Kamienie nerkowe na bazie kwasu moczowego: charakterystyka kliniczna, metaboliczna i genetyczna

• Zgłoszenie częstości występowania kamieni nerkowych opartych na kwasie moczowym wśród pacjentów z NL przyjętych do Mansoura Urology and Nefrology center (MUNC).
• Identyfikacja monogenowych i poligenowych kamieni tworzących kwas moczowy.
• Identyfikacja czynników związanych z nawrotami kamieni moczowych oraz determinantów ich lateralizacji u pacjentów z kamieniami nerkowymi opartymi na kwasie moczowym.
• Podejście badawcze i metodologia
• Projekt badania: prospektywne badanie kontrolowane
• Populacja docelowa:

Pacjenci przyjmowani do ośrodka urologii i nefrologii Mansoura z jednostronną lub obustronną kamicą nerkową, potwierdzoną technikami obrazowymi (USG i tomografia komputerowa bez kontrastu), są kierowani w okresie od września 2021 do września 2022.

Zdrowe osoby wolne od kamieni, potwierdzone obrazowaniem, są przydzielane jako grupa kontrolna.

Czytelne osoby spełniające kryteria włączenia zostaną włączone do badania prospektywnego i poproszone o podpisanie formularza świadomej zgody zgodnie z Dobrą Praktyką Kliniczną i Deklaracją Helsińską.

• Kryteria włączenia powinny spełniać wszystkie poniższe warunki.
• Pacjenci z jednostronną lub obustronną kamicą nerkową (de novo lub nawrotową), którzy są kandydatami do leczenia endoskopowego (nefrolitotomia przezskórna).
• Pacjenci, u których przed operacją NCCT wykryto kamień nerkowy o gęstości równej lub mniejszej niż 600HU.
• Pacjenci z dominującym składem kwasu moczowego zostaną włączeni na podstawie pooperacyjnej analizy kamieni.
• Kryteria wyłączenia:
• Pacjenci z nieprawidłowościami anatomicznymi prowadzącymi do kamicy, np. zwężenie moczowodu, niedrożność połączenia moczowodowo-miedniczkowego lub moczowodowo-pęcherzowego, odprowadzenie moczu, historia ponownej implantacji moczowodowo-pęcherzowej
• Pacjenci z kamicą niezwiązaną z kwasem moczowym, potwierdzoną pooperacyjną analizą kamicy.
• Grupy badawcze
• Grupa kontrolna. Osoby zdrowe, wolne od kamieni, potwierdzone badaniami obrazowymi, zostaną przydzielone jako grupa kontrolna.
• Kółko naukowe
• Denovo kwas moczowy tworzący kamienie (DUASF)
• Nawracające kamienie tworzące kwas moczowy (RUASF)
• Narzędzia oceny
• Historia obejmuje miejsce zamieszkania, historię odżywiania, historię medyczną, np. DM i jej rodzaj oraz historię kamicy +/- poprzednia interwencja.
• Badanie obejmuje BMI, obwód talii i bioder, stosunek talii do bioder oraz raportowanie ciśnienia krwi.
• Przygotowanie przedoperacyjne obejmuje.
• Analiza moczu (paskowy i mikroskopowy)
• Całodobowa zbiórka moczu na (Ph, amon, cytrynian, moczan i białko Tamma-Horsfalla (THP))
• Próbka krwi do TLC (liczba neutrofilów i limfocytów), HgA1c, poziom kreatyniny w surowicy i kwasu moczowego
• Procedura operacyjna i wyniki badania Po całonocnym nawodnieniu 0,9% solą fizjologiczną z szybkością 1 ml/min. PCNL zostanie przeprowadzona w dostępie standardowym z obustronnym wprowadzeniem cewników moczowodowych.
• Różnicowe pobieranie próbek moczu z każdej nerki; Przed wykonaniem nakłucia nerki zostanie przeprowadzony drenaż oddzielnych jednostek nerkowych z różnicowym pobraniem moczu. Mocz zostanie zbadany pod kątem Ph, amonu, cytrynianów, moczanów i białka Tamma-Horsfalla (THP).
• Analiza kamienia zostanie przeprowadzona za pomocą spektroskopii w podczerwieni.
• Badania genetyczne Genomowy DNA zostanie wyekstrahowany z leukocytów krwi obwodowej przy użyciu standardowych metod. Pary starterów i warunki reakcji PCR, które zostaną zaprojektowane dla użytych SLC22A12 i SLC2A9 do amplifikacji sekwencji. Do wszystkich reakcji PCR użyjemy od 50 do 100 ng genomowego DNA, od 5 do 10 pmoli starterów do przodu i do tyłu. Sekwencjonowanie zostanie przeprowadzone w obu kierunkach przy użyciu analizatora DNA ABI PRISM 3700 (Applied Biosystems).
• Obróbka pooperacyjna, obejmuje kontrolę NCCT przed wypisem w celu wykluczenia pozostałości kamieni. Pacjentom z niedocelowymi przezroczystymi resztkami zostanie zaoferowana doustna terapia rozpuszczająca w postaci cytrynianu potasu do momentu uznania przez NCCT za wolne od kamienia po 3 miesiącach. Wszystkim pacjentom bez kamieni zaleca się stosowanie ogólnych środków zapobiegawczych, np. przyjmowanie dużej ilości płynów i kontrolowanie poziomu kwasu moczowego w surowicy. Pacjenci zostaną zaproszeni na roczną wizytę kontrolną w celu wykonania NCCT, podczas której zobrazowany zostanie każdy nawracający kamień, a jego cechy zostaną ocenione w standardowy sposób.
• Wielkość próby i analiza danych:

Wszyscy pacjenci z kamieniami nerkowymi poddani PNL zostaną poddani analizie kamieni. Do oceny genetycznej, molekularnej i metabolicznej; grupa kontrolna będzie składała się z 10 zdrowych ochotników bez kamieni, a grupa badawcza będzie obejmowała 20 pacjentów z kamieniami kwasu moczowego.

Dane będą gromadzone w programie IBM SPSS25 (pakiet społecznościowy dla nauk statystycznych, IBM Corporation; Armonk, Nowy Jork, USA). Średnia i odchylenie standardowe (mediana i zakres) wszystkich ciągłych pomiarów i wyników zostaną podane, jak wskazano. Liczba (%) dla zmiennych kategorycznych, jeśli takie istnieją, zostanie zarejestrowana na początku badania i podczas wszystkich kolejnych wizyt. Właściwe testy statystyczne zostaną odpowiednio wykorzystane.

• Wyniki:
• Główny wynik: zgłoszenie ogólnej częstości występowania kamieni moczowych wśród pacjentów z kamieniami nerkowymi przyjętych do Mansoura UNC w okresie badania.
• Wyniki drugorzędowe obejmują identyfikację zmian genetycznych u pacjentów z kamieniami kwasu moczowego i możliwą korelację z nawrotem kamienia w ciągu 1 roku po usunięciu kamienia. Zgłaszanie różnych cech klinicznych, metabolicznych i genetycznych wśród osób tworzących kamienie kwasu moczowego z próbą korelacji tych wyników z lateralnością kamienia.