Wpływ melatoniny w połączeniu z chemioterapią neoadiuwantową na odpowiedź kliniczną w miejscowo zaawansowanym raku płaskonabłonkowym jamy ustnej

Tła

Rak płaskonabłonkowy jamy ustnej (OSCC) jest szóstym najczęściej występującym nowotworem złośliwym. Chirurgia jest podstawą leczenia raka jamy ustnej. W miejscowo zaawansowanym i nieoperacyjnym raku jamy ustnej operacja stanowi wyzwanie przede wszystkim dlatego, że w okolicy głowy i szyi znajduje się wiele krytycznych struktur, które mogą zostać uszkodzone przez guz lub leczenie. Uszkodzenie krytycznych struktur może skutkować znacznymi deficytami strukturalnymi, kosmetycznymi i funkcjonalnymi, które negatywnie wpływają na jakość życia.

Stwierdzono, że zastosowanie NC pozwala uzyskać resekcyjność w 39% miejscowo zaawansowanych nieoperacyjnych raków jamy ustnej. Patil i in. zgłoszony wskaźnik odpowiedzi dla schematu trzech leków (TPF) dla NC wyniósł 32% i 27,37% dla schematu dwóch leków (TP). Ogólny odsetek odpowiedzi w grupie TPF był istotnie wyższy niż w grupie PF, zarówno w fazie indukcyjnej chemioterapii, jak i po terapii lokoregionalnej (33,3% vs 19,9%, p = 0,004). Chemoreooporność stała się wyzwaniem w leczeniu OSCC, wpływając na odpowiedź guza na chemioterapię.

Hipoksyczne mikrośrodowisko występujące w OSCC charakteryzuje się wysoką ekspresją HIF-1α. Doniesiono, że CD44 i CD133 jako marker komórek macierzystych raka głowy i szyi (HNSCC) oraz miR-210 znany jako hypoxamiR przyczyniają się do chemooporności. Ponieważ niedotlenienie jest bezsprzecznie jedną z głównych przyczyn chemooporności, dopuszczalne jest stosowanie melatoniny jako przeciwutleniacza w celu zmniejszenia stanu niedotlenienia w mikrośrodowisku guza. Udowodniono, że melatonina, silny endogenny przeciwutleniacz, który ma działanie onkostatyczne, została podana w celu zmniejszenia stanu niedotlenienia guza, tak aby zwiększyła odpowiedź guza na NC. Większość badań klinicznych wykorzystuje doustną melatoninę podawaną raz dziennie w dawce 20 mg jako minimalną dawkę dającą efekt przeciwnowotworowy.

Celem tego badania jest udowodnienie skuteczności melatoniny w zwiększaniu odpowiedzi klinicznej u pacjentów z miejscowo zaawansowanym OSCC leczonych NC. Wpływ melatoniny na zmniejszenie niedotlenienia guza będzie widoczny poprzez jej wpływ na zmniejszenie ekspresji genów HIF-1α, miR-210, CD44 i CD133.

Metody

Projekt badania

To badanie jest podwójnie ślepą, randomizowaną próbą kliniczną z użyciem placebo jako porównania, trwającą od czerwca 2017 r. do lipca 2018 r. Do badania włączono pacjentów z miejscowo zaawansowanym OSSC (stadium IVA i IVB), którzy otrzymają NC. Pięćdziesięciu pacjentów leczonych w dwóch ośrodkach (RSCM i RSKD) zostało losowo przydzielonych do dwóch ramion. Dwudziestu pięciu pacjentów otrzymywało melatoninę w połączeniu z trzema pułkami NC (Taxane, Cisplatyna i 5-FU), a pozostali otrzymywali placebo z NC. Jednak tylko 25 z 50 pacjentów ukończyło protokół badania (13 pacjentów w ramieniu melatoniny i 12 w ramieniu placebo)

Ocena odpowiedzi klinicznej

Odpowiedź kliniczną oceniono oceniając MRI przed leczeniem i po leczeniu za pomocą RECIST 1.1. Po pierwsze, konieczne jest oszacowanie całkowitego obciążenia nowotworem na początku badania (zmiana docelowa i niedocelowa) i wykorzystanie tego jako porównania do kolejnych pomiarów. Następnie określa się odpowiedź nowotworu zgodnie z kryteriami definicji zgodnie z RECIST 1.1, w następujący sposób: Całkowita odpowiedź (CR) to zniknięcie wszystkich docelowych zmian chorobowych. Częściowa odpowiedź (PR) oznacza co najmniej 30% spadek sumy średnic docelowych zmian chorobowych, biorąc jako punkt odniesienia sumę średnic wyjściowych. Postępująca choroba (PD) oznacza, że ​​występuje co najmniej 20% przyrost sumy średnic zmian docelowych lub bezwzględny przyrost co najmniej 5 mm. Choroba stabilna (SD) występuje, gdy nie ma wystarczającego skurczu ani wystarczającego wzrostu docelowej zmiany. Pacjenci, którzy zostali sklasyfikowani jako PR i CR, przeszli operację, podczas gdy pacjenci z SD i PD zostali poddani biopsji gruboigłowej.

Badanie ekspresji genów

Starter do amplifikacji genów miR210, CD44 i CD133 HIF-1α zaprojektowano przy użyciu oprogramowania Primer Quest Tool IDT. Całkowita sekwencja każdego genu uzyskana ze źródła danych GenBank: National Center for Biotechnology Information (NCBI). Etapy badania ekspresji genów to izolacja RNA, synteza cDNA i bezwzględna ocena ilościowa qPCR. Wynik qPCR analizowano na podstawie stężenia ekspresji genów w porównaniu z wcześniej określoną krzywą standardową (kontrola pozytywna) każdego genu.

Analiza statystyczna

Dane analizowano za pomocą oprogramowania statystycznego SPSS 20. Saphiro Wilk został użyty do przetestowania rozkładu normalnego danych. Dane o rozkładzie normalnym i p > 0,05 przedstawiono jako średnią ± odchylenie standardowe (SD). Dane o nieprawidłowym rozkładzie danych przedstawiono w postaci mediany (wartość minimalna i maksymalna). Różnicę statystyczną poziomu koncentracji genów (dane liczbowe) pomiędzy melatoniną a placebo analizowano za pomocą testu normalności Saphiro Wilka. Dane o rozkładzie normalnym testowano za pomocą testu t niesparowanych, podczas gdy dane o rozkładzie nieprawidłowym testowano za pomocą testu Manna Whitneya. Istotna statystycznie różnica wyrażona jako p < 0,05.