Organoidy pochodzące z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPS) od pacjentów z gwiaździakiem wysokiego stopnia (GLIOMANOID)

Celem tej propozycji badawczej jest modelowanie ludzkiej gliogenezy przy użyciu trójwymiarowych (3D) organoidów mózgowych pochodzących z indukowanych przez człowieka pluripotencjalnych komórek macierzystych (hiPSC).

Hipoteza robocza jest taka, że ​​trójwymiarowe organoidy mózgowe mogą tworzyć struktury podobne do glejaka i rekapitulować cechy fenotypowe glejaków, gdy są generowane z hiPSC wykazujących ekspresję mutantów genetycznych związanych z predyspozycją do glejaka.

Metodologia: Aby opracować to pionierskie badanie dotyczące wykorzystania organoidów mózgowych opartych na hiPSC jako strategii modelowania glejomagenezy i badania wpływu mutantów genetycznych, zostanie pobrane jednojądrzaste komórki krwi obwodowej od 20 pacjentów z gwiaździakiem wysokiego stopnia z IDH lub bez mutacja. iPS zostanie wygenerowany z tych PBMC i zostanie zmodyfikowany genetycznie zgodnie z różnymi mutacjami. Następnie będzie generować organoidy mózgowe zgodnie ze standardowymi protokołami. Organoidy mózgowe wygenerowane ze wszystkich różnych komórek zostaną zebrane w różnych punktach czasowych i przeanalizowane pod kątem obecności struktur podobnych do glejaka i cech fenotypowych glejaków.

Na podstawie proponowanych eksperymentów można oczekiwać, że organoidy mózgowe rozwiną cechy podobne do glejaka po obecności mutacji genetycznych. W związku z tym oczekuje się wykazania, że ​​organoidy mózgowe można wykorzystać jako niezawodną strategię do testowania wpływu mutantów genetycznych, w tym możliwej synergistycznej współpracy między różnymi mutacjami na wczesne zdarzenia glejowe.