Fase II-studie av kortsiktig dyrkede anti-tumor autologe lymfocytter etter lymfocytt-depleterende kjemoterapi ved metastatisk melanom

Bakgrunn:

• Tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) kan mediere regresjon av voluminøs metastatisk melanom når det administreres til en autolog pasient med høydose (HD) IL-2 etter et ikke-myeloablativt (NMA) men lymfodepletterende kjemoterapiregime.
• Kliniske undersøkelser og prekliniske dyremodeller har vist at mindre tid i kultur, lengre telomerer og en mindre differensiert lymfocyttfenotype er assosiert med TIL som er i stand til å formidle objektive kliniske responser og vedvare langsiktig i verten.
• Tidligere metoder for å generere TIL krever screening for antitumorspesifisitet ved bruk av gamma-interferon (IFN) produksjon av TIL. Imidlertid avhenger in vitro-screening av autologe tumorreagenser som ofte er utilgjengelige; og gamma-IFN-frigjøring in vitro er kanskje ikke den beste korrelasjonen til in vivo-effektivitet. I tillegg krever denne metoden lange in vitro-kulturtider (44 dager), og reduserer derfor den klonale heterogeniteten til TIL-kulturer, og resulterer i TIL-kulturer med kortere telomerlengder og fenotyper som er skjev mot en mer differensiert fenotype.
• I Surgery Branch pre-kliniske eksperimenter evaluerte vi en metode for raskt å generere unge TIL fra melanomsvulster med optimale fenotypiske egenskaper.

Mål:

• I kohort 1, for å bestemme evnen til autologe TIL-celler infundert etter minimal in vitro-kultur i forbindelse med høydose aldesleukin (IL-2) etter et ikke-myeloablativt lymfodepletende preparativt regime for å mediere tumorregresjon hos pasienter med metastatisk melanom.
• I kohort 2, for å bestemme evnen til autolog klynge av differensiering 4 (CD4+) celleutarmede TIL-celler infundert etter minimal in vitro-kultur i forbindelse med høydose aldesleukin (IL-2) etter et ikke-myeloablativt lymfodepletende preparativt regime for å mediere tumorregresjon hos pasienter med metastatisk melanom.
• I kohort 3, for å bestemme evnen til autologe CD4+-celle-utarmede TIL-celler infundert etter minimal in vitro-kultur i forbindelse med høydose aldesleukin etter kjemoradiasjonslymfoidutarmende regime for å mediere fullstendig tumorregresjon hos pasienter med metastatisk melanom.
• På en prospektiv randomisert måte, for å sammenligne evnen til autologe TIL-celler (kohort 4) og autologe CD4plus-celleutarmede TIL-celler (kohortregime, for å mediere tumorregresjon, progresjonsfri overlevelse og total overlevelse hos pasienter med metastatisk melanom.
• Vurder toksisiteten til disse behandlingsregimene.
• Bestem frekvensen av repopulasjon av de unge TIL-cellene hos behandlede pasienter og etablere in vitro-korrelater av TIL-kulturer som medierer objektiv respons og in vivo persistens.

Kvalifisering:

Pasienter som er 18 år eller eldre må ha:

• Metastatisk melanom;
• Normalverdier for grunnleggende laboratorieverdier.

Pasienter har kanskje ikke:

• Mottatt tidligere celleoverføringsterapi som inkluderte ikke-myeloablativ eller ablativ kjemoterapi;
• Samtidig store medisinske sykdommer;
• Enhver form for immunsvikt;
• Alvorlig overfølsomhet overfor noen av midlene brukt i denne studien;
• Kontraindikasjoner for administrering av høy dose IL-2.

Design:

• Pasienter vil gjennomgå reseksjon for å oppnå tumor for generering av autologe TIL-kulturer.

