Estudo de Fase II de Linfócitos Autólogos Antitumorais em Cultura de Curto Prazo Após Quimioterapia de Depleção de Linfócitos em Melanoma Metastático

Fundo:

• Linfócitos infiltrantes tumorais (TIL) podem mediar a regressão de melanoma metastático volumoso quando administrados a um paciente autólogo com alta dose (HD) de IL-2 após um regime preparativo de quimioterapia não mieloablativo (NMA), mas linfodepletor.
• Investigações clínicas e modelos animais pré-clínicos demonstraram que menos tempo em cultura, telômeros mais longos e um fenótipo de linfócitos menos diferenciados estão associados a TIL que são capazes de mediar respostas clínicas objetivas e persistir a longo prazo no hospedeiro.
• Métodos anteriores para gerar TIL requerem triagem para especificidade antitumoral usando a produção de gama-interferon (IFN) pelo TIL. No entanto, a triagem in vitro depende de reagentes tumorais autólogos que muitas vezes não estão disponíveis; e a liberação de gama-IFN in vitro pode não ser a melhor correlação com a eficácia in vivo. Além disso, esse método requer longos tempos de cultura in vitro (44 dias) e, portanto, reduz a heterogeneidade clonal das culturas de TIL e resulta em culturas de TIL com comprimentos de telômeros mais curtos e fenótipos que são direcionados para um fenótipo mais diferenciado.
• Em experimentos pré-clínicos da Surgery Branch, avaliamos um método para gerar rapidamente TIL jovens a partir de tumores de melanoma com características fenotípicas ideais.

Objetivos.

• Na coorte 1, determinar a capacidade de células TIL autólogas infundidas após cultura in vitro mínima em conjunto com alta dose de aldesleucina (IL-2) após um regime preparativo de linfodepleção não mieloablativa para mediar a regressão do tumor em pacientes com melanoma metastático.
• Na coorte 2, para determinar a capacidade de cluster autólogo de células de diferenciação 4 (CD4+) células TIL depletadas infundidas após cultura in vitro mínima em conjunto com alta dose de aldesleucina (IL-2) após um regime preparativo de linfodepleção não mieloablativa para mediar a regressão do tumor em pacientes com melanoma metastático.
• Na coorte 3, determinar a capacidade de células TIL autólogas com depleção de células CD4+ infundidas após cultura in vitro mínima em conjunto com alta dose de aldesleucina após esquema de depleção linfóide de quimiorradiação para mediar a regressão tumoral completa em pacientes com melanoma metastático.
• De forma prospectiva e randomizada, comparar a capacidade de células TIL autólogas (coorte 4) e células TIL autólogas com depleção de células CD4plus (regime de coorte, para mediar a regressão tumoral, sobrevida livre de progressão e sobrevida global em pacientes com melanoma metastático.
• Avalie a toxicidade desses regimes de tratamento.
• Determine a taxa de repovoamento das células TIL jovens em pacientes tratados e estabeleça correlatos in vitro de culturas TIL que medeiam a resposta objetiva e a persistência in vivo.

Elegibilidade:

Pacientes com 18 anos de idade ou mais devem ter:

• Melanoma metastático;
• Valores normais para valores laboratoriais básicos.

Os pacientes podem não ter:

• Recebeu terapia de transferência celular anterior que incluiu quimioterapia não mieloablativa ou ablativa;
• Principais doenças médicas concomitantes;
• Qualquer forma de imunodeficiência;
• Hipersensibilidade grave a qualquer um dos agentes utilizados neste estudo;
• Contra-indicações para administração de altas doses de IL-2.

Projeto:

• Os pacientes serão submetidos à ressecção para obtenção do tumor para geração de culturas autólogas de TIL.

