Är plasmakoncentrationen av CAPGDF15 ökad under graviditeten? (CAP)

Bakgrund och syfte Under graviditeten stiger hormonet GDF15 mellan 100-200 gånger högre än före graviditeten (Andersson-Hall, Joelsson, et al., 2021; Andersson-Hall, Svedin, et al., 2021). Betydelsen av denna dramatiska ökning är inte klarlagd, men det har visat sig att gravida kvinnor med otillräcklig ökning av GDF15 har en högre risk för spontan abort (Lyu et al., 2023). CAPGDF15 är en liten peptid bestående av 12 aminosyror som nyligen hittats i plasma hos både möss och människor, och denna peptid är en del av prohormonet från vilket GDF15 syntetiseras. Därför är antagandet att CAPGDF15 utsöndras samtidigt med GDF15. Betydelsen av CAPGDF15 i organismen är helt okänd, förutom att injektion i möss minskar födointaget (Wiggenhorn et al., BioRxiv). Därför är vi intresserade av att undersöka om det finns en liknande dramatisk uppreglering av CAPGDF15 som med själva GDF15. Vi kommer inte att sätta upp en storskalig studie utan att ha viss förkunskap om huruvida så verkligen är fallet. Därför kommer vi att genomföra en pilotstudie på 3 gravida kvinnor och 3 kontrollkvinnor för att undersöka om det finns någon anledning att gå vidare med ett egentligt vetenskapligt experiment. Eftersom ökningen av GDF15 i sig är signifikant kommer en pilotstudie som endast involverar 3 gravida kvinnor och 3 icke-gravida kvinnor att räcka för att få en bild av om det också finns en signifikant ökning av CAPGDF15. Uppgifterna kommer att användas för att bedöma om ett egentligt forskningsprojekt är värt att etablera.

Syfte:

Syftet med att genomföra denna pilotstudie är att undersöka om det finns en uppreglering av CAPGDF15 liknande den för hormonet GDF15 under graviditet. Genom att genomföra en pilotstudie på 3 gravida kvinnor och 3 kontrollkvinnor kommer vi att se om så faktiskt är fallet innan vi sätter upp ett egentligt vetenskapligt experiment.

Experimentellt protokoll

Totalt 6 friska och vältränade kvinnor kommer att inkluderas i experimentet, 3 gravida och 3 icke-gravida fertila kvinnor matchade för ålder och vikt.

Rekrytering av ämnen Ämnen och matchade kontrollämnen kommer att rekryteras via Flyers (bilaga) som läggs upp vid Köpenhamns universitet.

Inklusionskriterier

Friska och vältränade gravida kvinnor i 3:e trimestern. Friska kontrollpersoner kommer att matchas utifrån ålder och vikt och får inte ta medicin.

Exklusions kriterier

Pågående sjukdom och/eller läkemedelsintag Rekryteringsförfarande och muntlig deltagarinformation

Den första kontakten med en potentiell deltagare kommer att användas för att ta upp frågor om studien. Därefter kommer en förhandsgranskning att genomföras per telefon, där inklusions- och uteslutningskriterier kommer att bedömas. Individer som inte uppfyller kriterierna för inkludering och uteslutning eller som inte vill delta efter den första förhandsgranskningen kommer inte att bli ytterligare besvärliga. Kvalificerade deltagare kommer sedan att skickas följande information:

Skriftlig deltagarinformation om försöket Samtyckesblankett (S4) Etiknämndens folder 'Ämnespersoners rättigheter i ett hälsovetenskapligt forskningsprojekt' Januari 2023 Information angående behandling/hantering av personuppgifter och biologiskt material/Samtyckesblankett för biobank för framtida forskning Intresserade individer kommer att uppmuntras att noggrant läsa igenom informationen och om de fortfarande är intresserade kommer de att bjudas in till ett informationsmöte och informeras om sin rätt att ta med en stödperson. Informationsmötena kommer att hållas på NEXS, KU, och genomföras av huvudutredaren. Här kommer potentiella deltagare att få muntlig information om experimentet, där experimentprotokollet, procedurerna och datahanteringen förklaras och alla frågor kan ställas privat. De kommer också att informeras om att deras deltagande är frivilligt och att de har rätt att när som helst dra tillbaka sitt samtycke utan förklaring eller konsekvens. De kommer att informeras om att de har rätt till 24 timmars betänketid. Om de däremot är säkra på att de vill delta efter att ha fått all information och huvudutredaren tror att allt har förståtts, kan de också ge sitt samtycke direkt efter informationen genom att underteckna samtyckesformuläret. När båda parter har undertecknat samtyckesformuläret kommer deltagaren att erbjudas en kopia. Inga studierelaterade aktiviteter kommer att utföras förrän samtyckesformuläret är undertecknat. När de tre gravida kvinnorna har inkluderats kommer tre matchande individer att rekryteras enligt samma procedur som beskrivs ovan.

