Zmrazení gonadální tkáně pro zachování plodnosti u jedinců ohrožených ovariální dysfunkcí a předčasnou ovariální insuficiencí

Popis studie:

Kryoprezervace a hodnocení ovariální tkáně u jedinců s Turnerovým syndromem, jedinců s Turnerovým syndromem s materiálem Y, kteří podstoupili profylaktickou gonadektomii, galaktosémii, postmenarcheálních dospívajících s nedávnou předčasnou ovariální insuficiencí a dospívajících se sníženou ovariální rezervou (DOR), u kterých je kontraindikace ovariální stimulace stejně jako ty se sníženou ovariální rezervou, které nereagovaly na ovariální stimulaci, což je spojeno s akutními nebo chronickými účinky na ovariální funkci a reprodukci.

Cíle:

Primární cíle: Po počátečním vyhodnocení počtu a kvality folikulů před a po kryokonzervaci a rozmrazení bude zbývající tkáň využita k výzkumu mechanismů ztráty folikulů u Turnera a galaktosémie, stejně jako u postmenarcheálních dospívajících jedinců s nedávnou diagnózou POI

1. Provedeme jednobuněčné/jaderné sekvenování RNA na tkáni odebrané od účastníků studie a na vaječnících od kadaverózních dárců orgánů na kardiopulmonální podpoře.
2. Provedeme jednobuněčné/jaderné sekvenování RNA na čerstvé ovariální tkáni a porovnáme ji se zmrazenou a rozmraženou tkání

Hypotéza: Sekvenování jednobuněčné/jaderné RNA z tkáně získané z vaječníků u jedinců s těmito stavy se bude významně lišit od sekvenování kontrol. Tyto rozdíly mohou umožnit další vývoj hypotéz ohledně základního mechanismu ztráty folikulů a/nebo dysfunkce u jedinců s těmito stavy.

Sekundární cíl: Tento protokol je navržen tak, aby vyhodnotil proveditelnost (což znamená rozumné očekávání budoucí plodnosti na základě anatomie, histologie a fyziologie čerstvé ovariální tkáně a také účinků po zmrazení a rozmrazení) kryokonzervace ovariální tkáně (OTC) pro zachování plodnosti u dětí se zvýšeným rizikem ztráty ovariální funkce v důsledku Turnerova syndromu (s materiálem Y nebo bez něj) nebo galaktosémie a adolescentů po menarcheu s nedávným rozvojem předčasné ovariální insuficience (POI) nebo se sníženou ovariální rezervou (ti, kteří ano nereagují na ovariální stimulaci pro kryokonzervaci oocytů kvůli nižšímu počtu folikulů).

1. Proveditelnost bude hodnocena hodnocením počtu a kvality folikulů nalezených ve tkáni před zmrazením a po rozmrazení.

2. Nedostatek folikulů ve tkáni vaječníků potvrdí, že OTC není schůdnou možností

   počet obyvatel.

3. Bude proveden pokus o korelaci laboratorních a zobrazovacích markerů s přítomností a počtem folikulů.

Hypotéza: Mladí jedinci s Turnerovým syndromem a galaktosémií a adolescenti s nedávnou POI uchovávají populace folikulů, které mohou být zachovány kryokonzervací ovariální tkáně pro budoucí plodnost.

1. Bude existovat celá řada folikulárních nálezů, které budou korelovat s pacientovým antimullerovským hormonem (AMH), věkem a základním stavem.
2. Ztráta folikulů s kryokonzervací a rozmražením bude podobná jako u nepostižených

Jednotlivci.

Terciární cíle: Výzkum týkající se inhibice a aktivace folikulů ve tkáni

bude provedena.

1. Tkáň bude ošetřena známými inhibitory a aktivátory a jednobuněčnou/nukleární RNA

bude provedeno sekvenování, aby se vyhodnotila genová exprese před a po léčbě

Hypotéza: Primordiální folikuly ve tkáni vaječníků u jedinců s těmito stavy

může být zabráněno aktivaci. Takové techniky mohou umožnit snížení folikulu

ztráty při zmrazování a rozmrazování, stejně jako možný budoucí vývoj nových způsobů léčby

zabránit zrychlené ztrátě folikulů u jedinců a dospívajících postižených těmito stavy.

Podpora aktivace folikulů před reimplantací tkáně může zlepšit možnost dosažení těhotenství po reimplantaci tkáně

Koncové body:

Primární koncové body:

1. Tkáň pro výzkum: Sekvenování RNA jednotlivých buněk/jádra bude provedeno na tkáních

   postižených jedinců a ve srovnání s věkově odpovídajícími kontrolami, kteří budou dárci orgánů s kadaverózním stavem na kardiopulmonální podpoře. To umožní konkrétní srovnání buněčných typů v rámci vaječníků a explorativní výzkum týkající se možných mechanismů ztráty folikulů v těchto populacích.

2. Jednobuněčné/jaderné sekvenování RNA čerstvé ve srovnání se zmrazenou a rozmraženou tkání. Tento

posoudí, jaká transkripce se změnila v důsledku procesu zmrazení.

Sekundární koncový bod:

1. Hodnocení hustoty a kvality folikulů ve vaječnících jedinců s Turnerovým syndromem (s materiálem Y nebo bez), galaktosémií a postmenarcheálních adolescentů s předčasnou ovariální insuficiencí nebo se sníženou ovariální rezervou (ti, kteří nereagují na ovariální stimulaci pro kryokonzervaci oocytů kvůli nižšímu počtu folikulů)
2. Korelace hustoty a kvality folikulů s markery, jako je věk, AMH, stav.
3. Porovnání hladin hormonů, jako je AMH, FSH, LH a estradiol mezi pacientkami a kontrolami.

Terciární koncový bod

-Vyhodnoťte změny v sekvenování jednobuněčné/jaderné RNA ve tkáni před a po léčbě primordiálními folikulárními inhibitory a aktivátory. Zbývající tkáň bude kryokonzervována pro budoucí experimenty.