Fase II-studie van op korte termijn gekweekte autologe lymfocyten tegen tumoren na lymfocytenafbrekende chemotherapie bij gemetastaseerd melanoom

Achtergrond:

• Tumorinfiltrerende lymfocyten (TIL) kunnen de regressie van omvangrijk gemetastaseerd melanoom mediëren wanneer het wordt toegediend aan een autologe patiënt met een hoge dosis (HD) IL-2 na een niet-myeloablatieve (NMA) maar lymfodepleterende chemotherapievoorbereidingsbehandeling.
• Klinische onderzoeken en preklinische diermodellen hebben aangetoond dat een kortere kweektijd, langere telomeren en een minder gedifferentieerd lymfocytenfenotype geassocieerd zijn met TIL die in staat zijn om objectieve klinische reacties te mediëren en langdurig in de gastheer aan te houden.
• Eerdere methoden voor het genereren van TIL vereisen screening op antitumorspecificiteit met behulp van productie van gamma-interferon (IFN) door de TIL. In-vitroscreening is echter afhankelijk van autologe tumorreagentia die vaak niet beschikbaar zijn; en gamma-IFN-afgifte in vitro is mogelijk niet de beste correlatie met in vivo werkzaamheid. Bovendien vereist deze methode lange in vitro kweektijden (44 dagen), en vermindert daarom de klonale heterogeniteit van TIL-culturen, en resulteert in TIL-culturen met kortere telomeerlengtes en fenotypes die scheef zijn naar een meer gedifferentieerd fenotype.
• In preklinische experimenten van de Surgery Branch evalueerden we een methode voor het snel genereren van jonge TIL uit melanoomtumoren met optimale fenotypische kenmerken.

Doelstellingen:

• In cohort 1, om het vermogen te bepalen van autologe TIL-cellen die na minimale in vitro-kweek in combinatie met hoge dosis aldesleukine (IL-2) zijn toegediend na een niet-myeloablatief preparatief regime voor lymfodepletie om tumorregressie te mediëren bij patiënten met gemetastaseerd melanoom.
• In cohort 2, om het vermogen te bepalen van autologe cluster van differentiatie 4 (CD4+) cel-verarmde TIL-cellen geïnfundeerd na minimale in vitro kweek in combinatie met hoge dosis aldesleukine (IL-2) na een niet-myeloablatief lymfodepletie preparatief regime om tumorregressie te mediëren bij patiënten met gemetastaseerd melanoom.
• In cohort 3, om het vermogen te bepalen van TIL-cellen met autologe CD4+-cellen die na minimale in vitro-kweek in combinatie met een hoge dosis aldesleukine na chemoradiatie voor lymfoïde-depletie zijn geïnfundeerd om volledige tumorregressie te mediëren bij patiënten met gemetastaseerd melanoom.
• Op een prospectieve gerandomiseerde manier, om het vermogen van autologe TIL-cellen (cohort 4) en autologe CD4plus-cel-verarmde TIL-cellen (cohortregime) te vergelijken om tumorregressie, progressievrije overleving en algehele overleving bij patiënten met gemetastaseerd melanoom te bemiddelen.
• Evalueer de toxiciteit van deze behandelingsregimes.
• Bepaal de snelheid van herbevolking van de jonge TIL-cellen bij behandelde patiënten en stel in vitro correlaten van TIL-culturen vast die objectieve respons en in vivo persistentie mediëren.

Geschiktheid:

Patiënten van 18 jaar of ouder moeten:

• Gemetastaseerd melanoom;
• Normale waarden voor basis laboratoriumwaarden.

Patiënten hebben mogelijk niet:

• Eerdere celoverdrachtstherapie ontvangen die niet-myeloablatieve of ablatieve chemotherapie omvatte;
• Gelijktijdige ernstige medische ziekten;
• Elke vorm van immunodeficiëntie;
• Ernstige overgevoeligheid voor een van de middelen die in dit onderzoek zijn gebruikt;
• Contra-indicaties voor toediening van hoge doses IL-2.

Ontwerp:

• Patiënten zullen resectie ondergaan om een ​​tumor te verkrijgen voor het genereren van autologe TIL-culturen.