Försöksdagen Det första och enda besöket på försöksplatsen. Deltagarens graviditetsstatus, graviditetsvecka och ålder noteras. Vikt Ett rutinmässigt venöst blodprov tas från ena armvenen.

Max 1 timme

Resultatparametrar och metod Det finns inget ingrepp i detta experiment. Ett rutinmässigt blodprov på 3 ml kommer att tas från 3 gravida kvinnor och 3 matchade icke-gravida kontrollkvinnor.

Forskningsbiobank Totalt 3 ml blod per person kommer att samlas in. Materialet kommer att lagras i en forskningsbiobank. Lagring i forskningsbiobanken är nödvändigt för att kunna analysera blod från de olika försökspersonerna samtidigt i slutet av försöksserien. Därför förväntas det biologiska materialet lagras i upp till 1 år efter avslutad experimentdel av studien (år: 2026).

Biobank

Om deltagaren lämnar separat samtycke kommer material att överföras till en biobank. Deltagaren får oberoende information om biobankens innehåll, plats, hur och när material från biobanken får användas enligt lagstiftning. Biobanksmaterial förvaras vid -70°C i frys hos NEXS i högst 15 år. Materialet kommer endast att användas i forskningsprojekt som godkänts av etikkommittén, såvida inte materialet är oåterkalleligt anonymiserat inom de 15 åren, vilket innebär att ingen, inklusive forskaren, kan återupprätta deltagarens identitet enbart från proverna på etiketten på flaskan eller med hjälp av "verktyg"/ID-loggar som kan återansluta till personen. Det är helt frivilligt om deltagaren kommer att donera sitt biologiska material till biobanken och om de inte önskar det påverkar det inte deras deltagande i studien. Forskningsbiobanken och biobanken är registrerade på KU:s obligatoriska register till Datainspektionen. Sökanden är medveten om att insamling av biologiskt material till en biobank inte omfattas av kommittélagen utan av GDPR/Dataskyddslagen. Det anses dock vara relevant för den samlade beskrivningen av arbetet att en biobank upprättas och därför ingår det i protokollet.

Statistiska överväganden:

Någon formell effektberäkning har inte gjorts, men eftersom ökningen av GDF15 i sig är betydande förväntas 3 gravida kvinnor och 3 icke-gravida kvinnor räcka för att få en bild av om det också finns en signifikant ökning av CAPGDF15.

Etiska betänkligheter:

Projektet har i första hand ett grundforskningsperspektiv. Därför blir det inga fördelar för deltagarna att delta i projektet. Det förväntade grundläggande vetenskapliga bidraget kommer enligt vår uppfattning att uppväga det obehag som deltagarna upplever. Informerat samtycke kommer att erhållas från alla deltagare i enlighet med riktlinjerna från etikkommittén. Experimentet, som går ut på att ta ett enda blodprov, kommer inte att innebära några betydande hälsorisker för deltagarna. Om betydande information om deltagarens hälsotillstånd framkommer under försöksperioden kommer deltagaren att informeras, förutsatt att samtycke lämnats under informationstillfället. Deltagaren kan när som helst få information om uppgifterna – och efter prövningens slut information om resultatet. Försöket har godkänts av Etikkommittén RegionH under journalnummer: Hxxxxxxxx.

Biverkningar, risker och nackdelar:

Enkla mätningar av kroppen, såsom vikt och längd, utförs med hjälp av lämplig mätutrustning. Dessa mätningar förväntas inte medföra någon risk eller obehag. Blodprov kommer att tas av ansvarig läkare. Mild smärta kan uppstå på injektionsstället. Dessutom finns en liten risk för svullnad och ömhet och ett litet blåmärke på injektionsstället som försvinner efter några dagar.

Rapportering av allvarliga biverkningar:

Om ansvarig utredare får kännedom om att en deltagare råkar ut för en allvarlig oväntad händelse under insatsen kommer denne att meddela nämnden detta senast 7 dagar efter att ha fått kännedom om detta. Ansvarig utredare kommer att lämna en årlig rapport under hela försöksperioden som listar alla allvarliga förväntade och oväntade biverkningar och alla allvarliga händelser som har inträffat under perioden. Rapporten kommer att åtföljas av en bedömning av deltagarnas säkerhet. Redovisningen kommer att använda de blanketter som utarbetats av nämndsystemet.

