Transplantace ledvin s nekontrolovaným DCD rekondicionováním pomocí nové perfuzní metody Ex-VIVo (REVIVEME)

Na velkém zvířecím modelu jsme ukázali, že ledviny od dárců uDCD, které byly vystaveny 4½ hodiny teplé ischemické doby (WIT), lze bezpečně obnovit na normální funkci bez použití pokročilé kardiopulmonální resuscitace (aCPR), mimotělního oběhu nebo použití antikoagulancia podávaná dárci. Kromě toho mohou být ledviny z uDCD ošetřené podle nové metody bezpečně transplantovány prasatům s normální funkcí ledvin (měřeno pomocí kreatininu a clearance iohexolu) po tříměsíčním sledování. Studie toxicity na prasatech dospěly k závěru, že při transplantaci jsou přenášena minimální množství léků, většina složek je redukována během procesu ex vivo, což ukazuje, že hladiny přenesené na příjemce jsou velmi nízké. Renální histologie byla blízká normálu v biopsiích odebraných z ledvin přežívajících tři měsíce, bez známek fibrózy nebo glomerulosklerózy. Náš výzkum je podpořen daty z jiných laboratoří. Stručně řečeno - naše nová metoda znamená, že zabráníme I/R-I způsobenému obstrukcí arteriálního průtoku s následkem hypoxie. Normálně, při reperfuzi, bude mít nadbytek fibrinu za následek tvorbu sraženiny, když dorazí aktivované krevní destičky a červené krvinky (RBC). V důsledku toho budou ledviny tolerovat podstatně delší WIT, než kdyby byly kapiláry v důsledku hypoxie uzavřeny. Na základě našich údajů o velkých zvířatech máme silné důvody se domnívat, že navrhovaná nová metoda významně sníží frekvenci opožděné funkce štěpu (DGF), zvýší kvalitu renálních štěpů a zvýší počet dárců pro úspěšné transplantace ledvin.

Předkládaný protokol studie popisuje první studii u člověka, ve které jsou ledviny uDCD regenerovány a konzervovány pomocí této nové perfuzní metody a poté transplantovány pacientům na čekací listině pro nemocné dárce. Účelem této klinické studie proof-of-concept (PoC) je ukázat, že nová metoda pro uchování darovaných ledvin s prodlouženou dobou tepelné ischemie, vyvinutá u prasat, může být bezpečně převedena na transplantace uDCD-ledvin u lidí.

Doba nástřiku roztoku A je definována jako začátek fáze rekondice. Roztok A se injikuje do renálních tepen explantovaných ledvin po uzavření renálních žil cévní svorkou. Po injekci roztoku A se na tepny umístí svorka. Po 30 až 210 minutách se podá druhá dávka roztoku A a po 15 minutách se podá roztok B do renálních tepen. Během následujících 15-30 minut se namontují cévní adaptéry pro aortální náplasti/arterie a bradavky pro uretery. Ledviny jsou přesunuty do orgánové komory v nemocničním lékařském technickém produktu (MTP) a připojeny k perfuznímu okruhu. Okysličená perfuze je zahájena při 24 °C při tlaku 30 mmHg. Tlak se postupně zvyšuje o 5 mmHg každou minutu až na maximum 80 mmHg, aby se kapiláry vyčistily od fibrinových sraženin, poté se teplota sníží na 15 °C a tlak na 20 mmHg. Po třech hodinách se přidají promyté červené krvinky (s nízkým počtem krevních destiček), teplota se zvýší na 25 mmHg a teplota na 28-32 °C. Okysličená perfuze pokračuje, přičemž perfuzát prochází adsorbéry. Cévní odpor a průtok jsou monitorovány během celého procesu perfuze zdravotnického prostředku. Po konečném vyhodnocení a posouzení ledvin uživatelem se teplota sníží na 15 °C a tlak na 20 mmHg, přičemž perfuze pokračuje, dokud není ledvina odpojena a vyjmuta z orgánové komory, a před jejím použitím je uživatelem posouzena životaschopnost pro transplantaci. transplantované.