褪黑激素联合新辅助化疗对局部晚期口腔鳞状细胞癌临床反应的影响

背景

口腔鳞状细胞癌 (OSCC) 是第六大最常见的恶性肿瘤。 手术是治疗口腔癌的主要手段。 在局部晚期和不可切除的口腔癌中，手术带来的挑战主要是因为头部和颈部区域有许多可能被肿瘤或治疗破坏的关键结构。 关键结构的损坏会导致严重的结构、外观和功能缺陷，从而对生活质量产生负面影响。

发现使用 NC 可使 39% 的局部晚期不可切除口腔癌实现可切除性。 帕蒂尔等人。据报道，三种药物方案 (TPF) 对 NC 的反应率为 32%，而两种药物方案 (TP) 的反应率为 27.37%。 TPF 组的总体反应率显着高于 PF 组，无论是在诱导化疗阶段还是在局部区域治疗后（33.3% 对 19.9%，p = 0.004）。 化疗耐药性已成为影响肿瘤对化疗反应的 OSCC 治疗的挑战。

OSCC 中发现的缺氧微环境以 HIF-1α 的高表达为特征。 据报道，CD44 和 CD133 作为头颈部 (HNSCC) 中的癌症干细胞标记物和称为 hypoxamiR 的 miR-210 有助于化疗耐药性。 由于缺氧无疑是化疗耐药的主要原因之一，因此可以使用褪黑激素作为抗氧化剂来减少肿瘤微环境中的缺氧条件。 褪黑激素是一种有效的内源性抗氧化剂，已被证明具有抑制肿瘤的作用，预计可减少肿瘤缺氧条件，从而增加肿瘤对 NC 的反应。 大多数临床研究使用口服褪黑激素，每天一次，剂量为 20 毫克，作为产生抗肿瘤作用的最小剂量。

本研究的目的是证明褪黑激素在接受 NC 治疗时提高局部晚期 OSCC 患者临床反应的有效性。 褪黑激素在减少肿瘤缺氧方面的作用将通过其降低 HIF-1α、miR-210、CD44 和 CD133 基因表达的作用来观察。

方法

学习规划

本研究是一项双盲、随机临床试验，使用安慰剂作为比较，时间为 2017 年 6 月至 2018 年 7 月。 接受 NC 治疗的局部晚期 OSSC（IVA 和 IVB 期）患者被纳入研究。 在两个中心（RSCM 和 RSKD）接受治疗的 50 名患者被随机分配到两组。 25 名患者接受褪黑激素联合三种方案 NC（紫杉烷、顺铂和 5-FU），另一名患者接受安慰剂和 NC。 然而，50 名患者中只有 25 名完成了研究方案（褪黑激素组 13 名患者，安慰剂组 12 名患者）

临床反应评估

通过借助 RECIST 1.1 评估治疗前和治疗后 MRI 来评估临床反应。 首先，有必要估计基线时的总体肿瘤负荷（目标和非目标病变），并将其用作后续测量的比较。 然后根据 RECIST 1.1 的定义标准确定肿瘤反应，如下所示： 完全反应 (CR) 是所有目标病灶的消失。 部分反应（PR）是指以基线直径总和为参考，目标病灶的直径总和至少减少了30%。 疾病进展 (PD) 是指靶病灶直径总和至少增加 20%，或绝对增加至少 5 毫米。 疾病稳定 (SD) 是指目标病变既没有充分收缩也没有足够增加。 归类为 PR 和 CR 的患者进行了手术，而 SD 和 PD 的患者进行了核心活检。

基因表达检查

HIF-1α miR210、CD44 和 CD133 基因扩增的引物是使用 Primer Quest Tool IDT 软件设计的。 每个基因的全序列来自GenBank数据来源：国家生物技术信息中心（NCBI）。 基因表达检查的步骤是 RNA 分离、cDNA 合成和绝对定量 qPCR。 基于与每个基因的预先确定的标准曲线（阳性对照）比较的基因表达浓度来分析qPCR结果。

统计分析

数据采用统计软件SPSS 20进行分析。 Saphiro Wilk 用于测试数据的正态分布。 具有正态分布且 p > 0.05 的数据以平均值±标准差 (SD) 表示。 数据分布异常的数据以中位数（最小值和最大值）表示。 使用 Saphiro Wilk 的正态性检验分析褪黑激素和安慰剂之间基因浓度水平（数值数据）的统计差异。 正态分布数据采用非配对T检验，异常分布数据采用Mann Whitney检验。 统计显着性差异表示为 p < 0,05。