará cuidadosamente con curetas periodontales y se insertará un papel estéril en la bolsa periodontal durante 30 s (Hartoth et al., 1999). La muestra se almacenará en microtubos estériles. Luego, las muestras se liofilizarán y se enviarán al Departamento de Periodoncia de la Universidad de Florida, donde se analizarán las muestras.

Evaluación de citoquinas Para el análisis de cambios inmunológicos, se recolectará fluido gingival crevicular (CGF) al inicio, 3 y 6 meses después del tratamiento. Cada sitio se aislará con un rodillo de algodón estéril y se eliminará la biopelícula supragingival. Posteriormente, se recolectará el CGF con tiras de Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, EE. UU.), insertadas en el bolsillo durante 15 segundos. Se medirá el volumen de líquido recogido (Periotron 8000, Oraflow). Las tiras de Periopaper se almacenarán en un tubo estéril que contiene 300 μl de solución salina de fosfato (PBS) con Tween-20 al 5% y se almacenarán en un congelador a -20 ° C hasta la prueba multiplex. Se medirá el nivel de las siguientes citoquinas en el CGF: interferón (IFN) -γ, interleucinas (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, factor de necrosis tumoral (TNF) -α, macrófago inflamatorio proteína 1α (MIP1α), proteína quimiotáctica de monocitos 1α (MCP-1α). El kit de alta sensibilidad de 10 plex (Millipore Corporation, Billerica, MA, EE. UU.) se utilizará de acuerdo con las instrucciones del fabricante y se analizará utilizando la plataforma MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, EE. UU.). Las muestras se analizarán individualmente (cada bolsillo por separado) y las concentraciones se calcularán utilizando una curva estándar de 5 parámetros en el programa Xponet (Millipore Corporation). La concentración de cada marcador se dará en pg/ml. Todos los análisis de las concentraciones de citocinas se realizarán por duplicado.

Análisis estadístico Se realizarán dos análisis: Por protocolo e Intención de tratar (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Para cada uno de ellos se calculará la media y la desviación estándar en cada uno de los parámetros. PI, GI, PD, CAL y GR de boca completa se someterán a la prueba de Shapiro-Wilk para evaluar la distribución de estos datos y luego se someterán a la prueba de varianza para la comparación intra e intragrupo. Además, el número de bolsas ≥ 5 mm, la frecuencia de cierre de estas bolsas, la reducción media de PS y la ganancia de CAL de estas bolsas se evaluarán antes y después de la terapia mediante la realización de análisis intra e intergrupo.

La concentración de cada citocina se analizará mediante prueba de varianza para comparación intra e intergrupo.