• Kohort 1:

  • Alle pasienter vil motta et ikke-myeloablativt lymfocytt-depleterende preparativt regime med cyklofosfamid (60 mg/kg/dag IV) på dag -7 og -6 og fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) på dag -5 til -1 .
  • På dag 0 vil pasienter få infusjon av autolog TIL og deretter begynne høydose aldesleukin (720 000 IE/kg IV hver 8. time i opptil 15 doser).
  • Klinisk og immunologisk respons vil bli evaluert ca. 4-6 uker etter TIL-infusjon.
  • Ved å bruke et lite optimalt to-trinns fase II-design, vil i utgangspunktet 21 pasienter bli registrert, og hvis to eller flere av de første 21 pasientene har en klinisk respons (delvis respons (PR) eller fullstendig respons (CR)), vil akkumuleringen fortsette å 41 pasienter, med et mål på 20 % for objektiv respons. Kohort 1 vil bli avsluttet med endring D.
• Kohort 2 vil bli initiert med endring D der CD4+-celler vil bli eliminert fra kulturene, ved bruk av Miltenyi Clinimacs-apparatet, før den raske ekspansjonen av de unge TIL-cellene utføres. Pasienter i kohort 2 vil motta CD4+-celleutarmede unge uslekterte TIL. Pasienter vil også få høydose IL-2 etter ikke-myeloablativ, men lymfodepletterende kjemoterapipreparativ regime som beskrevet ovenfor for kohort 1. Klinisk og immunologisk respons vil bli evaluert ca. 4-6 uker etter TIL-infusjon. Ved å bruke et lite optimalt to-trinns Fase II-design, vil i utgangspunktet 18 pasienter bli registrert, og hvis tre eller flere av de første 18 pasientene har en klinisk respons (PR eller CR), vil opptjeningen fortsette til 35 pasienter, med et mål på 30 %. for objektiv respons. Med initiering av kohort 3 med endring H, vil pasienter kun tilfalle kohort 2 hvis de ikke er kvalifisert til å motta 600 cGy på grunn av tidligere stråling, eller manglende evne til å mobilisere klynge av differensieringsceller 34 (CD34+). Også på dette tidspunktet vil opptjening bli utvidet til totalt 50 pasienter i kull 2. Kohort 2 avsluttes med endring K.
• Kohort 3 vil bli initiert med endring H, der pasienter vil motta et kjemoradiasjonslymfocytt-depleterende preparativt regime bestående av cyklofosfamid, fludarabin og 600 cGy totalkroppsbestråling etterfulgt av intravenøs infusjon av autolog CD4+ celleutarmet ung TIL- pluss IV høydose IL TIL2. Klinisk og immunologisk respons vil bli evaluert ca. 4-6 uker etter TIL-infusjon. Ved å bruke et lite optimalt to-trinns Fase II-design, vil i utgangspunktet 26 pasienter bli registrert, og hvis en eller flere av de første 26 pasientene har en fullstendig respons (CR), vil akkumuleringen fortsette til 51 pasienter, med et mål på 10 % for fullført respons. Kohort 3 vil bli avsluttet med endring K.

Prospektiv randomisering mellom kohorter 4 og 5:

• Kohort 4:

  • Alle pasienter vil motta et ikke-myeloablativt lymfocytt-depleterende preparativt regime med cyklofosfamid (60 mg/kg/dag IV) på dag -7 og -6 og fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) på dag -5 til -1 .
  • På dag 0 vil pasienter få infusjon av autolog TIL og deretter begynne høydose aldesleukin (720 000 IE/kg IV hver 8. time i opptil 15 doser).
  • Klinisk og immunologisk respons vil bli evaluert ca. 4-6 uker etter TIL-infusjon.

• Kohort 5

  • Alle pasienter vil motta et ikke-myeloablativt lymfocytt-depleterende preparativt regime med cyklofosfamid (60 mg/kg/dag IV) på dag -7 og -6 og fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) på dag -5 til -1 .
  • På dag 0 vil pasienter få infusjon av autolog CD4+ utarmet TIL og deretter begynne høydose aldesleukin (720 000 IE/kg IV hver 8. time i opptil 15 doser).
  • Klinisk og immunologisk respons vil bli evaluert ca. 4-6 uker etter TIL-infusjon.