Integrazione giornaliera di aspirina a basso dosaggio con Omega-3 Plus nella terapia non chirurgica per il trattamento della parodontite aggressiva

La metodologia dello studio è conforme a CONSORT-STATEMENT 2010 per studi clinici controllati randomizzati.

Disegno dello studio Lo studio è concepito come uno studio clinico di superiorità prospettico, interventistico, parallelo, in cieco, randomizzato e controllato.

Fonte dei dati La popolazione di questo studio sarà reclutata tra i pazienti indirizzati all'Istituto di Scienza e Tecnologia - ICT- São José dos Campos, Facoltà di Odontoiatria. I pazienti compileranno un questionario sulla storia sana per assicurarsi che siano qualificati dal punto di vista medico per partecipare a questo studio. Sulla base del calcolo della potenza per questo studio, sarà inclusa una popolazione di 38 pazienti. Considerando un errore di tipo α del 5% e del 10% (90% di potenza) per rilevare una differenza di almeno 1 mm nella riduzione della profondità di sondaggio delle tasche ≥ 5 mm tra i gruppi, per una deviazione standard di 0,94 da uno studio precedente che valutava diversi antimicrobici nel trattamento della GAgP (Xajigeorgiou et al., 2006), saranno necessari 19 pazienti in ciascun gruppo.

Parametri clinici Tutti i parametri clinici saranno valutati da un singolo esaminatore in cieco, addestrato e calibrato (CFA) prima della terapia parodontale (basale) ea 3 e 6 mesi dopo l'utilizzo di una sonda manuale. Le misurazioni verranno eseguite in sei siti per dente (mesiobuccale, buccale, disto-buccale, distolinguale, linguale e mesiolinguale) in tutti i denti, ad eccezione dei terzi molari.

Verranno valutati i seguenti parametri clinici: 1) Indice di placca a bocca piena (FMPI); 2) Sanguinamento al sondaggio (BoP); 3) Profondità di sondaggio (PD): distanza dal fondo del solco/tasca al margine gengivale; 4) Recessione gengivale (GM): distanza dal margine gengivale libero alla giunzione cemento-smalto (CEJ); 5) Livello di attacco clinico (CAL): distanza dal fondo del solco/tasca alla CEJ. La CEJ sarà identificata da un'attenta sonda sulla zona cervicale.

Calibrazione e randomizzazione Inizialmente, verranno selezionati un totale di dieci pazienti che presentano GAgP. L'esaminatore designato (CFA) misurerà CAL e PD in tutti i pazienti due volte entro 24 ore, con un intervallo di ≥ 1 ora tra gli esami. Quindi, le misure saranno sottoposte a test di correlazione intraclasse e l'esaminatore sarà giudicato calibrato se raggiunge un accordo del 90%.

I pazienti verranno assegnati in due gruppi in base a un elenco generato dal computer. L'assegnazione sarà attuata da un ricercatore (NC) che non è stato direttamente coinvolto nelle procedure di esame o trattamento.

Protocolli di trattamento

Tutti i pazienti saranno trattati con terapia parodontale attraverso il debridement ultrasonico a bocca piena (FMUD). In un'unica sessione, i pazienti riceveranno l'anestesia locale e lo sbrigliamento parodontale con apparecchiature ad ultrasuoni (Cavitron - Dentsply EUA) e punte sottogengivali (UI25KSF10S, Hu-Friedy). Tutti i siti malati saranno strumentati in questa sessione. La sessione di debridement sarà eseguita da un unico parodontologo esperto e formato (NA), diverso dall'esaminatore. Immediatamente prima della terapia meccanica, i pazienti verranno assegnati a uno dei due protocolli di trattamento:

Gruppo di test (n = 19): FMUD + 3 g di acidi grassi polinsaturi omega-3 e 100 mg di integrazione giornaliera di aspirina per un periodo di 180 giorni; Gruppo di controllo (n = 19): FMUD + pillole placebo.

Tutti i pazienti inizieranno a prendere le pillole immediatamente prima della sessione FMUD.

Valutazione microbiologica I campioni microbiologici sottogengivali saranno raccolti al basale, 3 e 6 mesi dopo la terapia. Il sito sarà isolato con un rullo di cotone sterile e il biofilm sopragengivale sarà accuratamente rimosso con curette parodontali e una carta sterile verrà inserita nella tasca parodontale per 30 s (Hartoth et al., 1999). Il campione verrà conservato in microtubi sterili. I campioni verranno quindi liofilizzati e inviati al Dipartimento di Parodontologia dell'Università della Florida, dove verranno analizzati.

Valutazione delle citochine Per l'analisi dei cambiamenti immunologici, il liquido gengivale crevicolare (CGF) sarà raccolto al basale, 3 e 6 mesi dopo il trattamento. Ogni sito sarà isolato con un rullo di cotone sterile e il biofilm sopragengivale sarà rimosso. Successivamente, il CGF verrà raccolto con strisce Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA), inserite nella tasca per 15 secondi. Verrà misurato il volume del fluido raccolto (Periotron 8000, Oraflow). Le strisce Periopaper verranno conservate in un tubo sterile contenente 300μl di fosfato salino (PBS) con Tween-20 al 5% e conservate in un congelatore a -20 ° C fino al test multiplex. Il livello delle seguenti citochine sarà misurato nel CGF: interferone (IFN) -γ, interleuchine (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, fattore di necrosi tumorale (TNF) -α, fattore infiammatorio dei macrofagi proteina 1α (MIP1α), proteina chemiotattica monocitica 1α (MCP-1α). Il kit 10-plex ad alta sensibilità (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) sarà utilizzato secondo le istruzioni del produttore e analizzato utilizzando la piattaforma MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, USA). I campioni saranno analizzati individualmente (ogni tasca separatamente) e le concentrazioni saranno calcolate utilizzando una curva standard a 5 parametri nel programma Xponet (Millipore Corporation). La concentrazione di ciascun marcatore sarà data in pg/ml. Tutte le analisi delle concentrazioni di citochine saranno effettuate in duplicato.

Analisi statistica Verranno eseguite due analisi: Per Protocol e Intention-to-treat (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Per ciascuno di essi verrà calcolata la media e la deviazione standard in ciascuno dei parametri. PI, GI, PD, CAL e GR a bocca piena saranno sottoposti al test di Shapiro-Wilk per valutare la distribuzione di questi dati e quindi sottoposti al test della varianza per il confronto sia all'interno che all'interno del gruppo. Inoltre, il numero di tasche ≥ 5 mm, la frequenza di chiusura di queste tasche, la riduzione media di PS e l'aumento di CAL di queste tasche saranno valutati prima e dopo la terapia eseguendo analisi intra e intergruppo.

La concentrazione di ciascuna citochina sarà analizzata mediante test della varianza per il confronto intra e intergruppo.