Podawanie przeciwutleniaczy niepłodnym mężczyznom i jakość nasienia

Niepłodność dotyka do 15% par starających się o dziecko, przy czym czynnik męski ma udział w około 50% przypadków. Stwierdzono, że stres oksydacyjny (OS) jest jednym z wielu czynników powodujących niepłodność męską, powodując uszkodzenie plemników. OS powoduje uszkodzenia komórek z powodu zwiększonej produkcji reaktywnych form tlenu (ROS), które pokonują mechanizmy antyoksydacyjne ludzkiego organizmu. RFT to utleniacze, które powstają jako produkt uboczny metabolizmu tlenu, posiadają co najmniej jeden wolny elektron. Dzięki temu wolnemu elektronowi w ich zewnętrznej warstwie tworzą się bardzo aktywne lub nietrwałe substancje. O ile niewielkie ilości RFT są niezbędne do prawidłowego funkcjonowania plemników, o tyle ich zwiększone ilości mają negatywny wpływ na jakość nasienia i mogą zaszkodzić jego potencjałowi płodności, indukując w ten sposób męską niepłodność.

Plemniki były pierwszymi komórkami, które okazały się wrażliwe na OS, ponieważ brakuje im niezbędnych do naprawy systemów enzymów cytoplazmatycznych, przez co nie są w stanie naprawić uszkodzeń. Ponadto ich błony cytoplazmatyczne są bogate w wielonienasycone kwasy tłuszczowe (PUFA), co czyni je bardzo podatnymi na uszkodzenia wywołane przez tlen, takie jak peroksydacja lipidów (LPO). Szybka utrata wewnątrzkomórkowego trójfosforanu adenozyny (ATP) przez LPO jest odpowiedzialna za osiowe uszkodzenie, morfologiczne uszkodzenie szyjki plemnika i zmniejszenie ruchliwości plemników; zdarzenia te przyczyniają się do zmniejszenia ruchliwości plemników.

OS wiąże się również ze zmniejszonym zapłodnieniem, opóźnionym wzrostem wewnątrzmacicznym, poronieniami, wadami wrodzonymi (w tym autyzmem) i rakiem wieku dziecięcego. RFT występujące w nasieniu pochodzą z różnych czynników endogennych i egzogennych. Plemniki ludzkie obejmują dojrzałe i niedojrzałe plemniki, leukocyty i białe krwinki. Leukocyty (głównie neutrofile i makrofagi) oraz niedojrzałe plemniki są uważane za główne endogenne źródła RFT, podczas gdy styl życia, taki jak palenie tytoniu, nadmierne spożywanie alkoholu i inne czynniki środowiskowe, takie jak promieniowanie i toksyny, mogą przyczyniać się do produkcji egzogennych RFT.

Ponieważ stres oksydacyjny (OS) wynika z braku równowagi nadprodukcji ROS i zmniejszonej zdolności systemów antyoksydacyjnych plemników, wiele badań miało na celu poprawę jakości nasienia poprzez podawanie przeciwutleniających schematów terapeutycznych. Ogólnie rzecz biorąc, terapia przeciwutleniająca obejmuje podawanie doustnych przeciwutleniaczy i dodawanie przeciwutleniaczy in vitro do pożywek hodowlanych, które są używane do przygotowania próbek w technikach wspomaganego rozrodu (ART). Przebadano wiele różnych kombinacji przeciwutleniaczy. Coraz więcej badań wskazuje na korzystny wpływ przeciwutleniaczy na zmniejszenie fragmentacji plemników i poprawę jakości nasienia. Badanie Agarwal i Sekhon wykazało dodatnią korelację między terapią antyoksydacyjną a różnymi parametrami nasienia. Nie można jednak wyciągnąć jednoznacznych wniosków dotyczących korzystnego wpływu doustnych przeciwutleniaczy, ponieważ większość dostępnych badań obejmowała małą liczebność próby, wykorzystywano różne kombinacje przeciwutleniaczy oraz techniki stosowane do wykrywania ROS i wskaźnika fragmentacji DNA (DFI) nie były standaryzowane.

CEL BADANIA Celem tego randomizowanego badania klinicznego jest ocena wpływu doustnego podawania przeciwutleniaczy niepłodnym mężczyznom poprzez ocenę zmiennych nasienia, DFI plemników i poziomów ROS. Doustne przeciwutleniacze lub placebo będą podawane przez 3 kolejne miesiące.

Badanie to odbędzie się na Oddziale Endokrynologii Rozrodu na 1. Wydziale Położnictwa/Gin, Szkoły Medycznej Uniwersytetu Arystotelesa w Salonikach we współpracy z prywatnym andrologicznym centrum diagnostycznym pana Th. Zeginiadou.

PACJENCI Do badania zostaną włączeni niepłodni mężczyźni, którzy mają jeden wcześniejszy nieprawidłowy spermiogram, z co najmniej jedną zmienną patologiczną (koncentracja, ruchliwość, morfologia), zgodnie z kryteriami WHO 2010.

WYNIKI

Główny wynik:

Zmienne analizy WHO plemników: koncentracja, ruchliwość, morfologia.

Wyniki drugorzędne:

Stężenie ROS w nasieniu i nasieniu DFI

PROJEKT BADANIA

Rodzaj studiów:

Randomizowane badanie kliniczne

Do badania zostaną włączeni niepłodni mężczyźni, którzy mają jeden wcześniej nieprawidłowy spermiogram, z co najmniej jedną zmienną patologiczną (koncentracja, ruchliwość, morfologia), zgodnie z kryteriami WHO 2010. Uczestnicy będą rekrutowani w ambulatorium Oddziału Rozrodu Człowieka oraz Oddziału Endokrynologii Rozrodu I Oddziału Położniczo-Gin. Wybrani uczestnicy podpiszą formularz zgody i zostaną poproszeni o pobranie nasienia w prywatnym andrologicznym centrum diagnostycznym Pana Th. Zeginiadou. Pobrane próbki plemników zostaną ocenione pod kątem koncentracji, ruchliwości, morfologii i żywotności plemników, a także stężenia ROS i DFI. Doustne przeciwutleniacze lub placebo będą podawane przez 3 kolejne miesiące. Pod koniec 3-miesięcznego okresu uczestnicy zostaną poproszeni o ponowne pobranie nasienia w celu oceny tych samych zmiennych.

Obliczanie wielkości próby Szacunkowa wielkość próby dla testu średnich z dwóch próbek, przy założeniu wspólnego odchylenia standardowego 15 i średniej ruchliwości 20 w grupie kontrolnej i 30 w grupie antyoksydacyjnej daje obliczoną wielkość próby 74. Aby umożliwić rezygnację z leczenia, zostanie zrekrutowanych 80 pacjentów.