• Coorte 1:

  • Todos os pacientes receberão um regime preparativo de depleção de linfócitos não mieloablativo de ciclofosfamida (60 mg/kg/dia IV) nos dias -7 e -6 e fludarabina (25 mg/m^2/dia IV) nos dias -5 a -1 .
  • No dia 0, os pacientes receberão a infusão de TIL autólogo e, em seguida, iniciarão altas doses de aldesleucina (720.000 UI/kg IV a cada 8 horas por até 15 doses).
  • A resposta clínica e imunológica será avaliada cerca de 4-6 semanas após a infusão de TIL.
  • Usando um pequeno projeto ideal de Fase II de dois estágios, inicialmente 21 pacientes serão inscritos e, se dois ou mais dos primeiros 21 pacientes tiverem uma resposta clínica (resposta parcial (PR) ou resposta completa (CR)), o acréscimo continuará a 41 pacientes, visando uma meta de 20% para resposta objetiva. A coorte 1 será encerrada com a emenda D.
• A Coorte 2 será iniciada com a alteração D, na qual as células CD4+ serão eliminadas das culturas, usando o aparelho Miltenyi Clinimacs, antes de realizar a expansão rápida das células TIL jovens. Os pacientes da coorte 2 receberão TIL jovens não selecionados com depleção de células CD4+. Os pacientes também receberão altas doses de IL-2 após regime preparativo de quimioterapia não mieloablativa, mas linfodepletora, conforme descrito acima para a coorte 1. A resposta clínica e imunológica será avaliada cerca de 4-6 semanas após a infusão de TIL. Usando um pequeno projeto ideal de Fase II de dois estágios, inicialmente 18 pacientes serão inscritos e, se três ou mais dos primeiros 18 pacientes tiverem uma resposta clínica (PR ou CR), o acréscimo continuará para 35 pacientes, visando uma meta de 30% para uma resposta objetiva. Com o início da Coorte 3 com a alteração H, os pacientes só serão incluídos na Coorte 2 se não forem elegíveis para receber 600 cGy devido à radiação anterior ou à incapacidade de mobilizar células do grupo de diferenciação 34 (CD34+). Também neste momento, a inclusão será expandida para um total de 50 pacientes na coorte 2. A coorte 2 será encerrada com a emenda K.
• A coorte 3 será iniciada com a alteração H, em que os pacientes receberão um regime preparativo de depleção de linfócitos de quimiorradiação que consiste em ciclofosfamida, fludarabina e irradiação total do corpo de 600 cGy, seguido de infusão intravenosa de TIL jovem autólogo com depleção de células CD4+ mais alta dose IV de IL-2. A resposta clínica e imunológica será avaliada cerca de 4-6 semanas após a infusão de TIL. Usando um pequeno projeto ideal de Fase II de dois estágios, inicialmente 26 pacientes serão inscritos e, se um ou mais dos primeiros 26 pacientes tiverem uma resposta completa (CR), o acréscimo continuará para 51 pacientes, visando uma meta de 10% para conclusão resposta. A coorte 3 será encerrada com a emenda K.

Randomização prospectiva entre as coortes 4 e 5:

• Coorte 4:

  • Todos os pacientes receberão um regime preparativo de depleção de linfócitos não mieloablativo de ciclofosfamida (60 mg/kg/dia IV) nos dias -7 e -6 e fludarabina (25 mg/m^2/dia IV) nos dias -5 a -1 .
  • No dia 0, os pacientes receberão a infusão de TIL autólogo e, em seguida, iniciarão altas doses de aldesleucina (720.000 UI/kg IV a cada 8 horas por até 15 doses).
  • A resposta clínica e imunológica será avaliada cerca de 4-6 semanas após a infusão de TIL.

• Coorte 5

  • Todos os pacientes receberão um regime preparativo de depleção de linfócitos não mieloablativo de ciclofosfamida (60 mg/kg/dia IV) nos dias -7 e -6 e fludarabina (25 mg/m^2/dia IV) nos dias -5 a -1 .
  • No dia 0, os pacientes receberão a infusão de TIL CD4+ depletado autólogo e, em seguida, iniciarão altas doses de aldesleucina (720.000 UI/kg IV a cada 8 horas por até 15 doses).
  • A resposta clínica e imunológica será avaliada cerca de 4-6 semanas após a infusão de TIL.