Tägliche Nahrungsergänzung mit Omega-3 Plus niedrig dosiertem Aspirin in der nicht-chirurgischen Therapie zur Behandlung von aggressiver Parodontitis

Die Studienmethodik entspricht dem CONSORT-STATEMENT 2010 für randomisierte kontrollierte klinische Studien.

Studiendesign Die Studie ist als prospektive, interventionelle, parallele, verblindete, randomisierte, kontrollierte klinische Überlegenheitsstudie konzipiert.

Datenquelle Die Population dieser Studie wird unter Patienten rekrutiert, die an das Wissenschafts- und Technologieinstitut – ICT – São José dos Campos, College of Dentistry, überwiesen werden. Die Patienten füllen einen Fragebogen zur Anamnese aus, um sicherzustellen, dass sie medizinisch für die Teilnahme an dieser Studie qualifiziert sind. Basierend auf der Leistungsberechnung für diese Studie wird eine Population von 38 Patienten eingeschlossen. Unter Berücksichtigung eines α von 5 % und eines β-Typ-Fehlers von 10 % (90 % Aussagekraft), um einen Unterschied von mindestens 1 mm in der Sondierungstiefenreduktion von Taschen ≥ 5 mm zwischen den Gruppen zu erkennen, für eine Standardabweichung von 0,94 von einer früheren Studie, die anders bewertet wurde Antibiotika bei der Behandlung von GAgP (Xajigeorgiou et al., 2006), werden 19 Patienten in jeder Gruppe benötigt.

Klinische Parameter Alle klinischen Parameter werden von einem einzigen verblindeten, geschulten und kalibrierten Untersucher (CFA) vor der Parodontaltherapie (Basislinie) sowie 3 und 6 Monate nach Verwendung einer manuellen Sonde beurteilt. Die Messungen werden an sechs Stellen pro Zahn (mesiobukkale, bukkale, disto-bukkale, distolinguale, linguale und mesiolinguale) bei allen Zähnen außer dritten Molaren durchgeführt.

Die folgenden klinischen Parameter werden bewertet: 1) Full-Mouth-Plaque-Index (FMPI); 2) Bluten beim Sondieren (BoP); 3) Sondierungstiefe (PD): Abstand vom Boden des Sulcus/der Tasche bis zum Gingivarand; 4) Gingivarezession (GM): Abstand vom freien Zahnfleischsaum bis zur Schmelz-Zement-Grenze (CEJ); 5) Clinical Attachment Level (CAL): Abstand vom Boden des Sulcus/der Tasche zum CEJ. Die CEJ wird durch eine sorgfältige Sonde im zervikalen Bereich identifiziert.

Kalibrierung und Randomisierung Zunächst werden insgesamt zehn Patienten mit GAgP ausgewählt. Der designierte Untersucher (CFA) misst CAL und PD bei allen Patienten zweimal innerhalb von 24 Stunden, mit einem Intervall von ≥ 1 Stunde zwischen den Untersuchungen. Dann werden die Messungen einem klasseninternen Korrelationstest unterzogen und der Prüfer wird als kalibriert beurteilt, wenn eine Übereinstimmung von 90 % erreicht wird.

Die Patienten werden gemäß einer computergenerierten Liste in zwei Gruppen eingeteilt. Die Zuordnung erfolgt durch einen Prüfarzt (NC), der nicht direkt am Untersuchungs- oder Behandlungsverfahren beteiligt war.

