Omega-3 Plus 低剂量阿司匹林每日补充剂在非手术疗法中用于治疗侵袭性牙周炎

研究方法根据 CONSORT-STATEMENT 2010 进行随机对照临床试验。

研究设计 该研究被设计为一项前瞻性、介入性、平行、盲法、随机、对照临床试验。

数据来源 本研究的人群将在转介到科学技术研究所 - ICT- 圣若泽杜斯坎普斯牙科学院的患者中招募。 患者将填写一份健康史问卷，以确保他们在医学上有资格参加这项研究。 根据本研究的功效计算，将包括 38 名患者。 考虑到 5% 的 α 和 10% 的 β 型误差（90% 功效），以检测组间 ≥ 5 mm 的探诊深度减少至少 1 mm 的差异，与先前评估不同的研究的标准偏差为 0.94抗生素治疗 GAgP（Xajigeorgiou 等人，2006 年），每组需要 19 名患者。

临床参数 所有临床参数将在牙周治疗前（基线）以及使用手动探针后 3 个月和 6 个月时由一名经过培训和校准的单盲检查员 (CFA) 进行评估。 将在所有牙齿（第三磨牙除外）的每颗牙齿的六个位置（近中颊、颊、远颊、远舌、舌和近中）进行测量。

将评估以下临床参数： 1) 全口菌斑指数 (FMPI)； 2) 探诊出血 (BoP)； 3）探诊深度（PD）：沟/袋底部至龈缘的距离； 4) 牙龈退缩（GM）：游离龈缘至牙釉质结合部（CEJ）的距离； 5) 临床附着水平 (CAL)：从沟/袋底部到 CEJ 的距离。 CEJ 将通过仔细探查颈部区域来识别。

校准和随机化 最初，将选择总共 10 名表现为 GAgP 的患者。 指定检查员 (CFA) 将在 24 小时内对所有患者进行两次 CAL 和 PD 测量，两次检查之间的间隔≥1 小时。 然后，将这些措施提交给组内相关性测试，如果达到90%的一致性，将判定审查员已校准。

根据计算机生成的列表，患者将被分配到两组。 分配将由未直接参与检查或治疗程序的研究者 (NC) 实施。

治疗方案

所有患者都将通过一期全口超声清创术 (FMUD) 接受牙周治疗。 在一个疗程中，患者将使用超声设备 (Cavitron - Dentsply EUA) 和龈下尖端 (UI25KSF10S, Hu-Friedy) 接受局部麻醉和牙周清创术。 所有患病部位都将在这一阶段进行检测。 清创术将由一名经验丰富且训练有素的牙周病医生 (NA) 执行，与检查员不同。 在机械治疗之前，患者将被分配到两种治疗方案之一：

测试组 (n = 19)：FMUD + 3 克 omega-3 多不饱和脂肪酸和 100 毫克阿司匹林，每天补充 180 天；对照组 (n = 19)：FMUD + 安慰剂药丸。

所有患者将在 FMUD 会议之前立即开始服用药片。

微生物学评估 将在基线、治疗后 3 个月和 6 个月收集龈下微生物样本。 该部位将用无菌棉辊隔离，并用牙周刮匙小心去除龈上生物膜，并将无菌纸插入牙周袋 30 秒（Hartoth 等人，1999）。 样品将储存在无菌微管中。 然后将样本冻干并送到佛罗里达大学牙周病学系，在那里对样本进行分析。

细胞因子的评估 为了分析免疫学变化，将在基线、治疗后 3 个月和 6 个月收集牙龈缝液 (CGF)。 每个部位将用无菌棉辊隔离，并去除龈上生物膜。 在此之后，将使用 Periopaper 条（Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA）收集 CGF，将其插入口袋中 15 秒。 将测量收集的液体体积（Periotron 8000，Oraflow）。 将 Periopaper 条带储存在含有 300μl 磷酸盐盐水 (PBS) 和 5% Tween-20 的无菌试管中，并储存在-20°C 的冰箱中直至进行多重测试。 CGF中将测量以下细胞因子的水平：干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-10、-1β、-4、-6、-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α、巨噬细胞炎症蛋白 1α (MIP1α)，1α 单核细胞趋化蛋白 (MCP-1α)。 将根据制造商的说明使用 10 重高灵敏度试剂盒（Millipore Corporation，Billerica，MA，USA），并使用 MAGpixTM 平台（MiraiBio，Alameda，CA，USA）进行分析。 样品将被单独分析（每个口袋单独），浓度将使用 Xponet 程序（Millipore Corporation）中的标准 5 参数曲线计算。 每个标记的浓度将以 pg / ml 为单位给出。 细胞因子浓度的所有分析将一式两份进行。

统计分析 将进行两项分析：按照方案和意向治疗（Moher，2010 年；Gupta，2011 年；Day，2008 年）。 对于它们中的每一个，将在每个参数中计算平均值和标准偏差。 全口 PI、GI、PD、CAL 和 GR 将提交给 Shapiro-Wilk 测试以评估这些数据的分布，然后进行方差测试以进行组内和组内比较。 此外，将通过组内和组间分析在治疗前后评估 ≥ 5mm 的口袋数量、这些口袋的闭合频率、这些口袋的 PS 平均降低和 CAL 增益。

将通过组内和组间比较的方差检验分析每种细胞因子的浓度。