Badanie fazy II krótkoterminowych hodowanych autologicznych limfocytów przeciwnowotworowych po chemioterapii zubożającej limfocyty w czerniaku z przerzutami

Tło:

• Limfocyty naciekające guz (TIL) mogą pośredniczyć w regresji czerniaka z dużymi przerzutami, gdy są podawane autologicznemu pacjentowi z dużą dawką (HD) IL-2 po chemioterapii niemieloablacyjnej (NMA), ale limfodeplecyjnej.
• Badania kliniczne i przedkliniczne modele zwierzęce wykazały, że krótszy czas hodowli, dłuższe telomery i mniej zróżnicowany fenotyp limfocytów są związane z TIL, które są zdolne do pośredniczenia w obiektywnych odpowiedziach klinicznych i utrzymują się długo u gospodarza.
• Poprzednie metody generowania TIL wymagały badań przesiewowych pod kątem specyficzności przeciwnowotworowej przy użyciu produkcji interferonu gamma (IFN) przez TIL. Jednak badania przesiewowe in vitro zależą od autologicznych odczynników nowotworowych, które często są niedostępne; a uwalnianie gamma-IFN in vitro może nie być najlepiej skorelowane ze skutecznością in vivo. Ponadto ta metoda wymaga długich czasów hodowli in vitro (44 dni), a zatem zmniejsza heterogeniczność klonalną hodowli TIL i daje w wyniku hodowle TIL o krótszych długościach telomerów i fenotypach, które są pochylone w kierunku bardziej zróżnicowanego fenotypu.
• W eksperymentach przedklinicznych Oddziału Chirurgii oceniliśmy metodę szybkiego generowania młodych TIL z guzów czerniaka o optymalnych cechach fenotypowych.

Cele:

• W kohorcie 1, w celu określenia zdolności autologicznych komórek TIL podanych we wlewie po minimalnej hodowli in vitro w połączeniu z dużą dawką aldesleukiny (IL-2) po niemieloablacyjnym schemacie preparatywnym limfodeplecji do pośredniczenia w regresji guza u pacjentów z czerniakiem z przerzutami.
• W kohorcie 2, w celu określenia zdolności autologicznych klastrów różnicowania 4 (CD4+) komórek TIL zubożonych w komórki TIL, podawanych w infuzji po minimalnej hodowli in vitro w połączeniu z dużą dawką aldesleukiny (IL-2) po niemieloablacyjnym schemacie preparatycznym limfodeplecji, do pośredniczenia w regresji nowotworu u pacjentów z przerzutowym czerniakiem.
• W kohorcie 3, w celu określenia zdolności autologicznych komórek TIL zubożonych w komórki CD4+, podanych we wlewie po minimalnej hodowli in vitro w połączeniu z dużą dawką aldesleukiny po schemacie zubażania limfoidów z chemioradioterapią, do pośredniczenia w całkowitej regresji guza u pacjentów z czerniakiem z przerzutami.
• W prospektywny, randomizowany sposób, aby porównać zdolność autologicznych komórek TIL (kohorta 4) i autologicznych komórek TIL zubożonych w komórki CD4plus (schemat kohortowy, do pośredniczenia w regresji guza, przeżyciu bez progresji i całkowitym przeżyciu u pacjentów z czerniakiem z przerzutami.
• Oceń toksyczność tych schematów leczenia.
• Określenie tempa repopulacji młodych komórek TIL u leczonych pacjentów i ustalenie in vitro korelatów hodowli TIL, które pośredniczą w obiektywnej odpowiedzi i utrzymywaniu się in vivo.

Uprawnienia:

Pacjenci, którzy ukończyli 18 lat muszą mieć:

• czerniak przerzutowy;
• Wartości normalne dla podstawowych wartości laboratoryjnych.

Pacjenci mogą nie mieć:

• Otrzymał wcześniejszą terapię transferu komórek, która obejmowała chemioterapię niemieloablacyjną lub ablacyjną;
• Współistniejące poważne choroby medyczne;
• Jakakolwiek forma niedoboru odporności;
• Ciężka nadwrażliwość na którykolwiek ze środków stosowanych w tym badaniu;
• Przeciwwskazania do podania dużych dawek IL-2.

Projekt:

• Pacjenci zostaną poddani resekcji w celu uzyskania guza do wytworzenia autologicznych hodowli TIL.

