Mikrobiota skóry i błon śluzowych pacjentów z zapalnymi chorobami skóry

Tło i cel Patogeneza wielu chorób zapalnych nie jest w pełni poznana, jednak coraz częściej bada się dysregulację ludzkiej mikroflory jako możliwy czynnik przyczyniający się do tego. Ludzka mikrobiota obejmuje bakterie, archeony, wirusy i grzyby. Ogólnie niewiele wiadomo na temat kolonizacji grzybów w zapalnych chorobach skóry, chociaż wydaje się, że u pacjentów z łuszczycą i atopowym zapaleniem skóry występuje zwiększona liczba gatunków Candida w błonie śluzowej jamy ustnej, skórze i kale. Zapalenie jest również ważną częścią patogenezy innych chorób skóry, takich jak ropne zapalenie gruczołów potowych, trądzik, zapalenie naczyń i owrzodzenia zapalne. Być może zwiększona kolonizacja grzybów może występować w wielu zapalnych chorobach skóry, jednak nie było to wcześniej badane. Badania chorób zapalnych obejmujących inne obszary ciała, takie jak toczeń rumieniowaty układowy, choroba Sjögrena, stwardnienie rozsiane i zapalenie stawów kręgosłupa, również wykazały zwiększoną kolonizację gatunkami Candida. Nie jest jednak jasne, czy kolonizacja Candida jest przyczyną, czy skutkiem choroby zapalnej. Leczenie chorób zapalnych ogólnoustrojowymi lekami immunomodulującymi lub powtarzająca się antybiotykoterapia może również wpływać na kolonizację drożdży. Pojawienie się terapii biologicznych, które bezpośrednio lub pośrednio modulują szlak interleukiny (IL) 17, podkreśla potrzebę dalszej wiedzy, ponieważ szlak IL-17 bierze udział w obronie przed infekcjami drożdżakami u zdrowych osób. Do tej pory badania kolonizacji drożdży koncentrowały się głównie na Candida i Malassezia. Nadal nie jest pewne, czy inne gatunki drożdży mogą być interesujące.

Celem pracy jest zbadanie częstości występowania mikrobiomu i infekcji w skórze i błonie śluzowej jamy ustnej u różnych pacjentów i zdrowych ochotników odwiedzających Poradnię Dermatologiczną.

Metody Wykonanie badania Projekt jest realizowany we współpracy między Oddziałem Dermatologicznym Szpitala Uniwersyteckiego w Roskilde i Statens Serum Institut (SSI) pod kierownictwem głównego badacza, starszego lekarza dermatologa, dr Ditte Marie Lindhardt Saunte. Projekt jest wspierany przez lekarza dermatologa, dr Elisabeth Hjardem Taudorf, pielęgniarkę dermatologiczną Helle Anette Jensen oraz grupę badawczą powołaną na Oddziale Dermatologicznym. Próbki będą analizowane w SSI w Dpt. bakterii, pasożytów i grzybów pod kierownictwem dr Henrika Vedela Nielsena i kierownika Bioinformatyki Mikrobiologicznej, Wydziału Bakterii, Pasożytów i Grzybów, dr Marca Steggera.

Projekt badania Badanie kliniczno-kontrolne porównujące częstość kolonizacji lub zakażenia drożdżakami skóry i błony śluzowej jamy ustnej u pacjentów z różnymi chorobami skóry i u zdrowych ochotników. Pacjenci z wybranymi chorobami skóry, personel Szpitala Uniwersyteckiego Zelandia w Roskilde, krewni personelu i studenci związani z Oddziałem Dermatologicznym zostaną poproszeni o wypełnienie krótkiej ankiety i pobranie wymazów z błony śluzowej jamy ustnej oraz zeskrobin i pasków plastra ze skóry ze zmianami chorobowymi (tylko pacjenci) i skóry bez zmian chorobowych (wszyscy).

Swapy będą badane w Dept. of Microbial Bioinformatics, Department of Bacteria, Parasites and Fungi, Statens Serum Institut. Podgrupa pacjentów rozpoczynających terapię ogólnoustrojową z powodu swojej choroby skóry na pierwszym badaniu zostanie poproszona o powtórzenie kwestionariusza, zamiany, zeskrobiny skóry i paski plastra po około trzech miesiącach.

