Suplementação diária de aspirina em baixa dose de Omega-3 Plus em terapia não cirúrgica para tratar a periodontite agressiva

A metodologia do estudo está de acordo com CONSORT-STATEMENT 2010 para ensaios clínicos randomizados controlados.

Desenho do estudo O estudo é desenhado como um ensaio clínico prospectivo, intervencional, paralelo, cego, randomizado e controlado de superioridade.

Fonte dos dados A população deste estudo será recrutada entre pacientes encaminhados ao Instituto de Ciência e Tecnologia - ICT- Faculdade de Odontologia de São José dos Campos. Os pacientes preencherão um questionário de histórico de saúde para garantir que sejam medicamente qualificados para participar deste estudo. Com base no cálculo do poder para este estudo, uma população de 38 pacientes será incluída. Considerando α de 5% e 10% de erro tipo β (90% de poder) para detectar uma diferença de pelo menos 1 mm na redução da profundidade de sondagem de bolsas ≥ 5 mm entre os grupos, para um desvio padrão de 0,94 de um estudo anterior avaliando diferentes antimicrobianos no tratamento de GAgP (Xajigeorgiou et al., 2006), serão necessários 19 pacientes em cada grupo.

Parâmetros Clínicos Todos os parâmetros clínicos serão avaliados por um único examinador cego, treinado e calibrado (CFA) antes da terapia periodontal (linha de base) e 3 e 6 meses após o uso de uma sonda manual. As medições serão feitas em seis locais por dente (mésio-vestibular, vestibular, disto-vestibular, disto-lingual, lingual e mésio-lingual) em todos os dentes, exceto terceiros molares.

Serão avaliados os seguintes parâmetros clínicos: 1) Índice de placa de boca cheia (FMPI); 2) Sangramento à sondagem (BoP); 3) Profundidade de sondagem (PD): distância do fundo do sulco/bolsa até a margem gengival; 4) Recessão gengival (GM): distância da margem gengival livre até a junção cimento-esmalte (CEJ); 5) Nível de inserção clínica (CAL): distância do fundo do sulco/bolsa até a JAC. O CEJ será identificado por sondagem cuidadosa na área cervical.

Calibração e Randomização Inicialmente, um total de dez pacientes com GAgP será selecionado. O examinador designado (CFA) medirá CAL e PD em todos os pacientes duas vezes em 24 horas, com intervalo ≥ 1 hora entre os exames. Em seguida, as medidas serão submetidas ao teste de correlação intraclasse e o examinador será considerado calibrado se atingir 90% de concordância.

Os pacientes serão alocados em dois grupos de acordo com uma lista gerada por computador. A alocação será implementada por um investigador (NC) que não esteve diretamente envolvido no exame ou nos procedimentos de tratamento.

Protocolos de tratamento

Todos os pacientes serão tratados com terapia periodontal através do desbridamento ultrassônico (FMUD) de um estágio, boca cheia. Em sessão única, os pacientes receberão anestesia local e desbridamento periodontal com equipamento de ultrassom (Cavitron - Dentsply EUA) e pontas subgengivais (UI25KSF10S, Hu-Friedy). Todos os locais doentes serão instrumentados nesta única sessão. A sessão de desbridamento será realizada por um único periodontista (NA) experiente e treinado, diferente do examinador. Imediatamente antes da terapia mecânica, os pacientes serão alocados em um dos dois protocolos de tratamento:

Grupo teste (n = 19): FMUD + 3 g de ácidos graxos poliinsaturados ômega-3 e suplementação diária de 100 mg de aspirina por um período de 180 dias; Grupo controle (n = 19): FMUD + comprimidos de placebo.

Todos os pacientes começarão a tomar os comprimidos imediatamente antes da sessão de FMUD.

Avaliação microbiológica Amostras microbiológicas subgengivais serão coletadas no início, 3 e 6 meses após a terapia. O local será isolado com um rolo de algodão estéril e o biofilme supragengival será cuidadosamente removido com curetas periodontais e um papel estéril será inserido na bolsa periodontal por 30 s (Hartoth et al., 1999). A amostra será armazenada em microtubos estéreis. As amostras serão então liofilizadas e enviadas ao Departamento de Periodontologia da Universidade da Flórida, onde serão analisadas.

Avaliação das citocinas Para a análise das alterações imunológicas, o fluido gengival crevicular (CGF) será coletado no início, 3 e 6 meses após o tratamento. Cada local será isolado com rolo de algodão estéril e o biofilme supragengival será removido. Após isso, o CGF será coletado com tiras de Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA), inseridas no bolso por 15 segundos. O volume de fluido coletado será medido (Periotron 8000, Oraflow). As tiras de Periopaper serão armazenadas em tubo estéril contendo 300μl de solução salina de fosfato (PBS) com Tween-20 a 5% e armazenadas em freezer a -20°C até o teste multiplex. O nível das seguintes citocinas será medido no CGF: interferon (IFN) -γ, interleucinas (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, fator de necrose tumoral (TNF) -α, macrófago inflamatório proteína 1α (MIP1α), proteína quimiotática de monócitos 1α (MCP-1α). O kit 10-plex de alta sensibilidade (Millipore Corporation, Billerica, MA, EUA) será utilizado de acordo com as instruções do fabricante e analisado na plataforma MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, EUA). As amostras serão analisadas individualmente (cada bolso separadamente) e as concentrações serão calculadas usando uma curva padrão de 5 parâmetros no programa Xponet (Millipore Corporation). A concentração de cada marcador será dada em pg/ml. Todas as análises das concentrações de citocinas serão feitas em duplicata.

Análise estatística Serão realizadas duas análises: Por protocolo e Intenção de tratar (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Para cada um deles, média e desvio padrão serão calculados em cada um dos parâmetros. PI, GI, PD, CAL e GR de boca cheia serão submetidos ao teste de Shapiro-Wilk para avaliar a distribuição desses dados e, em seguida, submetidos ao teste de variância para comparação intra e intragrupo. Além disso, o número de bolsas ≥ 5mm, a frequência de fechamento dessas bolsas, a redução média de PS e o ganho de CAL dessas bolsas serão avaliados antes e após a terapia por meio de análises intra e intergrupos.

A concentração de cada citocina será analisada por teste de variância para comparação intra e intergrupos.