Diagnostyka molekularna alergicznego kontaktowego zapalenia skóry (MODAL)

Alergiczne kontaktowe zapalenie skóry (ACD) to powszechna choroba zapalna skóry, dotykająca około 15–20% ogólnej populacji w krajach uprzemysłowionych i zajmująca pierwsze miejsce wśród chorób zawodowych w wielu krajach europejskich.

ACD zwykle objawia się ciężkim zapaleniem skóry z zaczerwienieniem, obrzękiem, sączeniem i strupami. Charakteryzuje się opóźnioną reakcją nadwrażliwości typu IV, w której pośredniczą limfocyty T specyficzne dla alergenu u uczulonych osób.

Obecna diagnoza opiera się na badaniach klinicznych poprzez diagnostyczne testy płatkowe z podejrzanymi alergizującymi substancjami chemicznymi. Metoda testów płatkowych ma na celu odtworzenie zmian wypryskowych poprzez nałożenie na zdrową skórę pacjenta plastrów okluzyjnych zawierających podejrzane alergeny. Jest to proces czasochłonny i kosztowny. Odczytanie reakcji wymaga doświadczonego personelu medycznego i jest przeprowadzane jedynie przez ograniczoną liczbę doświadczonych dermatologów-alergologów w całej Europie (co ogranicza dostępność diagnostyki u pacjentów z podejrzeniem ACD). Wreszcie, jeśli solidność metody testu płatkowego jest bezdyskusyjna, nie można pominąć faktu, że wyniki testu płatkowego są czasami fałszywie dodatnie lub nieistotne, co prowadzi do niewłaściwego leczenia choroby.

Dlatego obecnie istnieje pilna potrzeba udostępnienia nowych narzędzi ex vivo/in vitro, opartych na współczesnym rozumieniu mechanizmów immunologicznych ACD, aby ulepszyć obecną procedurę diagnostyczną i otworzyć nowe możliwości spersonalizowanej diagnostyki skórnego ACD.

W tym kontekście zespół „Epidermal Immunity and Allergy” (CIRI, Inserm U1111) scharakteryzował niedawno sygnatury molekularne ACD (przy użyciu mikromacierzy) w oparciu o pozytywne reakcje w testach płatkowych w odniesieniu do alergenów chemicznych lub niealergicznych substancji drażniących. Wykazano, że istnieją unikalne profile molekularne i szlaki sygnalizacyjne charakteryzujące każde zapalenie. Następnie opracowano metody uczenia maszynowego w celu identyfikacji i walidacji algorytmów klasyfikacji w oparciu o poziomy ekspresji minimalnego zestawu biomarkerów (n=12), umożliwiając bardzo dobre rozróżnienie pomiędzy zapaleniem wywołanym alergenem a zapaleniem wywołanym testem płatkowym (co zostało potwierdzone przez uzupełniające ilościowe analizy RT-PCR). Wreszcie, niektórzy pacjenci ze słabo dodatnimi reakcjami w testach płatkowych na alergeny nie wykazują żadnych śladów molekularnej sygnatury alergii lub mają niskie wartości, co kwestionuje wiarygodność/istotność ich wyników testów płatkowych.

Dlatego nasze wyniki podkreślają wartość profilowania molekularnego reakcji w testach płatkowych w celu poprawy/wzmocnienia klinicznej diagnozy ACD i pomocy dermatologowi w rozróżnieniu prawdziwych i fałszywie dodatnich reakcji w testach płatkowych.

Co ważne, wyniki te otwierają także nowe możliwości rozwoju przyszłej diagnostyki punktowej. Rzeczywiście, obecnie szacuje się, że tylko 20% pacjentów kierowanych na badania alergologiczne cierpi na prawdziwą alergię skórną (tj. pacjentów z dodatnimi wynikami testów płatkowych, w połączeniu z odpowiednią historią kliniczną i potwierdzającymi testami użytkowymi). Większość pacjentów (80%) faktycznie cierpi na podrażnienia skóry. Dlatego wykrycie biomarkerów ACD w aktywnych zmianach wypryskowych może dostarczyć dermatologowi ważnych informacji umożliwiających poprawę i przyspieszenie diagnozy klinicznej. Może to również zapobiec kierowaniu wielu pacjentów (ujemnych pod kątem biomarkerów ACD) na niepotrzebne badania alergologiczne.

Jednakże do chwili obecnej pozostaje wykazać, że (i) ten sam panel biomarkerów ACD ulega ekspresji zarówno w ostrych zmianach wypryskowych, jak i w dodatnich reakcjach w testach płatkowych oraz że (ii) wykrycie tych biomarkerów pozwala na czułą i wiarygodną metodę diagnostyka alergii skórnej.

Głównym celem badania będzie potwierdzenie słuszności koncepcji korelacji ekspresji biomarkerów alergii u pacjentów cierpiących na prawdziwe ACD (tj. pacjenci z wysoką ekspresją biomarkerów w ostrych zmianach, dodatnie testy płatkowe i odpowiednia historia kliniczna) w porównaniu z pacjentami, u których występuje podrażnienie skóry (brak/niska ekspresja biomarkerów w ostrych zmianach, negatywne testy płatkowe i brak historii klinicznej).