Transplantacja niekontrolowanych nerek z DCD REGENEROWANA za pomocą nowatorskiej metody perfuzji Ex-VIVo (REVIVEME)

W dużym modelu zwierzęcym wykazaliśmy, że nerki od dawców z uDCD, poddane 4,5-godzinnemu czasowi ciepłego niedokrwienia (WIT), można bezpiecznie przywrócić do normalnej funkcji, bez stosowania zaawansowanej resuscytacji krążeniowo-oddechowej (aCPR), krążenia pozaustrojowego lub stosowania antykoagulanty podane dawcy. Co więcej, nerki z uDCD leczone według nowej metody mogą być bezpiecznie przeszczepiane świniom z prawidłową czynnością nerek (mierzoną klirensem kreatyniny i joheksolu) w trzymiesięcznej obserwacji. Badania toksyczności na świniach wykazały, że podczas przeszczepu przenoszone są minimalne ilości leków, a większość składników ulega redukcji podczas procesu ex-vivo, co wskazuje na bardzo niski poziom przekazywany biorcy. Histologia nerek była zbliżona do normy w biopsjach pobranych z nerek, które przeżyły trzy miesiące, bez oznak zwłóknienia lub stwardnienia kłębuszków nerkowych. Nasze badania są poparte danymi z innych laboratoriów. W skrócie - nasza nowa metoda oznacza, że ​​zapobiegamy I/R-I spowodowanemu przez niedrożność przepływu tętniczego, czego skutkiem jest niedotlenienie. Zwykle podczas reperfuzji obfitość fibryny spowoduje tworzenie się skrzepów, gdy pojawią się aktywowane płytki krwi i czerwone krwinki (RBC). W rezultacie nerki będą tolerować znacznie dłuższy WIT, niż gdyby naczynia włosowate były zamknięte w wyniku niedotlenienia. W oparciu o nasze dane dotyczące dużych zwierząt mamy mocne powody, by sądzić, że proponowana nowa metoda znacząco zmniejszy częstość opóźnionej funkcji przeszczepu (DGF), poprawi jakość przeszczepów nerkowych i zwiększy pulę dawców do udanych przeszczepów nerki.

Niniejszy protokół badania opisuje pierwsze badanie na ludziach, w którym nerki uDCD są odnawiane i konserwowane przy użyciu tej nowej metody perfuzji, a następnie przeszczepiane pacjentom z listy oczekujących na chorych dawców. Celem niniejszego klinicznego badania potwierdzającego koncepcję (PoC) jest wykazanie, że nowa metoda konserwacji oddanych nerek z przedłużonym czasem ciepłego niedokrwienia, opracowana u świń, może być bezpiecznie przeniesiona do przeszczepów nerek uDCD u ludzi.

Czas wstrzyknięcia Roztworu A jest zdefiniowany jako początek fazy regeneracji. Roztwór A wstrzykuje się do tętnic nerkowych eksplantowanych nerek po zamknięciu żył nerkowych klamrą naczyniową. Po wstrzyknięciu Roztworu A na tętnice zakłada się zacisk. Po 30 do 210 minutach podaje się drugą dawkę Roztworu A, a następnie Roztwór B 15 minut później wstrzykuje się do tętnic nerkowych. W ciągu kolejnych 15-30 minut zakładane są adaptery naczyniowe do łat aorty/tętnic oraz sutki do moczowodów. Nerki są przenoszone do komory narządowej w wyprodukowanym w szpitalu medycznym wyrobie technicznym (MTP) i podłączane do obwodu perfuzyjnego. Perfuzję tlenową rozpoczyna się w temperaturze 24°C pod ciśnieniem 30 mmHg. Ciśnienie jest stopniowo zwiększane o 5 mmHg co minutę do maksymalnie 80 mmHg, aby umożliwić oczyszczenie naczyń włosowatych ze skrzepów fibrynowych, po czym temperatura zostaje obniżona do 15°C, a ciśnienie do 20 mmHg. Po trzech godzinach dodaje się przemyte krwinki czerwone (z niską liczbą płytek krwi), temperaturę podnosi się do 25 mmHg i temperaturę do 28-32°C. Perfuzja natleniona jest kontynuowana, a perfuzat przechodzi przez adsorbery. Opór naczyniowy i przepływ są monitorowane podczas całego procesu perfuzji urządzenia medycznego. Po ostatecznej ocenie nerek przez użytkownika, temperaturę obniża się do 15°C, a ciśnienie do 20 mmHg, przy czym perfuzja jest kontynuowana do momentu odłączenia nerki i wyjęcia jej z komory narządowej oraz oceny zdolności do przeszczepu przez użytkownika przed jej przeszczepiony.