Czy stężenie CAPGDF15 w osoczu wzrasta w czasie ciąży? (CAP)

Tło i cel Podczas ciąży poziom hormonu GDF15 wzrasta 100–200 razy wyżej niż przed ciążą (Andersson-Hall, Joelsson i in., 2021; Andersson-Hall, Svedin i in., 2021). Znaczenie tego dramatycznego wzrostu nie jest wyjaśnione, ale wykazano, że kobiety w ciąży z niewystarczającym wzrostem GDF15 są obarczone większym ryzykiem samoistnej aborcji (Lyu i in., 2023). CAPGDF15 to mały peptyd składający się z 12 aminokwasów, niedawno znaleziony w osoczu zarówno myszy, jak i ludzi, i peptyd ten wchodzi w skład prohormonu, z którego syntetyzowany jest GDF15. Dlatego zakłada się, że CAPGDF15 jest wydzielany jednocześnie z GDF15. Znaczenie CAPGDF15 w organizmie jest całkowicie nieznane, z wyjątkiem tego, że wstrzyknięcie myszom zmniejsza spożycie pokarmu (Wiggenhorn i in., BioRxiv). Dlatego jesteśmy zainteresowani zbadaniem, czy istnieje podobny dramatyczny wzrost poziomu CAPGDF15, jak w przypadku samego GDF15. Nie będziemy przeprowadzać badania na dużą skalę bez wcześniejszej wiedzy, czy rzeczywiście tak jest. Dlatego przeprowadzimy badanie pilotażowe na 3 kobietach w ciąży i 3 kobietach kontrolnych, aby sprawdzić, czy istnieją podstawy do przeprowadzenia rzeczywistego eksperymentu naukowego. Ponieważ sam wzrost GDF15 jest znaczący, badanie pilotażowe z udziałem tylko 3 kobiet w ciąży i 3 kobiet niebędących w ciąży wystarczy, aby uzyskać wrażenie, czy występuje również znaczny wzrost CAPGDF15. Dane posłużą do oceny, czy warto podjąć konkretny projekt badawczy.

Zamiar:

Celem przeprowadzenia tego badania pilotażowego jest sprawdzenie, czy podczas ciąży występuje zwiększenie poziomu CAPGDF15 podobne do poziomu hormonu GDF15. Przeprowadzając badanie pilotażowe na 3 kobietach w ciąży i 3 kobietach z grupy kontrolnej, przed rozpoczęciem rzeczywistego eksperymentu naukowego sprawdzimy, czy rzeczywiście tak jest.

Eksperymentalny protokół

Do eksperymentu zostanie włączonych łącznie 6 zdrowych i sprawnych kobiet, 3 w ciąży i 3 niebędące w ciąży płodne, dobranych pod względem wieku i masy ciała.

Rekrutacja uczestników Pacjenci i dopasowani uczestnicy badania będą rekrutowani za pośrednictwem ulotek (załącznik) rozwieszonych na Uniwersytecie w Kopenhadze.

Kryteria przyjęcia

Zdrowe i sprawne kobiety w ciąży w III trymestrze. Zdrowe osoby z grupy kontrolnej zostaną dobrane na podstawie wieku i masy ciała i nie mogą przyjmować leków.

Kryteria wyłączenia

Trwająca choroba i/lub przyjmowanie leków. Procedura rekrutacji i ustne informacje dla uczestnika

Pierwszy kontakt z potencjalnym uczestnikiem zostanie wykorzystany w celu odpowiedzi na pytania dotyczące badania. Następnie przez telefon zostanie przeprowadzona wstępna selekcja, podczas której zostaną ocenione kryteria włączenia i wykluczenia. Osoby, które nie spełniają kryteriów włączenia i wykluczenia lub które nie chcą uczestniczyć po wstępnej selekcji wstępnej, nie będą doświadczać dalszych niedogodności. Kwalifikującym się uczestnikom zostaną następnie przesłane następujące informacje:

