Um estudo da análise genética de distúrbios cerebrais

A holoprosencefalia (HPE) cobre um espectro quase contínuo de anormalidades da linha média, variando de inconfundível ciclopia com ausência de separação do prosencéfalo a microformas leves, como um único incisivo central.

O objetivo desses estudos é identificar fatores genéticos (codificantes e não codificantes) que contribuem para a patogênese da holoprosencefalia (HPE) ou malformações cerebrais relacionadas. Nossa abordagem envolve estratégias genéticas comuns, incluindo análise mutacional de genes candidatos. Todos os indivíduos com achados clínicos evidentes ou sutis consistentes com o espectro HPE são elegíveis para participar. A análise mutacional de toda a nossa coleção codificada de probandos de HPE (aproximadamente 600 casos) em genes selecionados é o principal método de pesquisa usado para determinar se um determinado gene candidato é comumente mutado em HPE. Esta abordagem refere-se a um(s) gene(s) individual(is) ou elemento(s) genético(s), bem como a painéis de captura direcionados que estudam conjuntos de genes de centenas de genes de desenvolvimento cujo envolvimento no desenvolvimento do cérebro é apoiado pela literatura de pesquisa básica. Pedimos também a inclusão da opção de investigar todo o conjunto de fatores genéticos presentes no DNA ou RNA de pacientes com HPE por meio de uma proposta de alteração nos documentos de consentimento. Sempre que uma variante de sequência é identificada, que não está presente em um conjunto de amostras de controle disponíveis comercialmente, são feitas tentativas para testar o significado funcional dessa alteração na própria proteína ou em sua expressão. As alterações de sequência com forte probabilidade de serem clinicamente significativas serão verificadas em um laboratório aprovado pela CLIA (por exemplo, Muneke lab, para genes selecionados, ou laboratório comercial) às nossas custas, antes que qualquer resultado seja fornecido à família por meio de aconselhamento genético. O DNA dos pais (e raramente o de irmãos) geralmente é obtido ao mesmo tempo em que um probando é registrado. Normalmente, essas amostras são estudadas apenas para realizar estudos familiares limitados, uma vez que uma variante de sequência de potencial significado médico já foi determinada. A participação de parentes consangüíneos diretos é incentivada, uma vez que praticamente todas as mutações ósseas são específicas da família ou de novo. Essas informações familiares são críticas para a determinação de pesquisa de fatores de risco genéticos e aconselhamento genético preciso.

A maioria dos indivíduos inscritos neste estudo continuará sob os cuidados de seu médico local ou conselheiro genético com contato limitado com os investigadores do NIH. Raramente as famílias serão atendidas no NIH CC. Essas visitas envolverão aconselhamento genético presencial de resultados clinicamente significativos, após verificação em um laboratório aprovado pela CLIA. Este não é um protocolo de tratamento. Nossa capacidade empírica de gerar resultados de pesquisa clinicamente significativos é limitada pela extensa heterogeneidade genética e outra etiológica. Portanto, para a maioria dos participantes esta pesquisa não é um estudo diagnóstico.

Modificamos nossos procedimentos para testar todos os novos probandos quanto a mutações nos quatro genes HPE (SHH, ZIC2, SIX3 e TGIF). À medida que novos elementos genéticos que conferem risco para HPE são identificados, pretendemos adicionar testes adicionais a este painel. Nosso laboratório agora está certificado para receber e testar novas amostras de acordo com as diretrizes da CLIA. No entanto, todas as amostras coletadas anteriormente não serão consideradas adequadas para fins de diagnóstico; portanto, uma segunda amostra precisará ser solicitada nesses casos para confirmação do CLIA.