• Cohort 1:

  • Alle patiënten krijgen een niet-myeloablatief lymfocyten depletie preparatief regime van cyclofosfamide (60 mg/kg/dag IV) op dag -7 en -6 en fludarabine (25 mg/m^2/dag IV) op dag -5 tot -1 .
  • Op dag 0 krijgen de patiënten de infusie van autologe TIL en beginnen ze met een hoge dosis aldesleukine (720.000 IE/kg IV elke 8 uur gedurende maximaal 15 doses).
  • De klinische en immunologische respons zal ongeveer 4-6 weken na TIL-infusie worden geëvalueerd.
  • Met behulp van een kleine optimale fase II-opzet in twee fasen zullen in eerste instantie 21 patiënten worden ingeschreven en als twee of meer van de eerste 21 patiënten een klinische respons hebben (partiële respons (PR) of volledige respons (CR)), zal de opbouw doorgaan naar 41 patiënten, gericht op een doelstelling van 20% voor objectieve respons. Cohort 1 wordt afgesloten met amendement D.
• Cohort 2 wordt gestart met amendement D, waarbij CD4+-cellen uit de culturen worden verwijderd met behulp van het Miltenyi Clinimacs-apparaat, voordat de snelle expansie van de jonge TIL-cellen wordt uitgevoerd. Patiënten in cohort 2 krijgen CD4+-celdepletie jonge niet-geselecteerde TIL. Patiënten zullen ook een hoge dosis IL-2 krijgen na niet-myeloablatieve maar lymfodepleterende chemotherapie, zoals hierboven beschreven voor cohort 1. Klinische en immunologische respons zal ongeveer 4-6 weken na TIL-infusie worden beoordeeld. Met behulp van een kleine, optimale fase II-opzet in twee fasen, zullen in eerste instantie 18 patiënten worden ingeschreven, en als drie of meer van de eerste 18 patiënten een klinische respons (PR of CR) hebben, wordt de opbouw voortgezet tot 35 patiënten, gericht op een doel van 30% voor een objectieve reactie. Met de start van cohort 3 met wijziging H, worden patiënten alleen toegevoegd aan cohort 2 als ze niet in aanmerking komen voor 600 cGy vanwege eerdere bestraling of onvermogen om cluster van differentiatie 34 (CD34+) cellen te mobiliseren. Ook op dit moment wordt de opbouw uitgebreid naar in totaal 50 patiënten in cohort 2. Cohort 2 wordt afgesloten met amendement K.
• Cohort 3 zal worden gestart met amendement H, waarbij patiënten een chemoradiatie, lymfocytendepletie, preparatief regime krijgen bestaande uit cyclofosfamide, fludarabine en 600 cGy totale lichaamsbestraling gevolgd door intraveneuze infusie van autologe CD4+-celdepletie jonge TIL plus IV hoge dosis IL-2. Klinische en immunologische respons zal ongeveer 4-6 weken na TIL-infusie worden geëvalueerd. Met behulp van een kleine, optimale fase II-opzet in twee fasen zullen in eerste instantie 26 patiënten worden ingeschreven, en als een of meer van de eerste 26 patiënten een complete respons (CR) hebben, zal de opbouw doorgaan naar 51 patiënten, waarbij wordt gestreefd naar een doel van 10% voor volledige respons. antwoord. Cohort 3 wordt afgesloten met amendement K.

Prospectieve randomisatie tussen cohort 4 en 5:

• Cohort 4:

  • Alle patiënten krijgen een niet-myeloablatief lymfocyten depletie preparatief regime van cyclofosfamide (60 mg/kg/dag IV) op dag -7 en -6 en fludarabine (25 mg/m^2/dag IV) op dag -5 tot -1 .
  • Op dag 0 krijgen de patiënten de infusie van autologe TIL en beginnen ze met een hoge dosis aldesleukine (720.000 IE/kg IV elke 8 uur gedurende maximaal 15 doses).
  • Klinische en immunologische respons zal ongeveer 4-6 weken na TIL-infusie worden geëvalueerd.

• Cohort 5

  • Alle patiënten krijgen een niet-myeloablatief lymfocyten depletie preparatief regime van cyclofosfamide (60 mg/kg/dag IV) op dag -7 en -6 en fludarabine (25 mg/m^2/dag IV) op dag -5 tot -1 .
  • Op dag 0 krijgen de patiënten het infuus van autologe TIL met CD4+-depletie en beginnen ze met een hoge dosis aldesleukine (720.000 IE/kg IV elke 8 uur gedurende maximaal 15 doses).
  • Klinische en immunologische respons zal ongeveer 4-6 weken na TIL-infusie worden geëvalueerd.