Pisemne informacje dla uczestników na temat eksperymentu Formularz zgody (S4) Folder komisji etycznej „Prawa uczestników projektu badawczego z zakresu nauk o zdrowiu” styczeń 2023 r. Informacje dotyczące przetwarzania/obchodzenia się z danymi osobowymi i materiałem biologicznym/Formularz zgody na biobank na przyszłe badania Zainteresowane osoby zostaną zachęceni do uważnego przeczytania informacji, a jeśli nadal będą zainteresowani, zostaną zaproszeni na spotkanie informacyjne i poinformowani o prawie do przyprowadzenia osoby wspierającej. Spotkania informacyjne odbywać się będą w siedzibie NEXS ALK i prowadzone przez kierownika projektu. Tutaj potencjalni uczestnicy otrzymają ustne informacje na temat eksperymentu, podczas których wyjaśniony zostanie protokół eksperymentu, procedury i przetwarzanie danych, a wszystkie pytania będzie można zadać na osobności. Zostaną także poinformowani, że ich udział jest dobrowolny i że przysługuje im prawo do wycofania zgody w dowolnym momencie bez podania przyczyny i konsekwencji. Zostaną poinformowani, że mają prawo do 24-godzinnego okresu do namysłu. Jeśli jednak po otrzymaniu wszystkich informacji jest pewien, że chce wziąć udział, a kierownik badania uważa, że ​​wszystko zostało zrozumiane, może także wyrazić zgodę bezpośrednio po uzyskaniu informacji, podpisując formularz zgody. Po podpisaniu przez obie strony formularza zgody, uczestnik otrzyma kopię. Do czasu podpisania formularza zgody nie będą podejmowane żadne czynności związane z badaniem. Po uwzględnieniu trzech kobiet w ciąży, zgodnie z tą samą procedurą, jak opisano powyżej, zrekrutowane zostaną trzy pasujące osoby.

Dzień eksperymentu Podczas pierwszej i jedynej wizyty w miejscu eksperymentu Odnotowuje się stan ciąży, tydzień ciąży i wiek uczestniczki. Masa ciała Rutynowo pobiera się próbkę krwi żylnej z jednej żyły ramienia.

Maksymalnie 1 godzina

Parametry wyniku i metoda W tym eksperymencie nie ma żadnej interwencji. Rutynowo zostanie pobrana próbka krwi o objętości 3 ml od 3 kobiet w ciąży i 3 dobranych nieciężarnych kobiet z grupy kontrolnej.

Biobank Badań Łącznie zostanie pobrane 3 ml krwi na osobę. Materiał będzie przechowywany w biobanku badawczym. Przechowywanie w biobanku badawczym jest konieczne, aby móc pod koniec serii eksperymentów przeprowadzić analizę krwi od różnych osób jednocześnie. W związku z tym przewiduje się, że materiał biologiczny będzie przechowywany przez okres do 1 roku od zakończenia części doświadczalnej badań (rok: 2026).

Biobank

Jeżeli uczestnik wyrazi odrębną zgodę, materiał zostanie przekazany do biobanku. Uczestnik otrzyma niezależną informację o zawartości biobanku, jego lokalizacji oraz o tym, jak i kiedy materiał z biobanku może zostać wykorzystany zgodnie z obowiązującymi przepisami. Materiał z biobanku jest przechowywany w zamrażarkach w firmie NEXS w temperaturze -70°C przez maksymalnie 15 lat. Materiał zostanie wykorzystany wyłącznie w projektach badawczych zatwierdzonych przez komisję etyki, chyba że w ciągu 15 lat zostanie nieodwracalnie zanonimizowany, co oznacza, że ​​nikt, łącznie z badaczem, nie będzie w stanie odtworzyć tożsamości uczestnika wyłącznie na podstawie próbek znajdujących się na etykiecie fiolki lub za pomocą „narzędzi”/dzienników identyfikacyjnych, które mogą ponownie połączyć się z daną osobą. Oddanie przez uczestnika materiału biologicznego do biobanku jest całkowicie dobrowolne, a jeżeli nie wyrazi takiej woli, nie ma to wpływu na jego udział w badaniu. Biobank badawczy i biobank są zarejestrowane w obowiązkowych rejestrach ALK prowadzonych przez Agencję Ochrony Danych. Wnioskodawca jest świadomy, że pobieranie materiału biologicznego do biobanku nie jest objęte Ustawą o Komitecie, lecz RODO/Ustawą o ochronie danych. Uznaje się jednak za istotne dla ogólnego opisu prac utworzenie biobanku i dlatego jest ono ujęte w protokole.

