Congelamento del tessuto gonadico per preservare la fertilità in soggetti a rischio di disfunzione ovarica e insufficienza ovarica prematura

Descrizione dello studio:

Crioconservazione e valutazione del tessuto ovarico in individui con sindrome di Turner, individui con sindrome di Turner con materiale Y sottoposti a gonadectomia profilattica, galattosemia, adolescenti dopo il menarca con recente insufficienza ovarica prematura e adolescenti con ridotta riserva ovarica (DOR) che hanno controindicazioni alla stimolazione ovarica così come quelli con ridotta riserva ovarica che non hanno risposto alla stimolazione ovarica, che sono associati a effetti acuti o cronici sulla funzione ovarica e sulla riproduzione.

Obiettivi:

Obiettivi primari: Dopo la valutazione iniziale del numero e della qualità dei follicoli prima e dopo la crioconservazione e lo scongelamento, il tessuto rimanente sarà utilizzato per eseguire ricerche sui meccanismi di perdita del follicolo in Turner e galattosemia, nonché in individui adolescenti post-menarca con una recente diagnosi di PDI

1. Eseguiremo il sequenziamento dell'RNA di singola cellula/nucleo sul tessuto raccolto dai partecipanti allo studio e dalle ovaie di donatori di organi da cadavere su supporto cardiopolmonare.
2. Eseguiremo il sequenziamento dell'RNA di singola cellula/nucleo su tessuto ovarico fresco e lo confronteremo con tessuto congelato e scongelato

Ipotesi: il sequenziamento dell'RNA di singola cellula/nucleo da tessuto ottenuto da ovaie in individui con queste condizioni differirà significativamente da quello dei controlli. Tali differenze possono consentire un ulteriore sviluppo di ipotesi riguardo al meccanismo alla base della perdita e/o della disfunzione del follicolo negli individui con queste condizioni.

Obiettivo secondario: questo protocollo è progettato per valutare la fattibilità (ovvero una ragionevole aspettativa di fertilità futura basata sull'anatomia, l'istologia e la fisiologia del tessuto ovarico fresco, nonché gli effetti dopo il congelamento e lo scongelamento) della crioconservazione del tessuto ovarico (OTC) per preservazione della fertilità nelle bambine con aumentato rischio di perdita della funzione ovarica a causa della sindrome di Turner (con o senza materiale Y) o galattosemia e adolescenti post-menarca con un recente sviluppo di insufficienza ovarica precoce (POI) o con ridotta riserva ovarica (quelle che non non rispondono alla stimolazione ovarica per la crioconservazione degli ovociti a causa della minore conta dei follicoli).

1. La fattibilità sarà valutata attraverso la valutazione del numero e della qualità dei follicoli presenti nel tessuto prima del congelamento e dopo lo scongelamento.

2. La mancanza di follicoli nel tessuto ovarico confermerà che l'OTC non è un'opzione praticabile per questo

   popolazione.

3. Verrà effettuato un tentativo di correlare i marcatori di laboratorio e di imaging con la presenza e il numero dei follicoli.

Ipotesi: individui giovani con sindrome di Turner e galattosemia e adolescenti con POI recente ospitano popolazioni di follicoli che possono essere preservate attraverso la crioconservazione del tessuto ovarico per la futura fertilità.

1. Ci sarà una varietà di risultati follicolari che saranno correlati con l'ormone antimulleriano (AMH) del paziente, l'età e le condizioni di base.
2. La perdita di follicoli con crioconservazione e scongelamento sarà simile a quella dei non affetti

individui.

Obiettivi terziari: Ricerca sull'inibizione e l'attivazione dei follicoli all'interno del tessuto

sarà intrapreso.

1. Il tessuto sarà trattato con inibitori e attivatori noti e RNA a singola cellula/nucleo

il sequenziamento sarà eseguito per valutare l'espressione genica prima e dopo il trattamento

Ipotesi: follicoli primordiali all'interno del tessuto ovarico in individui con queste condizioni

potrebbe essere inibita l'attivazione. Tali tecniche possono consentire una diminuzione del follicolo

perdita con il congelamento e lo scongelamento, nonché il possibile sviluppo futuro di nuovi trattamenti per

prevenire la perdita accelerata del follicolo negli individui e negli adolescenti affetti da queste condizioni.

Promuovere l'attivazione del follicolo prima del reimpianto del tessuto può migliorare la possibilità di ottenere una gravidanza dopo il reimpianto del tessuto

Endpoint:

Endpoint primari:

1. Tessuto per la ricerca: il sequenziamento dell'RNA di singola cellula/nucleo sarà eseguito su tessuti di

   individui affetti e rispetto ai controlli di pari età che saranno donatori di organi da cadavere su supporto cardiopolmonare. Ciò consentirà confronti di tipi cellulari specifici all'interno dell'ovaio e ricerche esplorative sui possibili meccanismi di perdita del follicolo in queste popolazioni.

2. Sequenziamento dell'RNA a singola cellula/nucleo su tessuto fresco rispetto a tessuto congelato e scongelato. Questo

valuterà quali cambiamenti di trascrizione si verificano a causa del processo di congelamento.

Endpoint secondario:

1. Valutazione della densità e della qualità dei follicoli nelle ovaie di soggetti con sindrome di Turner (con o senza materiale Y), galattosemia e adolescenti post-menarca con insufficienza ovarica prematura o con ridotta riserva ovarica (coloro che non rispondono alla stimolazione ovarica per la crioconservazione degli ovociti a causa della minore conta dei follicoli)
2. Correlazione della densità e della qualità del follicolo con marcatori come età, AMH, condizione.
3. Confronto dei livelli ormonali come AMH, FSH, LH ed Estradiolo tra pazienti e controlli.

Endpoint terziario

-Valutare i cambiamenti nel sequenziamento dell'RNA di singola cellula/nucleo nel tessuto prima e dopo il trattamento con inibitori e attivatori del follicolo primordiale. Il tessuto rimanente sarà criopreservato per futuri esperimenti.