Behandlungsprotokolle

Alle Patienten werden mit parodontaler Therapie durch das einzeitige Ultraschall-Debridement mit vollem Mund (FMUD) behandelt. In einer einzigen Sitzung erhalten die Patienten Lokalanästhesie und parodontales Debridement mit Ultraschallgeräten (Cavitron – Dentsply EUA) und subgingivalen Spitzen (UI25KSF10S, Hu-Friedy). Alle erkrankten Stellen werden in dieser einen Sitzung instrumentiert. Die Débridement-Sitzung wird von einem einzigen erfahrenen und ausgebildeten Parodontologen (NA) durchgeführt, der sich vom Untersucher unterscheidet. Unmittelbar vor der mechanischen Therapie werden die Patienten in eines der beiden Behandlungsprotokolle eingeteilt:

Testgruppe (n = 19): FMUD + 3 g mehrfach ungesättigte Omega-3-Fettsäuren und 100 mg Aspirin als tägliche Supplementation über einen Zeitraum von 180 Tagen; Kontrollgruppe (n = 19): FMUD + Placebo-Pillen.

Alle Patienten beginnen unmittelbar vor der FMUD-Sitzung mit der Einnahme der Pillen.

Mikrobiologische Bewertung Subgingivale mikrobiologische Proben werden zu Studienbeginn sowie 3 und 6 Monate nach der Therapie entnommen. Die Stelle wird mit einer sterilen Watterolle isoliert und der supragingivale Biofilm wird vorsichtig mit Parodontalküretten entfernt und ein steriles Papier wird für 30 Sekunden in die Parodontaltasche eingeführt (Hartoth et al., 1999). Die Probe wird in sterilen Mikroröhrchen gelagert. Die Proben werden dann lyophilisiert und an die Abteilung für Parodontologie der Universität von Florida geschickt, wo die Proben analysiert werden.

Bewertung von Zytokinen Für die Analyse von immunologischen Veränderungen wird Zahnfleischflüssigkeit (CGF) zu Studienbeginn, 3 und 6 Monate nach der Behandlung gesammelt. Jede Stelle wird mit einer sterilen Watterolle isoliert und der supragingivale Biofilm wird entfernt. Danach wird der CGF mit Periopaper-Streifen (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA) gesammelt, die 15 Sekunden lang in die Tasche eingeführt werden. Das Volumen der gesammelten Flüssigkeit wird gemessen (Periotron 8000, Oraflow). Die Periopaper-Streifen werden in einem sterilen Röhrchen mit 300 μl Phosphat-Kochsalzlösung (PBS) mit 5 % Tween-20 gelagert und bis zum Multiplex-Test in einem Gefrierschrank bei -20 °C gelagert. Der Spiegel der folgenden Zytokine wird im CGF gemessen: Interferon (IFN) -γ, Interleukine (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, Tumornekrosefaktor (TNF) -α, entzündliche Makrophagen Protein 1α (MIP1α), 1α Monozyten-chemotaktisches Protein (MCP-1α). Das 10-Plex-High-Sensitivity-Kit (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) wird gemäß den Anweisungen des Herstellers verwendet und unter Verwendung der MAGpixTM-Plattform (MiraiBio, Alameda, CA, USA) analysiert. Die Proben werden einzeln analysiert (jede Tasche separat) und die Konzentrationen werden unter Verwendung einer Standard-5-Parameter-Kurve im Xponet-Programm (Millipore Corporation) berechnet. Die Konzentration jedes Markers wird in pg/ml angegeben. Alle Analysen der Zytokinkonzentrationen werden doppelt durchgeführt.

Statistische Analyse Es werden zwei Analysen durchgeführt: Per Protocol und Intention-to-treat (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Für jeden von ihnen werden Mittelwert und Standardabweichung in jedem der Parameter berechnet. Vollmundige PI, GI, PD, CAL und GR werden dem Shapiro-Wilk-Test unterzogen, um die Verteilung dieser Daten zu bewerten, und dann dem Varianztest sowohl für den Intra- als auch den Intragruppenvergleich unterzogen. Darüber hinaus werden die Anzahl der Taschen ≥ 5 mm, die Häufigkeit des Verschlusses dieser Taschen, die mittlere Reduktion des PS und der Gewinn an CAL dieser Taschen vor und nach der Therapie durch Intra- und Intergruppenanalysen bewertet.

Die Konzentration jedes Zytokins wird durch einen Varianztest für einen Intra- und Intergruppenvergleich analysiert.