Rozważania statystyczne:

Nie przeprowadzono formalnych obliczeń mocy, ale ponieważ sam wzrost GDF15 jest znaczący, oczekuje się, że 3 kobiety w ciąży i 3 kobiety niebędące w ciąży wystarczą, aby uzyskać wrażenie, czy występuje również znaczny wzrost CAPGDF15.

Względy etyczne:

Projekt ma przede wszystkim podstawową perspektywę badawczą. W związku z tym uczestnicy biorący udział w projekcie nie odniosą żadnych korzyści. Oczekiwany podstawowy wkład naukowy naszym zdaniem przewyższy dyskomfort odczuwany przez uczestników. Od wszystkich uczestników uzyskana zostanie świadoma zgoda zgodnie z wytycznymi komisji etyki. Eksperyment, polegający na pobraniu pojedynczej próbki krwi, nie będzie wiązał się ze znaczącym zagrożeniem dla zdrowia uczestników. Jeżeli w okresie próbnym pojawią się istotne informacje na temat stanu zdrowia uczestnika, uczestnik zostanie o tym poinformowany, pod warunkiem wyrażenia zgody podczas sesji informacyjnej. Uczestnik może w każdej chwili uzyskać informację o danych – a po zakończeniu badania informację o wyniku. Badanie zostało zatwierdzone przez Komisję Etyki Regionu H pod numerem dziennika: Hxxxxxxxx.

Skutki uboczne, ryzyko i wady:

Proste pomiary ciała, takie jak masa i wzrost, wykonujemy za pomocą odpowiedniej aparatury pomiarowej. Nie oczekuje się, że pomiary te będą wiązać się z jakimkolwiek ryzykiem lub dyskomfortem. Próbki krwi zostaną pobrane przez odpowiedzialnego lekarza. W miejscu wstrzyknięcia może wystąpić łagodny ból. Dodatkowo istnieje niewielkie ryzyko wystąpienia obrzęku i tkliwości oraz powstania niewielkiego siniaka w miejscu wstrzyknięcia, który zniknie po kilku dniach.

Zgłaszanie poważnych działań niepożądanych:

Jeżeli odpowiedzialny badacz dowie się, że uczestnikowi przydarzyło się podczas interwencji poważne, nieoczekiwane zdarzenie, powiadomi o tym komisję nie później niż 7 dni po dowiedzeniu się o tym. Odpowiedzialny badacz będzie składał roczny raport podczas całego okresu próbnego, wymieniając wszystkie poważne, oczekiwane i nieoczekiwane działania niepożądane oraz wszystkie poważne zdarzenia, które miały miejsce w tym okresie. Do raportu dołączona będzie ocena bezpieczeństwa uczestników. Do raportowania wykorzystywane będą formularze przygotowane przez system komitetowy.

Przetwarzanie danych i ochrona tożsamości Uczestników 1.1. Przetwarzanie danych i ochrona tożsamości uczestników Wszystkie informacje są traktowane poufnie, a dane osobowe są przechowywane zgodnie z obowiązującymi przepisami, rozporządzeniem o ochronie danych/RODO. Przez cały czas trwania badania tożsamość uczestników będzie kodowana za pomocą numeru uczestnika. Uczestnicy są informowani o tym, kto ma dostęp do ich danych osobowych, w tym o organach regulacyjnych nadzorujących projekty badawcze w dziedzinie nauk o zdrowiu, kto może mieć do nich dostęp oraz że dane zebrane przed wycofaniem się z badania mogą zostać wykorzystane przez badacza w ogólnej analizie danych . Publikacja lub rozpowszechnianie wyników badania nastąpi w formie uniemożliwiającej identyfikację poszczególnych uczestników. Metoda analizy CAPGDF15 jest wysoce wyspecjalizowana i może być przeprowadzona jedynie na Uniwersytecie Stanforda w USA, z którym już współpracujemy. Analizę przeprowadza się na spektrometrze mas. Sam GDF15 mierzy się za pomocą analizy ELISA w laboratorium odpowiedzialnego badacza. Próbki krwi przesyłane są pseudonimowo, a badacze z Uniwersytetu Stanforda nigdy nie otrzymają informacji, które mogłyby pomóc w identyfikacji uczestników. Przeniesienie do USA zostanie zrealizowane zgodnie z rozdziałem V Ogólnego Rozporządzenia o Ochronie Danych. Badanie jest zarejestrowane w obowiązkowych rejestrach przetwarzania danych ALK. Na żądanie rejestry należy przedłożyć Agencji Ochrony Danych. Badanie zostało zgłoszone i zatwierdzone przez Uniwersytet w Kopenhadze, tym samym badanie jest wpisane na obowiązkowe wykazy podmiotów przetwarzających dane ALK. Na żądanie wykazy należy przedłożyć Agencji Ochrony Danych.

