Phase-II-Studie mit kurzfristig kultivierten autologen Antitumor-Lymphozyten nach lymphozytendepletierender Chemotherapie bei metastasierendem Melanom

Hintergrund:

• Tumorinfiltrierende Lymphozyten (TIL) können die Regression von voluminösem metastasierendem Melanom vermitteln, wenn sie einem autologen Patienten mit hochdosiertem (HD) IL-2 nach einer nicht-myeloablativen (NMA), aber lymphodepletierenden präparativen Chemotherapie verabreicht werden.
• Klinische Untersuchungen und vorklinische Tiermodelle haben gezeigt, dass eine kürzere Kulturdauer, längere Telomere und ein weniger differenzierter Lymphozyten-Phänotyp mit TIL assoziiert sind, die in der Lage sind, objektive klinische Reaktionen zu vermitteln und im Wirt langfristig bestehen zu bleiben.
• Frühere Verfahren zur Erzeugung von TIL erfordern ein Screening auf Anti-Tumor-Spezifität unter Verwendung von Gamma-Interferon (IFN)-Produktion durch das TIL. Allerdings hängt das In-vitro-Screening von autologen Tumorreagenzien ab, die oft nicht verfügbar sind; und die Gamma-IFN-Freisetzung in vitro ist möglicherweise nicht die beste Korrelation zur In-vivo-Wirksamkeit. Darüber hinaus erfordert dieses Verfahren lange In-vitro-Kulturzeiten (44 Tage) und verringert daher die klonale Heterogenität von TIL-Kulturen und führt zu TIL-Kulturen mit kürzeren Telomerlängen und Phänotypen, die zu einem differenzierteren Phänotyp neigen.
• In vorklinischen Experimenten von Surgery Branch haben wir eine Methode zur schnellen Generierung junger TIL aus Melanomtumoren mit optimalen phänotypischen Eigenschaften evaluiert.

Ziele:

• In Kohorte 1, um die Fähigkeit von autologen TIL-Zellen zu bestimmen, die nach einer minimalen In-vitro-Kultur in Verbindung mit hochdosiertem Aldesleukin (IL-2) nach einem nicht-myeloablativen präparativen Regime zur Lymphdepletion infundiert wurden, um eine Tumorregression bei Patienten mit metastasierendem Melanom zu vermitteln.
• In Kohorte 2, um die Fähigkeit von autologen Cluster of Differentiation 4 (CD4+)-Zell-depletierten TIL-Zellen zu bestimmen, die nach einer minimalen In-vitro-Kultur in Verbindung mit hochdosiertem Aldesleukin (IL-2) nach einem nicht-myeloablativen lymphodepletierenden präparativen Schema infundiert wurden, um eine Tumorregression zu vermitteln bei Patienten mit metastasiertem Melanom.
• In Kohorte 3, um die Fähigkeit von autologen CD4+-Zell-depletierten TIL-Zellen zu bestimmen, die nach minimaler In-vitro-Kultur in Verbindung mit hochdosiertem Aldesleukin nach Chemoradiation-Lymphoid-Depletion-Schema infundiert wurden, um eine vollständige Tumorregression bei Patienten mit metastasierendem Melanom zu vermitteln.
• In prospektiver, randomisierter Weise, um die Fähigkeit von autologen TIL-Zellen (Kohorte 4) und autologen CD4plus-Zell-depletierten TIL-Zellen (Kohortenbehandlung) zu vergleichen, Tumorregression, progressionsfreies Überleben und Gesamtüberleben bei Patienten mit metastasierendem Melanom zu vermitteln.
• Bewerten Sie die Toxizität dieser Behandlungsschemata.
• Bestimmen Sie die Repopulationsrate der jungen TIL-Zellen bei behandelten Patienten und etablieren Sie in vitro-Korrelate von TIL-Kulturen, die die objektive Reaktion und In-vivo-Persistenz vermitteln.

Teilnahmeberechtigung:

Patienten, die 18 Jahre oder älter sind, müssen Folgendes haben:

• metastatisches Melanom;
• Normalwerte für grundlegende Laborwerte.

Patienten haben möglicherweise nicht:

• Erhaltene vorherige Zelltransfertherapie, die nicht-myeloablative oder ablative Chemotherapie umfasste;
• Gleichzeitige schwere medizinische Erkrankungen;
• Jede Form von Immunschwäche;
• Schwere Überempfindlichkeit gegen einen der in dieser Studie verwendeten Wirkstoffe;
• Kontraindikationen für die Verabreichung von hochdosiertem IL-2.

Design:

• Die Patienten werden einer Resektion unterzogen, um einen Tumor für die Erzeugung autologer TIL-Kulturen zu erhalten.

