Ensaio controlado randomizado do calendário de vacinação contra o sarampo

Design de estudo:

Este estudo tem dois componentes de design viz.

• Inscrição prospectiva de uma coorte de bebês nascidos a termo; e 3 meses de acompanhamento nas idades de 3 meses, 6 meses, 9 meses e 12 meses.
• Randomização aos 6 meses de idade para três grupos de intervenção, a saber (i) vacinação contra o sarampo aos 9 meses de idade (conforme prática atual), (ii) vacinação aos 7,5 meses e 9 meses de idade e (iii) vacinação aos 6 meses e 9 meses de idade.

Métodos: Inscrições:

As gestantes que aguardam o parto no Departamento de Obstetrícia e Ginecologia serão avaliadas quanto à elegibilidade (conforme os critérios de inclusão e exclusão). As mulheres cujos bebês provavelmente serão elegíveis para participação no estudo serão explicadas sobre a natureza e o objetivo do estudo antes do parto. Eles serão informados sobre o protocolo do estudo e convidados a participar. Após o parto, as mães e seus respectivos recém-nascidos serão inscritos com consentimento informado por escrito.

Procedimento:

Uma breve entrevista será realizada para determinar a história de doença exantemática sofrida no passado pela mãe, história familiar de doença semelhante e vacinas recebidas por ela.

No momento do parto, aproximadamente 1 ml de sangue do cordão umbilical do bebê será coletado em um recipiente plástico estéril com tampa de rosca, rotulado e transportado para o laboratório. Da mesma forma, 1 ml de sangue venoso será obtido da mãe em um recipiente de plástico estéril com tampa de rosca, rotulado e transportado para o laboratório. O soro será separado dessas amostras por centrifugação e congelado a menos 20 graus C até a análise.

As crianças serão acompanhadas e submetidas a punção venosa sob precauções assépticas para retirar 0,8-1,0 ml de sangue em cinco visitas adicionais, viz. 3 meses±2 semanas [correspondente a uma visita para 2ª/3ª dose de vacina contra difteria-coqueluche-tétano (DPT) e vacina oral viva contra poliovírus (OPV)], 6 meses±2 semanas (correspondente a visita para 3ª dose de hepatite B aos 6 meses de idade), 7,5 meses ± 2 semanas, aos 9 meses ± 2 semanas (correspondente à visita para vacina contra o sarampo conforme esquema atual) e aos 12 ± 2 semanas meses de idade (correspondente à visita para acompanhamento de rotina acima).

Durante a visita de acompanhamento aos 6 meses de idade, as crianças serão randomizadas (conforme descrito abaixo) para um dos três grupos, a saber: Grupo A: vacinação aos 6 meses e 9 meses de idade; Grupo B: vacinação aos 7,5 meses e 9 meses de idade; e Grupo C: vacinação aos 9 meses de idade (prática atual).

Geração da sequência aleatória: Será utilizado um programa de computador para gerar uma sequência numérica aleatória para alocar os participantes em três grupos na proporção de 1:1:1, conforme os Grupos descritos acima.

Ocultação de alocação: A alocação de cada bebê será colocada em envelopes selados e opacos. Para cada criança que se apresente aos seis meses de idade, um envelope será marcado com o nome da criança e então aberto. Nesta fase, os envelopes lacrados conterão uma das duas opções: (i) Vacinação aos 6 meses ou (ii) Sem vacinação aos 6 meses. Aqueles que receberem o primeiro seguirão o protocolo para o Grupo A descrito abaixo. Aqueles que receberem este último serão acompanhados aos 7,5 meses de idade; momento em que um segundo conjunto de envelopes lacrados será acessado. Um envelope será marcado com o nome da criança e então aberto. Nesta fase, os envelopes lacrados conterão uma das duas opções: (i) Vacinação aos 7,5 meses ou (ii) Vacinação aos 9 meses. Aqueles que receberem o primeiro seguirão o protocolo do Grupo B descrito abaixo; e os que receberem seguirão o protocolo do Grupo C descrito a seguir.

Cegueira: Neste projeto de estudo randomizado, nenhuma tentativa será feita para cegar os bebês sendo randomizados, ou seus pais (a fim de evitar injeções desnecessárias por meio de um projeto duplo simulado). O investigador envolvido na randomização dos bebês também não será cegado. No entanto, o pessoal do laboratório que realiza as medições do nível de anticorpos será ocultado enviando as amostras com apenas um código de quatro dígitos que não revela a intervenção recebida. As amostras durante qualquer visita serão retiradas antes da administração da(s) vacina(s).

A vacina contra o sarampo será administrada de acordo com o protocolo descrito acima por pessoal treinado na Sala de Vacinação do Centro Avançado de Pediatria. Uma dose padrão da preparação disponível será administrada na dosagem de 0,5 ml por via subcutânea. A precaução pós-vacinação padrão, ou seja, a observação do bebê por 30 minutos após a vacinação, será feita para observar qualquer evento adverso.

Protocolo clínico:

Em cada visita, o histórico será obtido para detectar características clínicas compatíveis com sarampo no bebê ou em qualquer outro membro da família no contato domiciliar. Isso inclui:

Qualquer pessoa em quem um médico suspeite de infecção por sarampo, ou Qualquer pessoa com febre e erupção cutânea maculopapular (ou seja, não vesicular) e tosse, coriza (i.e. corrimento nasal) ou conjuntivite (i.e. olhos vermelhos).

Além disso, o investigador fará uma ligação telefônica mensal para a família dos bebês inscritos solicitando um histórico específico compatível com a definição de caso de sarampo da Organização Mundial da Saúde (OMS), no bebê ou em qualquer membro da família. Caso tal histórico seja obtido, a criança e o indivíduo afetado serão convidados para exame clínico e uma amostra de sangue será obtida. O soro será separado conforme descrito e o anticorpo anti-sarampo imunoglobulina M (IgM) será medido usando kits ELISA disponíveis comercialmente, conforme descrito abaixo.

Após cada vacinação, os pais das crianças vacinadas serão solicitados a preencher um Diário por três dias, contendo um registro diário de (i) choro excessivo, (ii) má alimentação, (iii) febre, (iv) vermelhidão no local da injeção, ( v) inchaço no local da injeção (vi) sensibilidade/dor aparente no local da injeção e (vii) qualquer outro comportamento/aparência incomum no bebê.

Processamento laboratorial:

Amostras de sangue coagulado serão centrifugadas a 3000 rpm por 15 minutos para obter soro que será congelado a -20 graus Celsius até ser testado. O soro será processado em lotes de 30-40 e os anticorpos IgG específicos do sarampo serão quantificados por micro-ELISA (ensaio imunossorvente enzimático) usando kits IgG quantitativos contra o sarampo disponíveis comercialmente de alta sensibilidade (98-100%) e especificidade (100%) . O ensaio de anticorpos IgM será feito para confirmar o diagnóstico de sarampo apenas nas crianças com suspeita de sarampo; usando kits quantitativos de IgG de sarampo comercialmente disponíveis de alta sensibilidade (98-100%) e especificidade (100%). Os soros dos sujeitos, calibradores, controles positivos e negativos serão diluídos em diluentes de soro e o teste será realizado conforme recomendado pelos fabricantes. O valor da densidade óptica obtido para cada amostra será convertido em título de anticorpos contra o sarampo em unidades/ml com a ajuda dos valores do calibrador em um papel gráfico de log padrão e essas unidades/ml serão então interpretadas como Unidades Internacionais/ml seguindo a recomendação no kit .