Avaliação do efeito do concentrado de aspirado de medula óssea nas propriedades do osso mandibular distraído

Material e métodos:

Um estudo prospectivo de caso-controle foi conduzido em pacientes que necessitavam de distração osteogênica mandibular para avaliar o efeito do BMAC na qualidade óssea distraída. A avaliação da quantidade e qualidade do osso recém-formado foi feita usando uma CBCT que foi feita após a remoção do distrator como parte do acompanhamento de rotina (de acordo com as diretrizes europeias para a exposição à radiação ionizante) e a avaliação da qualidade do osso foi avaliada por dois examinadores para fornecer confiabilidade entre examinadores.

A fim de avaliar o efeito do BMAC na maturação óssea e possibilidade de remoção precoce do distrator; o que não foi viável no estudo clínico devido a questões éticas. A flexão mecânica de três pontos foi aplicada na mandíbula distraída após 30 dias após a distração para avaliar a cicatrização óssea e a resistência mecânica do osso distraído. Além da avaliação histológica e radiográfica.

Pacientes e métodos:

Agrupamento de pacientes e técnica anestésica:

Estudo prospectivo de caso-controle foi conduzido em pacientes que necessitavam de distração osteogênica mandibular. A pesquisa foi revisada pelo comitê de ética do corpo docente dos autores. Os pacientes foram alocados aleatoriamente em um dos dois grupos (para evitar viés, cada paciente tinha um número, e esse número foi escolhido pelos examinadores (semelhante a um baralho de cartas embaralhadas) para atribuir o paciente ao seu grupo específico. Grupo controle (6 pacientes): grupo controle no qual a distração ocorreu a uma taxa de 1,5 mm/dia ​​até obter o comprimento planejado e apenas solução salina foi injetada no defeito; com base na suposição de que não tem efeito na cicatrização óssea. Grupo de estudo no qual a distração ocorreu a uma taxa de 1,5 mm/dia ​​até que o comprimento planejado fosse obtido. O osso distraído foi aprimorado pela injeção de concentrado de aspirado de medula óssea (BMAC).

A anestesia foi induzida com propofol IV (Aspen, Irlanda), 1,5-2 mg/kg, fentanil (ADVANZ Pharma, Reino Unido) 1,3 μ/kg e succinilcolina (Aspen, Irlanda) 1mg/kg para facilitar a intubação nasotraqueal usando tubo blindado. A anestesia foi mantida com isoflurano (AbbVie Ltd, Reino Unido) em oxigênio e atracúrio (Accord-UK Ltd, Reino Unido) na dose de 0,3-0,6 mg/kg.

Preparação e colheita de BMAC:

O BMAC foi colhido usando o protocolo Ficoll. A medula óssea foi coletada na crista ilíaca usando trocarte de medula óssea. Solução salina tamponada com fosfato (PBS) foi adicionada à medula óssea aspirada em uma proporção de 4:1. A medula óssea diluída foi titulada em Ficoll 400 (BIOCOLL; Biochrom GmbH, Alemanha) e a solução foi centrifugada a uma taxa de 2.000 rpm por 20 minutos. O pellet da camada leucocitária, que é rico em BMMSCs, foi coletado com uma pipeta. O BMAC Aspirado rico em MSCs foi adicionado aos frascos de cultura de tecidos para consolidação até o dia 10 em DMEM (Thermo Fisher Scientific, Estados Unidos) e concentrado de penicilina de alta estreptomicina 10.000 U/mL (Sigma-Aldrich, Estados Unidos); para ser armazenado a -80 0C até a injeção no dia 10 de consolidação.

Procedimento cirúrgico Uma incisão intraoal foi realizada semelhante à osteotomia sagital bilateral na área da área do último molar para expor o corpo mandibular. Um piezótomo foi usado com irrigação salina abundante; realizar a corticotomia para evitar lesão nervosa. A osteotomia foi completada com cinzel e marreta.

O distrator bidirecional foi fixado com quatro pinos orais extras 2.0. A ativação e desativação do teste foram realizadas na sala de operação para garantir a conclusão da osteotomia antes do fechamento da ferida. Uma boca antibacteriana tópica foi usada durante todo o período de distração e consolidação para diminuir o risco de infecção Fase pós-operatória e protocolo de distração Uma boca antibacteriana tópica foi usada durante todo o período de distração e consolidação para diminuir o risco de infecção. Amoxicilina 875mg. /ácido clavulânico 125 mg (Augmentin, GSK, Reino Unido) cápsulas duas vezes ao dia por cinco dias para diminuir o risco de infecção. Ibuprofeno 600 mg (Mylan Products Limited, Reino Unido) Comprimidos duas vezes ao dia por três dias para controlar a dor.

A fase de distração foi realizada após 5 dias de latência. A taxa foi de 1,5 mm por dia até que a posição planejada do queixo fosse alcançada. No grupo de estudo, após 10 dias de distração, o BMAC preparado (o número médio de células foi de 3 milhões) foi injetado no intervalo de distração usando uma agulha de calibre 18 no dia 10 da consolidação. O grupo controle não teve realce e foi considerado um controle negativo. Os grupos de estudo e controle passaram por 6 meses de consolidação, depois os pinos distratores foram removidos e a CBCT foi realizada para avaliar o procedimento de distração. Além da avaliação CBCT dos resultados da distração, a maturação óssea distraída foi avaliada.

Métodos de avaliação Usando os arquivos DICOM CBCT (iCAT, EUA) a avaliação da densidade óssea foi realizada (a um valor de exposição fixo 84 Kv, 4 mA e 12 seg) para avaliar a qualidade óssea após a distração. A avaliação foi feita em três pontos localizados entre as marcas dos pinos. A primeira avaliação foi feita no centro exato e outras duas leituras foram feitas 2mm antes e 2mm após a leitura central na TC e a média foi calculada. Dois examinadores fizeram avaliação para evitar viés e a confiabilidade entre examinadores foi medida para avaliar a precisão das medições