• Kohorte 1:

  • Alle Patienten erhalten an den Tagen -7 und -6 eine nicht-myeloablative Lymphozytendepletion mit Cyclophosphamid (60 mg/kg/Tag IV) und an den Tagen -5 bis -1 Fludarabin (25 mg/m^2/Tag IV). .
  • Am Tag 0 erhalten die Patienten die Infusion von autologem TIL und beginnen dann mit einer hochdosierten Aldesleukin-Therapie (720.000 IE/kg i.v. alle 8 Stunden für bis zu 15 Dosen).
  • Das klinische und immunologische Ansprechen wird etwa 4-6 Wochen nach der TIL-Infusion bewertet.
  • Unter Verwendung eines kleinen optimalen zweistufigen Phase-II-Designs werden zunächst 21 Patienten aufgenommen, und wenn zwei oder mehr der ersten 21 Patienten ein klinisches Ansprechen zeigen (partielles Ansprechen (PR) oder vollständiges Ansprechen (CR)), wird dies fortgesetzt 41 Patienten mit einem Ziel von 20 % für ein objektives Ansprechen. Kohorte 1 wird mit Änderung D geschlossen.
• Kohorte 2 wird mit Änderung D eingeleitet, wobei CD4+-Zellen unter Verwendung des Miltenyi-Clinimacs-Apparats aus den Kulturen eliminiert werden, bevor die schnelle Expansion der jungen TIL-Zellen durchgeführt wird. Patienten in Kohorte 2 erhalten CD4+-Zell-depletierte junge unselektierte TIL. Die Patienten werden auch hochdosiertes IL-2 nach einer nicht-myeloablativen, aber lymphodepletierenden Chemotherapie erhalten, wie oben für Kohorte 1 beschrieben. Das klinische und immunologische Ansprechen wird etwa 4–6 Wochen nach der TIL-Infusion bewertet. Unter Verwendung eines kleinen optimalen zweistufigen Phase-II-Designs werden zunächst 18 Patienten aufgenommen, und wenn drei oder mehr der ersten 18 Patienten ein klinisches Ansprechen (PR oder CR) zeigen, wird die Rekrutierung auf 35 Patienten fortgesetzt, wobei ein Ziel von 30 % angestrebt wird für eine objektive Antwort. Mit dem Beginn von Kohorte 3 mit Änderung H werden Patienten nur dann in Kohorte 2 aufgenommen, wenn sie aufgrund einer vorherigen Bestrahlung oder der Unfähigkeit, Cluster of Differentiation 34 (CD34+)-Zellen zu mobilisieren, nicht für eine Behandlung mit 600 cGy in Frage kommen. Ebenfalls zu diesem Zeitpunkt wird die Rückstellung auf insgesamt 50 Patienten in Kohorte 2 ausgeweitet. Kohorte 2 wird mit Änderung K geschlossen.
• Kohorte 3 wird mit Änderung H begonnen, wobei die Patienten eine präparative Radiochemotherapie zur Lymphozytendepletion erhalten, die aus Cyclophosphamid, Fludarabin und einer Ganzkörperbestrahlung mit 600 cGy besteht, gefolgt von einer intravenösen Infusion von autologem CD4+-Zell-depletiertem jungem TIL plus IV hochdosiertem IL-2. Das klinische und immunologische Ansprechen wird etwa 4-6 Wochen nach der TIL-Infusion bewertet. Unter Verwendung eines kleinen optimalen zweistufigen Phase-II-Designs werden zunächst 26 Patienten aufgenommen, und wenn einer oder mehrere der ersten 26 Patienten ein vollständiges Ansprechen (CR) zeigen, wird die Rekrutierung auf 51 Patienten fortgesetzt, wobei ein Ziel von 10 % für vollständig angestrebt wird Antwort. Kohorte 3 wird mit Änderung K geschlossen.

Prospektive Randomisierung zwischen den Kohorten 4 und 5:

• Kohorte 4:

  • Alle Patienten erhalten an den Tagen -7 und -6 eine nicht-myeloablative Lymphozytendepletion mit Cyclophosphamid (60 mg/kg/Tag IV) und an den Tagen -5 bis -1 Fludarabin (25 mg/m^2/Tag IV). .
  • Am Tag 0 erhalten die Patienten die Infusion von autologem TIL und beginnen dann mit einer hochdosierten Aldesleukin-Therapie (720.000 IE/kg i.v. alle 8 Stunden für bis zu 15 Dosen).
  • Das klinische und immunologische Ansprechen wird etwa 4-6 Wochen nach der TIL-Infusion bewertet.

• Kohorte 5

  • Alle Patienten erhalten an den Tagen -7 und -6 eine nicht-myeloablative Lymphozytendepletion mit Cyclophosphamid (60 mg/kg/Tag IV) und an den Tagen -5 bis -1 Fludarabin (25 mg/m^2/Tag IV). .
  • Am Tag 0 erhalten die Patienten die Infusion von autologem CD4+-abgereichertem TIL und beginnen dann mit der Hochdosis Aldesleukin (720.000 IE/kg i.v. alle 8 Stunden für bis zu 15 Dosen).
  • Das klinische und immunologische Ansprechen wird etwa 4-6 Wochen nach der TIL-Infusion bewertet.