Efeito da melatonina em combinação com quimioterapia neoadjuvante para resposta clínica em carcinoma de células escamosas oral localmente avançado

Fundos

Carcinoma de células escamosas do câncer oral (OSCC) é a sexta malignidade mais comum. A cirurgia é a base do tratamento para os cânceres orais. No câncer oral localmente avançado e irressecável, a cirurgia apresenta desafios principalmente porque a região da cabeça e pescoço tem muitas estruturas críticas que podem ser danificadas pelo tumor ou pelo tratamento. Danos às estruturas críticas podem resultar em déficits estruturais, cosméticos e funcionais significativos que afetam negativamente a qualidade de vida.

Verificou-se que o uso de NC atinge a ressecabilidade em 39% dos cânceres orais irressecáveis ​​localmente avançados. Patil et al. a taxa de resposta relatada com o regime de três drogas (TPF) para NC foi de 32% e 27,37% para o regime de duas drogas (TP). A taxa de resposta global no grupo TPF foi significativamente superior à do grupo PF, tanto na fase de indução-quimioterapia como após a terapia locorregional (33,3% vs 19,9%, p = 0,004). A quimiorresistência tornou-se o desafio no tratamento do OSCC afetando a resposta do tumor à quimioterapia.

O microambiente hipóxico encontrado no OSCC é marcado pela alta expressão do HIF-1α. CD44 e CD133 como um marcador de células-tronco de câncer em cabeça e pescoço (HNSCC) e miR-210 conhecido como hypoxamiR foi relatado para contribuir com quimiorresistência. Sendo a hipóxia indiscutivelmente uma das principais causas da quimiorresistência, é aceitável o uso da melatonina como antioxidante para reduzir a condição hipóxica no microambiente tumoral. A melatonina, um potente agente antioxidante endógeno com efeito oncostático comprovado, foi administrada na expectativa de reduzir a condição hipóxica do tumor para que aumentasse a resposta do tumor na NC. A maioria dos estudos clínicos usa melatonina oral administrada uma vez ao dia na dose de 20 mg como a dose mínima para produzir efeitos antitumorais.

O objetivo deste estudo é provar a eficácia da melatonina para aumentar a resposta clínica em pacientes com OSCC localmente avançado quando tratados com NC. O efeito da melatonina na redução da hipóxia tumoral será observado através de seu efeito na diminuição da expressão gênica de HIF-1α, miR-210, CD44 e CD133.

Métodos

Design de estudo

Este estudo é um ensaio clínico randomizado, duplo-cego, usando placebo como comparação, de junho de 2017 a julho de 2018. Pacientes com OSSC localmente avançados (estágio IVA e IVB) que receberão NC foram incluídos no estudo. Cinquenta pacientes tratados em dois centros (RSCM e RSKD) foram alocados aleatoriamente em dois braços. Vinte e cinco pacientes receberam melatonina combinada com três regimes NC (Taxane, Cisplatina e 5-FU) e o outro recebeu placebo com NC. No entanto, apenas 25 dos 50 pacientes completaram o protocolo do estudo (13 pacientes no braço da melatonina e 12 no braço do placebo)

Avaliação da Resposta Clínica

A resposta clínica foi avaliada por ressonância magnética pré-tratamento e pós-tratamento com o auxílio de RECIST 1.1. Primeiro, é necessário estimar a carga total do tumor na linha de base (lesão alvo e não alvo) e usar isso como um comparador para medição subsequente. A resposta tumoral é então determinada de acordo com os critérios de definição de acordo com RECIST 1.1, como segue: Resposta completa (CR) é o desaparecimento de todas as lesões-alvo. Resposta parcial (RP) significa que há pelo menos 30% de diminuição na soma dos diâmetros das lesões-alvo, tomando como referência os diâmetros da soma da linha de base. Doença progressiva (DP) significa que há pelo menos um incremento de 20% na soma dos diâmetros das lesões-alvo ou um incremento absoluto de pelo menos 5 mm. Doença estável (SD) é quando não há encolhimento suficiente nem aumento suficiente da lesão-alvo. Os pacientes categorizados como PR e CR foram submetidos à cirurgia, enquanto aqueles com SD e PD foram submetidos à biópsia central.

Exame de expressão de genes

O primer para amplificação dos genes HIF-1α miR210, CD44 e CD133 foi projetado usando um software Primer Quest Tool IDT. A sequência total de cada gene obtido da fonte de dados do GenBank: National Center for Biotechnology Information (NCBI). As etapas do exame de expressão gênica são isolamento de RNA, síntese de cDNA e quantificação absoluta qPCR. O resultado da qPCR foi analisado com base na concentração de expressão gênica comparada à curva padrão pré-determinada (controle positivo) de cada gene.

Análise estatística

Os dados foram analisados ​​com o software estatístico SPSS 20. Saphiro Wilk foi usado para testar a distribuição normal dos dados. Dados com distribuição normal e com p > 0,05 apresentados em média +- desvio padrão (DP). Dados com distribuição anormal de dados apresentados em mediana (valor mínimo e máximo). A diferença estatística do nível de concentração gênica (dados numéricos) entre melatonina e placebo foi analisada por meio do teste de normalidade de Saphiro Wilk. Dados com distribuição normal foram testados usando o teste T não pareado, enquanto dados com distribuição anormal foram testados usando Mann Whitney. Diferença estatisticamente significativa declarada como p < 0,05.