Účinek melatoninu v kombinaci s neoadjuvantní chemoterapií ke klinické odpovědi u lokálně pokročilého spinocelulárního karcinomu ústní dutiny

Pozadí

Spinocelulární karcinom ústní dutiny (OSCC) je šestým nejčastějším zhoubným nádorem. Chirurgie je základem léčby rakoviny ústní dutiny. U lokálně pokročilého a neresekovatelného karcinomu dutiny ústní představuje chirurgický zákrok problémy především proto, že oblast hlavy a krku má mnoho kritických struktur, které mohou být poškozeny nádorem nebo léčbou. Poškození kritických struktur může mít za následek významné strukturální, kosmetické a funkční deficity, které negativně ovlivňují kvalitu života.

Bylo zjištěno, že použití NC dosáhlo resekability u 39 % lokálně pokročilých neresekabilních karcinomů dutiny ústní. Patil a kol. hlášená míra odpovědí s režimem tří léků (TPF) pro NC byla 32 % a 27,37 % pro režim se dvěma léky (TP). Celková míra odpovědi ve skupině TPF byla významně vyšší než ve skupině PF, a to jak ve fázi indukční chemoterapie, tak po lokoregionální terapii (33,3 % vs. 19,9 %, p = 0,004). Chemorezistence se stala výzvou v léčbě OSCC ovlivňující odpověď nádoru na chemoterapii.

Hypoxické mikroprostředí nalezené v OSCC se vyznačuje vysokou expresí HIF-1α. Bylo hlášeno, že CD44 a CD133 jako marker rakovinných kmenových buněk v hlavě a krku (HNSCC) a miR-210 známé jako hypoxamiR přispívají k chemorezistenci. Jako hypoxie, která je nepochybně jednou z hlavních příčin chemorezistence, je vhodné používat melatonin jako antioxidant ke snížení hypoxického stavu v mikroprostředí nádoru. Melatonin, silný endogenní antioxidační prostředek, u kterého bylo prokázáno, že má onkostatický účinek, byl podán za předpokladu, že sníží hypoxický stav nádoru, takže zvýší odpověď nádoru na NC. Většina klinických studií používá perorální melatonin podávaný jednou denně v dávce 20 mg jako minimální dávku pro dosažení protinádorových účinků.

Účelem této studie je prokázat účinnost melatoninu na zvýšení klinické odpovědi u lokálně pokročilých pacientů s OSCC při léčbě NC. Účinek melatoninu na snížení nádorové hypoxie bude patrný prostřednictvím jeho účinku na snížení genové exprese HIF-la, miR-210, CD44 a CD133.

Metody

Studovat design

Tato studie je dvojitě zaslepená, randomizovaná klinická studie s použitím placeba jako srovnání probíhající od června 2017 do července 2018. Do studie byli zahrnuti lokálně pokročilí pacienti s OSSC (stadium IVA a IVB), kteří dostanou NC. Padesát pacientů léčených ve dvou centrech (RSCM a RSKD) bylo náhodně rozděleno do dvou ramen. Dvacet pět pacientů dostávalo melatonin v kombinaci se třemi režimy NC (Taxane, Cisplatina a 5-FU) a druhý dostával placebo s NC. Pouze 25 z 50 pacientů však dokončilo protokol studie (13 pacientů v rameni s melatoninem a 12 v rameni s placebem)

Hodnocení klinické odezvy

Klinická odpověď byla hodnocena vyhodnocením MRI před léčbou a po léčbě pomocí RECIST 1.1. Nejprve je nutné odhadnout celkovou nádorovou zátěž na začátku (cílová a necílová léze) a použít ji jako komparátor pro následné měření. Nádorová odpověď se pak určí podle definičních kritérií podle RECIST 1.1 následovně: Kompletní odpověď (CR) je vymizení všech cílových lézí. Částečná odezva (PR) znamená, že v součtu průměrů cílových lézí došlo k alespoň 30% snížení, přičemž se za referenční součty průměrů považuje výchozí hodnota. Progresivní onemocnění (PD) znamená, že v součtu průměrů cílových lézí je alespoň 20% přírůstek nebo absolutní přírůstek alespoň 5 mm. Stabilní onemocnění (SD) je, když nedochází ani k dostatečnému zmenšení, ani dostatečnému nárůstu cílové léze. Pacienti, kteří byli kategorizováni jako PR a CR, podstoupili operaci, zatímco pacienti se SD a PD podstoupili jádrovou biopsii.

Vyšetření genové exprese

Primer pro amplifikaci genů HIF-la miR210, CD44 a CD133 byl navržen pomocí softwaru Primer Quest Tool IDT. Celková sekvence každého genu získaná ze zdroje dat GenBank: Národní centrum pro biotechnologické informace (NCBI). Kroky vyšetření genové exprese jsou izolace RNA, syntéza cDNA a absolutní kvantifikace qPCR. Výsledek qPCR byl analyzován na základě koncentrace genové exprese v porovnání s předem stanovenou standardní křivkou (pozitivní kontrola) každého genu.

Statistická analýza

Data byla analyzována statistickým softwarem SPSS 20. Saphiro Wilk byl použit k testování normální distribuce dat. Údaje s normální distribucí as p > 0,05 jsou uvedeny jako průměr ± standardní odchylka (SD). Data s abnormální distribucí dat prezentovaná v mediánu (minimální a maximální hodnota). Statistický rozdíl hladiny koncentrace genu (numerická data) mezi melatoninem a placebem byl analyzován pomocí testu normality Saphiro Wilka. Data s normální distribucí byla testována pomocí nepárového T testu, zatímco data s abnormální distribucí byla testována pomocí Mann Whitney. Statisticky významný rozdíl je uveden jako p < 0,05.