Vliv Ovamaxu na kvalitu oocytů

Randomizace

Tato studie je slepá randomizovaná kontrolní studie k vyhodnocení vztahu mezi příjmem Ova-Max a kvalitou oocytů získaných po stimulaci vaječníků. Randomizace bude provedena nejméně tři měsíce před zahájením léčby a pacienti budou přiřazeni buď k Ova-max nebo placebu pomocí počítačem vytvořeného randomizačního seznamu.

Ovariální stimulace

U všech pacientek bude následovat standardní protokol ovariální stimulace s 200-300 IU rekombinantního FSH a antagonisty GnRH počínaje 5. dnem stimulace.

Indukce konečného zrání oocytů bude provedena rekombinantním hCG nebo GnRH agonistou. Ženám, u kterých je plánován přenos čerstvého embrya, bude počínaje dnem odběru oocytů podán subkutánně progesteron na podporu luteální fáze.

Hodnocení kvality oocytů

Po odebrání oocytů jsou odstraněny kumulové buňky komplexu Cumulus Oocyte (COC) a kvalita všech zralých oocytů metafáze II (MII) se hodnotí podle následujících parametrů:

1. Tvar oocytů
2. Velikost oocytů
3. Charakteristika ooplazmy
4. Struktura perivitelinárního prostoru (PVS)
5. Zona pellucida (ZP) a
6. Morfologie polárního tělesa (PB).

Každý parametr je hodnocen jako nejhorší (-1), průměrný (0) nebo nejlepší (1) a celkové skóre oocytů (TOS) je vypočítáno sečtením hodnocení jednotlivých parametrů.

Maximální TOS oocytu by tedy mohla být +6, nejnižší -6.

6 jednotlivých parametrů se podrobně hodnotí takto:

1. Tvar oocytů (-1): špatná morfologie oocytů (tmavé obecné zbarvení oocytů a/nebo vejčitý tvar) (0): téměř normální (méně tmavé celkové zbarvení oocytů a méně vejčitý tvar) (+1): normální
2. Velikost oocytu (-1): abnormálně malý nebo velký oocyt (0): téměř normální velikost (+1): velikost oocytu byla v normálním rozmezí
3. Charakteristiky ooplazmy (-1): velmi zrnitá a/nebo velmi vakuolizovaná cytoplazma a/nebo vykazovala několik inkluzí (0): mírně zrnité a/nebo vykazovala pouze několik inkluzí (+1): absence granularity a inkluzí
4. Struktura perivitelinního prostoru (PVS) (-1): abnormálně velká PVS, nepřítomnost PVS nebo velmi granulární PVS (0): středně zvětšená PVS a/nebo malá PVS a/nebo méně granulární PVS (+1): normální velikost PVS bez granulí
5. Zona pellucida (ZP) (-1): velmi tenká nebo silná ZP (0): malá odchylka od normálu (+1): normální zóna
6. Morfologie PB (+1): ploché a/nebo vícenásobné PB, zrnité a/nebo buď abnormálně malé nebo velké PB (0): spravedlivé, ale ne vynikající PB (+1): normální velikost a tvar PB

Po vyhodnocení TOS všech MII oocytů se vypočítá průměrné skóre oocytů (MOS) pacientky vydělením součtu všech TOS pacientky počtem jejích oocytů.

Statistická analýza

Velikosti skupinového vzorku 79 a 79 dosahují 80% síly k detekci rozdílu -1,0 mezi nulovou hypotézou, že průměry TOS obou skupin jsou -1,1, a alternativní hypotézou, že průměrný TOS skupiny Ova-Max je -0,1, se známou skupinové směrodatné odchylky 2,2 a 2,2 a s hladinou významnosti (alfa) 0,05000 za použití oboustranného Mann-Whitneyho testu za předpokladu, že skutečné rozdělení je jednotné