Assinatura MoMa Durante Granulomatose (MOSAR)

"A sarcoidose é uma doença inflamatória caracterizada pela presença de granulomas coalescentes, fortemente agrupados e não necrotizantes. O diagnóstico é baseado em três critérios principais: apresentação clínica compatível, presença de inflamação granulomatosa não necrotizante e exclusão de doenças granulomatosas alternativas. Observa-se uma ampla gama de fenótipos clínicos dependendo da localização das lesões granulomatosas que podem acometer qualquer órgão, sendo os pulmões o local mais acometido. A sarcoidose compartilha muitas semelhanças com a tuberculose, na qual a formação do granuloma é desencadeada pelo Mycobacterium tuberculosis (M. tb). Essas semelhanças fenotípicas entre as duas doenças apresentam muitos desafios para o diagnóstico, manejo clínico e terapia.

Nossa compreensão dos fatores que contribuem para o desenvolvimento da sarcoidose, formação e manutenção do granuloma permanece limitada. Parte desse desafio é que o desenvolvimento do granuloma pode envolver fatores ambientais e genéticos, que contribuem para o recrutamento de células imunes para formar o granuloma. As células imunes envolvidas no granuloma incluem (1) células T CD4 Th1 e Th17 e suas citocinas associadas (por exemplo, IFNγ, TNFα, IL-17, IL-2); e (2) monócitos (Mo) e macrófagos (Ma) incluindo tipos pró-inflamatórios M1 e pró-fibrose M2. No entanto, os fatores específicos que contribuem para a manutenção e evolução do granuloma ainda precisam ser identificados. Entre eles, podemos supor que a imunidade treinada, a persistência do antígeno ou o microambiente estão envolvidos nessa resposta imune crônica desregulada. Essa melhor compreensão da fisiopatologia da doença pode permitir o desenvolvimento de novos tratamentos, já que atualmente os corticosteróides continuam sendo a base da terapia.

Nossa principal hipótese é que a formação e manutenção do granuloma depende principalmente da superativação de monócitos (Mo) e macrófagos (Ma). Para tanto, o estudo visa (i) definir a assinatura sistêmica do MoMa na sarcoidose, (ii) caracterizar essa assinatura in situ em amostras de tecido, e (iii) identificar os fatores causais que participam da superativação crônica do MoMa. Assim, uma coorte de pacientes com sarcoidose será comparada com pacientes com tuberculose. A assinatura sistêmica do MoMa será definida em sangue total (modelo TruCulture) e depois in situ por meio de diferentes métodos (citometria de fluxo espectral multiparâmetros, RNA-seq, Luminex, citometria de massa por imagem). O epigenoma dos monócitos será estudado graças ao CUT&Tag. A assinatura sistêmica do MoMa será definida ex vivo em diferentes momentos (M0, M6 e M12) durante o curso da doença com abordagens fenotípicas, transcriptômicas, citocinas e funcionais. A assinatura previamente identificada será estudada in situ e complementada pela caracterização da arquitetura do granuloma e das interações microambientais, que podem ser moduladas por modificações epigenéticas. Assim, o epigenoma dos monócitos será analisado em dois grupos (sarcoidose e tuberculose). Estes resultados permitiriam compreender melhor a fisiopatologia da sarcoidose e, por fim, poderão suscitar novas estratégias terapêuticas. Finalmente, o estudo pode desafiar o dogma da imunidade inata/autoinflamação versus imunidade adaptativa/autoimunidade/memória”.