Wpływ Ovamax na jakość oocytów

Randomizacja

Badanie to jest ślepą, randomizowaną próbą kontrolną mającą na celu ocenę związku pomiędzy spożyciem Ova-Max a jakością oocytów uzyskanych po stymulacji jajników. Randomizacja zostanie przeprowadzona co najmniej trzy miesiące przed rozpoczęciem leczenia, a pacjenci zostaną przydzieleni do grupy otrzymującej Ova-max lub placebo na podstawie wygenerowanej komputerowo listy randomizacyjnej.

Stymulacja jajników

U wszystkich pacjentek będzie stosowany standardowy protokół stymulacji jajników, obejmujący dawkę 200–300 jm rekombinowanego antagonisty FSH i GnRH, począwszy od 5 dnia stymulacji.

Indukcję końcowego dojrzewania oocytów przeprowadza się za pomocą rekombinowanego agonisty hCG lub GnRH. Kobietom, u których planowany jest transfer świeżego zarodka, od dnia pobrania oocytu będzie podany podskórnie progesteron w celu podtrzymania fazy lutealnej.

Ocena jakości oocytów

Po pobraniu oocytów usuwa się komórki wzgórka kompleksu Cumulus Oocyte (COC) i ocenia się jakość wszystkich dojrzałych oocytów w metafazie II (MII) według następujących parametrów:

1. Kształt oocytu
2. Rozmiar oocytu
3. Charakterystyka ooplazmy
4. Struktura przestrzeni okołowitelinowej (PVS)
5. Zona pellucida (ZP) i
6. Morfologia ciała polarnego (PB).

Każdy parametr jest oceniany jako najgorszy (-1), średni (0) lub najlepszy (1), a całkowity wynik oocytów (TOS) jest obliczany poprzez sumowanie ocen poszczególnych parametrów.

Zatem maksymalny TOS oocytu może wynosić +6, najniższy -6.

Szczegółowo ocenia się 6 poszczególnych parametrów w następujący sposób:

1. Kształt oocytu (-1): słaba morfologia oocytu (ciemne ogólne zabarwienie oocytu i/lub jajowaty kształt) (0): prawie normalny (mniej ciemne ogólne zabarwienie oocytu i mniej jajowaty kształt) (+1): normalny
2. Rozmiar oocytu (-1): nienormalnie mały lub duży oocyt (0): prawie normalny rozmiar (+1): rozmiar oocytu mieścił się w normalnym zakresie
3. Charakterystyka ooplazmy (-1): bardzo ziarnista i/lub bardzo wakuolizowana cytoplazma i/lub wykazuje kilka wtrąceń (0): lekko ziarnista i/lub wykazuje tylko kilka wtrąceń (+1): brak ziarnistości i wtrąceń
4. Struktura przestrzeni okołowitelnowej (PVS) (-1): nienormalnie duży PVS, brak PVS lub bardzo ziarnisty PVS (0): umiarkowanie powiększony PVS i/lub mały PVS i/lub mniej ziarnisty PVS (+1): normalny rozmiar PVS bez granulatu
5. Strefa przezroczysta (ZP) (-1): bardzo cienka lub gruba ZP (0): małe odchylenie od normy (+1): strefa normalna
6. Morfologia PB (+1): płaska i/lub wielokrotna PB, ziarnista i/lub nienormalnie mała lub duża PB (0): przeciętna, ale niezbyt doskonała PB (+1): normalna wielkość i kształt PB

Po ocenie TOS wszystkich oocytów MII, średni wynik Oocytów (MOS) pacjentki oblicza się poprzez podzielenie sumy wszystkich TOS pacjentki przez liczbę jej oocytów.

Analiza statystyczna

Próbki grupowe o wielkości 79 i 79 osiągają 80% mocy do wykrycia różnicy -1,0 pomiędzy hipotezą zerową, że średnie TOS w obu grupach wynoszą -1,1, a hipotezą alternatywną, że średnia TOS grupy Ova-Max wynosi -0,1, przy znanych grupowe odchylenia standardowe wynoszące 2,2 i 2,2 oraz poziom istotności (alfa) 0,05000 przy użyciu dwustronnego testu Manna-Whitneya przy założeniu, że rzeczywisty rozkład jest jednorodny