Zamrażanie tkanek gonad w celu zachowania płodności u osób zagrożonych dysfunkcją jajników i przedwczesną niewydolnością jajników

Opis badania:

Kriokonserwacja i ocena tkanki jajnika u osób z zespołem Turnera, osób z zespołem Turnera z materiałem Y po profilaktycznej gonadektomii, galaktozemii, nastolatek po menarche z niedawną przedwczesną niewydolnością jajników oraz nastolatków ze zmniejszoną rezerwą jajników (DOR), u których występują przeciwwskazania do stymulacji jajników jak również te ze zmniejszoną rezerwą jajnikową, które nie zareagowały na stymulację jajników, co jest związane z ostrym lub przewlekłym wpływem na czynność jajników i reprodukcję.

Cele:

Główne cele: Po wstępnej ocenie liczby i jakości pęcherzyków przed i po kriokonserwacji i rozmrożeniu, pozostała tkanka zostanie wykorzystana do badań nad mechanizmami utraty pęcherzyków u Turnera i galaktozemii oraz u nastolatek po menarche z niedawnym rozpoznaniem POI

1. Przeprowadzimy sekwencjonowanie RNA pojedynczej komórki/jądra na tkance pobranej od uczestników badania i jajników od zmarłych dawców narządów przy wspomaganiu krążeniowo-oddechowym.
2. Przeprowadzimy sekwencjonowanie RNA pojedynczej komórki/jądra na świeżej tkance jajnika i porównamy ją z zamrożoną i rozmrożoną tkanką

Hipoteza: Sekwencjonowanie RNA pojedynczej komórki/jądra z tkanki uzyskanej z jajników u osób z tymi schorzeniami będzie się znacznie różnić od sekwencjonowania u osób z grupy kontrolnej. Takie różnice mogą pozwolić na dalszy rozwój hipotez dotyczących podstawowego mechanizmu utraty i / lub dysfunkcji pęcherzyków u osób z tymi schorzeniami.

Cel drugorzędny: Niniejszy protokół ma na celu ocenę wykonalności (tj. uzasadnionych przewidywań co do przyszłej płodności w oparciu o anatomię, histologię i fizjologię świeżej tkanki jajnika, jak również skutków po zamrożeniu i rozmrożeniu) kriokonserwacji tkanki jajnika (OTC) w celu zachowanie płodności u dzieci ze zwiększonym ryzykiem utraty czynności jajników z powodu zespołu Turnera (z materiałem Y lub bez materiału Y) lub galaktozemii oraz u młodzieży po menarche, z niedawno rozwiniętą przedwczesną niewydolnością jajników (POI) lub ze zmniejszoną rezerwą jajnikową (osoby, które nie nie reagują na stymulację jajników w celu kriokonserwacji oocytów z powodu mniejszej liczby pęcherzyków).

1. Wykonalność zostanie oceniona poprzez ocenę liczby i jakości pęcherzyków znalezionych w tkance przed zamrożeniem i po rozmrożeniu.

2. Brak pęcherzyków w tkance jajnika potwierdzi, że OTC nie jest realną opcją

   populacja.

3. Zostanie podjęta próba skorelowania markerów laboratoryjnych i obrazowych z obecnością i liczbą pęcherzyków.

Hipoteza: Młode osoby z zespołem Turnera i galaktozemią oraz nastolatki z niedawnym POI są siedliskiem populacji pęcherzyków, które mogą być zachowane poprzez kriokonserwację tkanki jajnika dla przyszłej płodności.

1. Pojawią się różne wyniki pęcherzyków, które będą korelować z hormonem anty-Mullerowskim (AMH), wiekiem i stanem podstawowym pacjenta.
2. Utrata mieszków włosowych podczas kriokonserwacji i rozmrażania będzie podobna do utraty mieszków włosowych zdrowych

osoby.

Cele trzeciorzędne: Badania dotyczące hamowania i aktywacji pęcherzyków w tkance

zostanie podjęta.

1. Tkanka zostanie potraktowana znanymi inhibitorami i aktywatorami oraz pojedynczym komórkowym/jądrowym RNA

zostanie przeprowadzone sekwencjonowanie w celu oceny ekspresji genów przed i po leczeniu

Hipoteza: Pęcherzyki pierwotne w tkance jajnika u osób z tymi schorzeniami

może być zablokowany przed aktywacją. Takie techniki mogą pozwolić na zmniejszenie pęcherzyka

utraty wraz z zamrażaniem i rozmrażaniem, jak również możliwy przyszły rozwój nowych metod leczenia

zapobiegać przyspieszonej utracie pęcherzyków jajnikowych u osób i młodzieży dotkniętych tymi stanami.

Promowanie aktywacji pęcherzyka przed ponownym wszczepieniem tkanki może poprawić możliwość zajścia w ciążę po ponownym wszczepieniu tkanki

Punkty końcowe:

Podstawowe punkty końcowe:

1. Tkanka do badań: Sekwencjonowanie RNA pojedynczej komórki/jądra zostanie przeprowadzone na tkankach

   dotkniętych chorobą i w porównaniu z grupą kontrolną dobraną pod względem wieku, która będzie dawcą narządów ze zwłok przy wspomaganiu krążeniowo-oddechowym. Umożliwi to porównanie specyficznych typów komórek w obrębie jajnika oraz badania eksploracyjne dotyczące możliwych mechanizmów utraty pęcherzyków w tych populacjach.

2. Sekwencjonowanie pojedynczej komórki/jądra RNA na świeżej tkance w porównaniu z zamrożoną i rozmrożoną tkanką. Ten

oceni, jakie zmiany w transkrypcji zachodzą w wyniku procesu zamrażania.

Drugorzędowy punkt końcowy:

1. Ocena gęstości i jakości pęcherzyków w jajnikach pacjentek z zespołem Turnera (z materiałem Y lub bez), galaktozemią oraz nastolatek po menarche z przedwczesną niewydolnością jajników lub zmniejszoną rezerwą jajnikową (u których brak odpowiedzi na stymulację jajników w celu kriokonserwacji oocytów) z powodu mniejszej liczby pęcherzyków)
2. Korelacja gęstości i jakości pęcherzyków z markerami takimi jak wiek, AMH, stan.
3. Porównanie poziomów hormonów, takich jak AMH, FSH, LH i estradiol między pacjentami i grupą kontrolną.

Trzeciorzędny punkt końcowy

-Ocena zmian w sekwencjonowaniu RNA pojedynczej komórki/jądra w tkance przed i po leczeniu inhibitorami i aktywatorami pierwotnych pęcherzyków. Pozostała tkanka zostanie zamrożona do przyszłych eksperymentów.