Databehandling och skydd av deltagarnas identitet 1.1. Databehandling och skydd av deltagarnas identitet All information behandlas konfidentiellt, och personligt identifierbar data lagras i enlighet med tillämplig lagstiftning, Dataskyddsförordningen/GDPR. Deltagarnas identitet kommer att kodas med ett deltagarnummer under hela försöket. Deltagarna informeras om vem som har tillgång till deras personligt identifierbara data, inklusive de tillsynsmyndigheter som övervakar hälsovetenskapliga forskningsprojekt, vem som kan komma åt dem och att data som samlats in innan ett eventuellt tillbakadragande från studien kan användas av forskaren i den övergripande dataanalysen . När försöksresultaten publiceras eller sprids kommer de att vara i en form som inte tillåter att enskilda deltagare kan identifieras. Analysmetoden för CAPGDF15 är högspecialiserad och kan endast utföras vid Stanford University, USA, som vi redan samarbetar med. Analysen utförs på en masspektrometer. Själva GDF15 mäts med hjälp av en ELISA-analys i ansvarig utredares laboratorium. Blodproverna överförs pseudonymt och forskarna vid Stanford University kommer aldrig att få information som kan leda till identifiering av deltagarna. Överföring till USA kommer att utföras i enlighet med kapitel V i den allmänna dataskyddsförordningen. Försöket registreras i KU:s obligatoriska register över databehandling. Registren ska på begäran lämnas till Datainspektionen. Försöket har anmälts och godkänts av Köpenhamns universitet, således är försöket registrerat på KU:s obligatoriska listor över databehandling. Listorna ska lämnas till Dataskyddsmyndigheten på begäran.

Finansiella frågor Projektet initieras av professor Erik Richter och analyser och andra driftskostnader finansieras av Novo Nordisk Foundation. Deltagarna får inga avgifter eller annan ersättning.

Publikationer Minst 1 vetenskaplig publikation förväntas från detta projekt. Både positiva, negativa och ofullständiga data kommer att publiceras. Studien är registrerad på clinicaltrials.gov under postnummer: Nxxxxxxxxxxxx. Allt biologiskt material i Biobanken lagras i enlighet med gällande lagstiftning GDPR och "Dataskyddslagen". Biobanken är godkänd och registrerad centralt vid Köpenhamns universitet, där obligatoriska listor över all databehandling och databehandlare av personuppgifter förs.

Försäkring Deltagarna omfattas av lagen om arbetsskadeförsäkring LBK nr. 977 av 2019-09-09 i enlighet med gällande försäkringsvillkor vid Köpenhamns universitet. Deltagarna kommer att omfattas av "Lagen om klagomål och ersättning inom hälso- och sjukvården" (jfr. lag nr. 995 av 2018-06-14 www.retsinformation.dk) under hela rättegången.

Tillgänglighet av information för deltagare Deltagarna kommer när som helst att ha möjlighet att få ytterligare information om försöket genom att kontakta ansvarig projektledare.

Referenser:

Andersson-Hall, U., Joelsson, L., Svedin, P., Mallard, C., & Holmäng, A. (2021). Tillväxt-differentieringsfaktor 15-nivåer i överviktiga och friska graviditeter: Relation till insulinresistens och insulinsekretorisk funktion. Clinical Endocrinology, 95(1), 92-100. https://doi.org/10.1111/CEN.14433 Andersson-Hall, U., Svedin, P., Mallard, C., Blennow, K., Zetterberg, H., & Holmäng, A. (2021). Tillväxtdifferentieringsfaktor 15 ökar i både cerebrospinalvätska och serum under graviditeten. PloS One, 16(5), e0248980. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0248980 Lyu, C., Ni, T., Guo, Y., Zhou, T., Chen, Z.-J., Yan, J., & Li, Y. (2023). Otillräckligt GDF15-uttryck predisponerar kvinnor för oförklarlig återkommande graviditetsförlust genom att försämra extravillös trofoblastinvasion. https://doi.org/10.1111/cpr.13514 Wiggenhorn, A. L., Abuzaid, H. Z., Coassolo, L., Li, V. L., Tanzo, J. T., Wei, W., Lyu, X., Svensson, K. J., Long, J. Z., & Tsai, W. (n.d.). En klass av utsöndrade däggdjurspeptider med potential att utöka cell-cellkommunikation. https://doi.org/10.1101/2023.06.02.543503