Organoïden afgeleid van geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPS) van patiënten met hooggradig astrocytoom (GLIOMANOID)

Het doel van dit onderzoeksvoorstel is om menselijke gliomagenese te modelleren met behulp van 3-dimensionale (3D) hersenorganoïden afgeleid van door mensen geïnduceerde pluripotente stamcellen (hiPSC's).

De werkhypothese is dat 3D-hersenorganoïden glioomachtige structuren kunnen ontwikkelen en fenotypische kenmerken van gliomen kunnen recapituleren wanneer ze worden gegenereerd uit hiPSC's die genetische mutanten tot expressie brengen die geassocieerd zijn met aanleg voor glioom.

Methodologie: Om deze baanbrekende studie over het gebruik van hiPSC-gebaseerde hersenorganoïden te ontwikkelen als een strategie om gliomagenese te modelleren en de impact van genetische mutanten te bestuderen, zal het de perifere mononucleaire bloedcel verzamelen van 20 patiënten met hooggradig astrocytoom met of zonder IDH mutatie. iPS zal worden gegenereerd uit deze PBMC en zal genetisch gemodificeerd worden volgens verschillende mutaties. Vervolgens worden hersenorganoïden gegenereerd volgens standaardprotocollen. Hersenorganoïden gegenereerd uit alle verschillende cellen zullen op verschillende tijdstippen worden verzameld en geanalyseerd op de aanwezigheid van glioomachtige structuren en fenotypische kenmerken van gliomen.

Uit de voorgestelde experimenten zal worden verwacht dat hersenorganoïden glioomachtige kenmerken zullen ontwikkelen bij de aanwezigheid van genetische mutaties. Er wordt dus verwacht dat hersenorganoïden kunnen worden gebruikt als een betrouwbare strategie om de impact van genetische mutanten te testen, inclusief de mogelijke synergetische samenwerking tussen verschillende mutaties op vroege gliomagene gebeurtenissen.