Sprawy finansowe Inicjatorem projektu jest profesor Erik Richter, a analizy i pozostałe koszty operacyjne finansuje Fundacja Novo Nordisk. Uczestnicy nie otrzymują opłat ani innego wynagrodzenia.

Publikacje W ramach projektu przewiduje się co najmniej 1 publikację naukową. Publikowane będą zarówno dane pozytywne, negatywne, jak i niejednoznaczne. Badanie jest zarejestrowane na stronie Clinictrials.gov pod numerem ewidencyjnym: Nxxxxxxxxxxxx. Cały materiał biologiczny w Biobanku jest przechowywany zgodnie z obowiązującymi przepisami RODO oraz „Ustawą o ochronie danych”. Biobank jest zatwierdzony i zarejestrowany centralnie na Uniwersytecie w Kopenhadze, gdzie prowadzone są obowiązkowe wykazy wszystkich podmiotów przetwarzających dane i podmiotów przetwarzających dane osobowe.

Ubezpieczenie Uczestnicy objęci są ustawą o ubezpieczeniu od następstw wypadków przy pracy LBK nr. 977 z dnia 09.09.2019 zgodnie z aktualnymi warunkami ubezpieczenia na Uniwersytecie w Kopenhadze. Uczestnicy będą objęci „Ustawą o skargach i odszkodowaniach w ramach systemu opieki zdrowotnej” (por. Ustawa nr. 995 z 14.06.2018 www.retsinformation.dk) przez cały proces.

Dostępność informacji dla uczestników Uczestnicy przez cały czas będą mieli możliwość uzyskania dodatkowych informacji na temat badania, kontaktując się z odpowiedzialnym kierownikiem projektu.

Bibliografia:

Andersson-Hall, U., Joelsson, L., Svedin, P., Mallard, C. i Holmäng, A. (2021). Poziomy czynnika różnicowania wzrostu 15 w otyłych i zdrowych ciążach: związek z insulinoopornością i funkcją wydzielania insuliny. Endokrynologia kliniczna, 95(1), 92-100. https://doi.org/10.1111/CEN.14433 Andersson-Hall, U., Svedin, P., Mallard, C., Blennow, K., Zetterberg, H. i Holmäng, A. (2021). Czynnik różnicowania wzrostu 15 wzrasta zarówno w płynie mózgowo-rdzeniowym, jak i w surowicy podczas ciąży. PloS One, 16(5), e0248980. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0248980 Lyu, C., Ni, T., Guo, Y., Zhou, T., Chen, Z.-J., Yan, J. i Li, Y. (2023). Niewystarczająca ekspresja GDF15 predysponuje kobiety do niewyjaśnionej, nawracającej utraty ciąży poprzez upośledzenie inwazji pozakosmkowych trofoblastów. https://doi.org/10.1111/cpr.13514 Wiggenhorn, A. L., Abuzaid, H. Z., Coassolo, L., Li, V. L., Tanzo, J. T., Wei, W., Lyu, X., Svensson, K. J., Long, J. Z. i Tsai, W. (nd). Klasa wydzielanych peptydów ssaczych o potencjale rozszerzania komunikacji komórka-komórka. https://doi.org/10.1101/2023.06.02.543503