• Kohorta 1:

  • Wszyscy pacjenci otrzymają cyklofosfamid (60 mg/kg/dzień iv.) w dniach -7 i -6 oraz fludarabinę (25 mg/m^2/dzień iv.) w dniach -5 do -1. .
  • W dniu 0 pacjenci otrzymają infuzję autologicznego TIL, a następnie rozpoczną podawanie dużych dawek aldesleukiny (720 000 IU/kg IV co 8 godzin przez maksymalnie 15 dawek).
  • Odpowiedź kliniczna i immunologiczna zostanie oceniona około 4-6 tygodni po infuzji TIL.
  • Wykorzystując mały, optymalny, dwuetapowy projekt fazy II, początkowo włączonych zostanie 21 pacjentów, a jeśli u dwóch lub więcej z pierwszych 21 pacjentów wystąpi odpowiedź kliniczna (odpowiedź częściowa (PR) lub odpowiedź całkowita (CR)), naliczanie będzie kontynuowane. 41 pacjentów, dążąc do uzyskania obiektywnej odpowiedzi na poziomie 20%. Kohorta 1 zostanie zamknięta poprawką D.
• Kohorta 2 zostanie zainicjowana poprawką D, zgodnie z którą komórki CD4+ zostaną wyeliminowane z hodowli, przy użyciu aparatu Miltenyi Clinimacs, przed wykonaniem szybkiej namnażania młodych komórek TIL. Pacjenci w kohorcie 2 otrzymają młody niewyselekcjonowany TIL pozbawiony komórek CD4+. Pacjenci otrzymają również wysoką dawkę IL-2 po chemioterapii niemieloablacyjnej, ale limfodeplecyjnej, jak opisano powyżej dla kohorty 1. Odpowiedź kliniczna i immunologiczna zostanie oceniona około 4-6 tygodni po infuzji TIL. Stosując niewielki, optymalny, dwuetapowy projekt fazy II, początkowo włączonych zostanie 18 pacjentów, a jeśli u trzech lub więcej z pierwszych 18 pacjentów wystąpi odpowiedź kliniczna (PR lub CR), naliczanie będzie kontynuowane do 35 pacjentów, docelowo docelowo na poziomie 30%. za obiektywną odpowiedź. Wraz z rozpoczęciem Kohorty 3 z poprawką H, pacjenci będą zaliczani do Kohorty 2 tylko wtedy, gdy nie kwalifikują się do otrzymania 600 cGy z powodu wcześniejszego naświetlania lub niemożności mobilizacji klastra komórek różnicowania 34 (CD34+). Również w tym czasie naliczanie zostanie rozszerzone do łącznej liczby 50 pacjentów w kohorcie 2. Kohorta 2 zostanie zamknięta poprawką K.
• Kohorta 3 zostanie zapoczątkowana poprawką H, zgodnie z którą pacjenci otrzymają chemioradioterapię zubożającą limfocyty w schemacie preparatywnym składającym się z cyklofosfamidu, fludarabiny i napromieniowania całego ciała 600 cGy, po którym nastąpi dożylna infuzja autologicznego młodego TIL pozbawionego komórek CD4+ plus IV wysoka dawka IL-2. Odpowiedź kliniczna i immunologiczna zostanie oceniona około 4-6 tygodni po infuzji TIL. Wykorzystując mały, optymalny, dwuetapowy projekt fazy II, początkowo włączonych zostanie 26 pacjentów, a jeśli jeden lub więcej z pierwszych 26 pacjentów uzyska całkowitą odpowiedź (CR), gromadzenie będzie kontynuowane do 51 pacjentów, celując w cel 10% całkowitej odpowiedź. Kohorta 3 zostanie zamknięta poprawką K.

Prospektywna randomizacja między kohortami 4 i 5:

• Kohorta 4:

  • Wszyscy pacjenci otrzymają cyklofosfamid (60 mg/kg/dzień iv.) w dniach -7 i -6 oraz fludarabinę (25 mg/m^2/dzień iv.) w dniach -5 do -1. .
  • W dniu 0 pacjenci otrzymają infuzję autologicznego TIL, a następnie rozpoczną podawanie dużych dawek aldesleukiny (720 000 IU/kg IV co 8 godzin przez maksymalnie 15 dawek).
  • Odpowiedź kliniczna i immunologiczna zostanie oceniona około 4-6 tygodni po infuzji TIL.

• Kohorta 5

  • Wszyscy pacjenci otrzymają cyklofosfamid (60 mg/kg/dzień iv.) w dniach -7 i -6 oraz fludarabinę (25 mg/m^2/dzień iv.) w dniach -5 do -1. .
  • W dniu 0 pacjenci otrzymają wlew autologicznego TIL zubożonego w CD4+, a następnie rozpoczną podawanie dużych dawek aldesleukiny (720 000 IU/kg IV co 8 godzin przez maksymalnie 15 dawek).
  • Odpowiedź kliniczna i immunologiczna zostanie oceniona około 4-6 tygodni po infuzji TIL.