Wybrane wskaźniki immunologiczne i mikroflora u pacjentów z przedwczesnym porodem i stanem przedrzucawkowym (PRIME)

CELE

Podstawowym celem tego projektu jest określenie różnic pomiędzy krążącą pulą regulacyjnych proporcji subpopulacji Treg a populacjami łożyska u pacjentów z porodem przedwczesnym i stanem przedrzucawkowym. Dla głównego celu przeprowadzono badanie pilotażowe. Kolejnym celem jest ocena wpływu mikroflory na regulację komórek Treg, zwłaszcza w odniesieniu do mechanizmów porodu przedwczesnego i stanu przedrzucawkowego. W miarę rosnącej wiedzy na temat roli mikroflory uważa się, że mikroflora matki może znacząco wpływać na ustawienie odpowiedzi immunoregulacyjnych nawet w okresie prenatalnym. Ponieważ Treg odgrywają kluczową rolę w regulacji równowagi immunologicznej i są niezbędne do indukcji i utrzymania tolerancji obwodowej, stawiamy hipotezę, że nieprawidłowości w funkcjonowaniu tej populacji są ważnymi czynnikami zwiększającymi ryzyko patologii ciążowych (poród przedwczesny i stan przedrzucawkowy). Takiemu rozregulowaniu najprawdopodobniej towarzyszy zaburzenie fizjologicznego profilu epigenetycznego Treg, na który z kolei wpływa nieprawidłowy skład mikroflory. Lepsze zrozumienie tych procesów i identyfikacja pozytywnie lub negatywnie uczestniczących gatunków bakterii mogłoby umożliwić bardziej wiarygodne przewidywanie ryzyka ciąży i zapobiegawcze zastosowanie modulacji mikroflory.

Poród przedwczesny definiuje się jako przerwanie ciąży przed końcem 37. tygodnia ciąży. Odgrywa rolę w 10% wszystkich ciąż, w tym porodach samoistnych lub wywołanych medycznie. Stale podejmujemy wysiłki mające na celu odroczenie przedwczesnego porodu, aby zminimalizować jego konsekwencje, takie jak niska masa urodzeniowa i inne ryzykowne zdarzenia. Stan przedrzucawkowy to poważne schorzenie związane z ciśnieniem krwi, które rozwija się w czasie ciąży. Osoby ze stanem przedrzucawkowym często mają wysokie ciśnienie krwi (nadciśnienie) i wysoki poziom białka w moczu (białkomocz). Odgrywa rolę w 5% wszystkich ciąż. Stan przedrzucawkowy rozwija się zwykle po 20. tygodniu ciąży. Może również wpływać na inne narządy organizmu i być niebezpieczna zarówno dla matki, jak i jej nienarodzonego dziecka. Dlatego też wiele badań naukowych koncentruje się obecnie na wczesnym przewidywaniu przedwczesnego porodu i stanu przedrzucawkowego oraz na znalezieniu konkretnego parametru umożliwiającego oszacowanie ryzyka przedwczesnego porodu i stanu przedrzucawkowego u pacjentek.

HIPOTEZA I CELE

Hipoteza 1: Brak równowagi pomiędzy tolerogennymi podzbiorami limfocytów T (Treg, Th2, Th9 i Th22) a podzbiorami prozapalnymi (Th1 i Th17) jest oznaką przedwczesnego porodu lub stanu przedrzucawkowego.

Cel szczegółowy 1: Określenie różnic pomiędzy subpopulacją limfocytów T krążących i łożyskowych u pacjentek z porodem przedwczesnym i stanem przedrzucawkowym. Wcześniej opublikowane analizy drzew i ich właściwości fenotypowych dają niejednoznaczne lub nawet sprzeczne wyniki. Z tego powodu proponujemy bardziej szczegółowe podejście, łączące głębokie immunofenotypowanie zdolne do identyfikacji podzbiorów efektorowych komórek T, Treg i komórek NK oraz ich fenotypu jakościowego wraz z oceną możliwości funkcjonalnych Treg.

Hipoteza 2: Można zidentyfikować określone gatunki bakterii w celu modulowania epigenetycznego utrzymania fenotypu Treg.

Cel szczegółowy 2: Określenie wpływu mikroflory na regulację Treg. Ekspozycja na mikroflorę jest jednym z najważniejszych czynników środowiskowych wprowadzanych w okresie okołoporodowym. W kontekście zdrowia jelit bada się zdolność niektórych gatunków bakterii probiotycznych do promowania tolerancji immunologicznej, powstrzymywania stanów zapalnych i niepożądanych reaktywności. Wiadomo, że zarówno bakterie, jak i ich produkty metaboliczne kształtują układ odpornościowy. Wpływając na programowanie epigenetyczne, modulują fenotyp i funkcję różnych komórek odpornościowych, w tym Treg. Stawiamy hipotezę, że można zidentyfikować korzystne gatunki bakterii, które promują odpowiednie epigenetyczne utrzymanie fenotypu, funkcji i stabilności Treg, a tym samym wspierają rolę tolerogenną Treg. Wręcz przeciwnie, niektóre gatunki bakterii przyczynią się do rozregulowania epigenetycznego Treg i wprowadzą bardziej prozapalne środowisko z funkcjonalnie niedoborami komórek Treg. Aby przetestować tę hipotezę, scharakteryzujemy skład mikrobiologiczny materiału pobranego od matki za pomocą wymazu z jamy ustnej, odbytu i pochwy podczas ciąży i podczas porodu.

CHARAKTERYSTYKA OCZEKIWANYCH WYNIKÓW

Głównym rezultatem projektu będzie lepsze zrozumienie procesów regulacyjnych biorących udział w równowadze odpornościowej w przypadku porodu przedwczesnego i stanu przedrzucawkowego. Szczególna uwaga zostanie poświęcona dynamice i charakterystyce funkcjonalnej Treg i ich subpopulacji, biorąc pod uwagę rolę mikrobioty matki. Uzyskane wyniki zostaną zaprezentowane na krajowych i międzynarodowych kongresach i sympozjach, a także opublikowane w międzynarodowych czasopismach naukowych.