Zdjęcia kliniczne zmienionej skóry lub błony śluzowej będą wykonywane i przechowywane w bezpiecznym miejscu informatycznym (Sharepoint oraz w raporcie klinicznym SP) po uzyskaniu pisemnej zgody.

Statystyki rozpowszechnienia i iloraz szans (OR) zostaną określone. Z dwustronnym poziomem istotności 95%, mocą 80%, oczekiwanym stosunkiem zdrowych osób kontrolnych do pacjentów z chorobą skóry równym 0,5 i oczekiwanym OR równym 2,73, minimalna wielkość próby 127 pacjentów na chorobę skóry i 64 zdrowych potrzebne są kontrole. Naszym celem jest uwzględnienie około 130 pacjentów z każdą chorobą skóry. W sumie zostanie włączonych maksymalnie 700 osobników, z czego 70 będzie zdrowymi kontrolami. Włączenie pacjentów z rzadkimi chorobami skóry może wymagać mniejszej liczby pacjentów w niektórych grupach.

Zagrożenia, skutki uboczne i wady Wszystkie próbki składają się z nieinwazyjnej wymiany błony śluzowej, zeskrobin skóry lub powierzchownych pasków taśmy, co nie wiąże się z ryzykiem wystąpienia znanych działań niepożądanych. Może to wiązać się z minimalnym dyskomfortem podczas pobierania próbek, a uczestnicy mogą poświęcić dodatkowe 15 minut swojego czasu na uzyskanie informacji dotyczących projektu. Poza tym projekt ten nie powoduje żadnych znanych zagrożeń, skutków ubocznych ani wad.

Materiał biologiczny Wymienne błony śluzowe i skóra. W ten projekt nie jest zaangażowany żaden biobank.

Ekonomia Oddział Dermatologiczny Szpitala Uniwersyteckiego Roskilde dostarcza próbki materiałów, a Wydział Bakterii, Pasożytów i Grzybów Instytutu Statens Serum w Kopenhadze analizuje próbki. Oba wydziały pokrywają własne wydatki. Projekt jest całkowicie niezależny i nie otrzymuje wsparcia finansowego od osób trzecich. Żaden z zaangażowanych pracowników naukowych nie otrzymuje wynagrodzenia za udział ani nie ma konfliktu interesów związanego z projektem.

Wynagrodzenie dla uczestników badania Uczestnicy nie otrzymają żadnego wynagrodzenia ani rekompensaty związanej z udziałem w badaniu.

Rekrutacja uczestników badania i świadoma zgoda Pacjenci, krewni i personel związany z Oddziałem Dermatologicznym w Roskilde zostaną poproszeni o udział. Pacjenci i ich bliscy będą rekrutowani podczas rutynowej wizyty w klinice, a personelowi zostanie zaproponowany udział w regularnym spotkaniu personelu. Odbędą się prywatne konsultacje, podczas których każdy uczestnik otrzyma indywidualne ustne i pisemne informacje na temat projektu w spokojnej atmosferze. Uczestnik może przyprowadzić osobę postronną i otrzyma czas na rozważenie. Na życzenie zostanie przeprowadzone dodatkowe przesłuchanie z możliwością ponownego przyprowadzenia osoby postronnej. Jeśli dana osoba chce wziąć udział w projekcie i spełnia kryteria włączenia, zostanie podpisana świadoma zgoda, wypełniona krótka ankieta i pobrane próbki podczas zwykłej wizyty ambulatoryjnej lub podczas indywidualnej wizyty.

Publikacja wyników Pozytywne jak i negatywne wyniki będą publikowane w odpowiednich międzynarodowych czasopismach naukowych oraz prezentowane na zjazdach i kongresach naukowych.

Etyka badań Wielu pacjentów, personel i krewni zostaną poproszeni o udział w tym badaniu kliniczno-kontrolnym, spędzą trochę dodatkowego czasu podczas wizyty w klinice i mogą odczuwać minimalny dyskomfort podczas pobierania próbek. Natomiast informacje o mikrobiomie w różnych chorobach skóry mogą dostarczyć zupełnie nowego wglądu i stanowić podstawę do dalszych badań w celu wykrycia możliwego związku przyczynowego między mikrobiomem a zapalnymi chorobami skóry. Tak więc potencjalne niewielkie niedogodności dla uczestników projektu można zdecydowanie uzasadnić dużą ilością uzyskanej nowej wiedzy.