Evaluering af virkningen af ​​knoglemarvsaspiratkoncentrat på distraherede mandibularknogleegenskaber

Materialer og metoder:

Et prospektivt case-kontrolforsøg blev udført på patienter, der havde behov for mandibulær distraktion osteogenese for at vurdere effekten af ​​BMAC på distraheret knoglekvalitet. Evaluering af nydannet knoglemængde og -kvalitet blev foretaget ved hjælp af en CBCT, som blev udført efter distraktorfjernelse som en del af rutinemæssig opfølgning (i overensstemmelse med europæiske retningslinjer for eksponering for ioniserende stråling), og evaluering af knoglekvaliteten blev vurderet af to eksaminatorer at give intereksaminator-pålidelighed.

For at evaluere effekten af ​​BMAC på knoglemodning og mulighed for tidlig fjernelse af distraktoren; hvilket ikke var muligt i det kliniske studie på grund af de etiske betænkeligheder. Mekanisk trepunktsbøjning blev påført på distraheret mandible efter 30 dage efter distraktion for at evaluere knogleheling og mekanisk styrke af distraheret knogle. Ud over histologisk og radiografisk vurdering.

Patienter og metoder:

Patientgruppering og anæstesiteknik:

Prospektiv case-kontrol undersøgelse blev udført på patienter, der havde behov for mandibulær distraktion osteogenese. Forskningen blev gennemgået af den etiske komité på forfatterfakultetet. Patienterne blev tilfældigt fordelt i en af ​​de to grupper (For at undgå bias havde hver patient et nummer, og dette nummer blev udvalgt af eksaminatorerne (svarende til et spil med blandede kort) for at tildele patienten til hans/hendes specifikke gruppe. Kontrolgruppe (6 patienter): kontrolgruppe, hvor distraktion fandt sted med en hastighed på 1,5 mm/dag, indtil den planlagte længde blev opnået, og kun saltvand blev injiceret i defekt; ud fra den antagelse, at det ikke har nogen effekt på knogleheling. Undersøgelsesgruppe, hvor distraktion fandt sted med en hastighed på 1,5 mm/dag, indtil den planlagte længde blev opnået. Distraheret knogle blev forstærket ved injektion af Bone Marrow Aspirate Concentrate (BMAC).

Anæstesi blev induceret med IV propofol (Aspen, Irland), 1,5-2 mg/kg, fentanyl (ADVANZ Pharma, Storbritannien) 1,3 μ/kg og succinylcholin (Aspen, Irland) 1 mg/kg for at lette nasotracheal intubation ved hjælp af pansret rør. Anæstesi blev opretholdt med isofluran (AbbVie Ltd, Storbritannien) i oxygen og atracurium (Accord-UK Ltd, Storbritannien) i en dosis på 0,3-0,6 mg/kg.

BMAC klargøring og høst:

BMAC blev høstet under anvendelse af Ficoll-protokollen. Knoglemarv blev opsamlet hoftekammen under anvendelse af knoglemarvstrokar. Phosphatbufret saltvand (PBS) blev tilsat til den aspirerede knoglemarv i et forhold på 4:1. Den fortyndede knoglemarv blev titreret over Ficoll 400 (BIOCOLL; Biochrom GmbH, Tyskland), og opløsningen blev centrifugeret ved en hastighed på 2.000 rpm i 20 minutter. Den brune lag-pellet, som er rig på BMMSC'er, blev opsamlet ved hjælp af en pipette. Den aspirerede BMAC, der var rig på MSC'er, blev tilsat til vævskulturkolber til konsolidering indtil dag 10 i DMEM (Thermo Fisher Scientific, USA) og højt streptomycin-penicillinkoncentrat 10.000 U/mL (Sigma-Aldrich, USA); skal opbevares ved -80 °C indtil injektion på dag 10 konsolidering.

Kirurgisk procedure Der blev udført et intraoalt snit svarende til bilateral sagittal split-osteotomi i det sidste molare område for at blotlægge mandibularlegemet. En piezotom blev brugt med rigelig saltvandsvanding; at udføre kortikotomien for at undgå nerveskade. Osteotomien blev afsluttet med en mejsel og en hammer.

Den tovejs distraktor blev fikseret ved hjælp af fire 2,0 ekstra orale stifter. Forsøgsaktivering og -deaktivering blev udført i operationsstuen for at være sikker på osteotomiafslutning før sårlukning. En topisk antibakteriel mund blev brugt gennem hele distraktions- og konsolideringsperioden for at mindske risikoen for infektion Postoperativ fase og distraktionsprotokol En topisk antibakteriel mund blev brugt gennem hele distraktions- og konsolideringsperioden for at mindske risikoen for infektion. Amoxicillin 875 mg. /clavulansyre 125 mg (Augmentin, GSK, Storbritannien) kapsler to gange dagligt i fem dage for at mindske risikoen for infektion. Ibuprofen 600 mg (Mylan Products Limited, Storbritannien) Tabletter to gange dagligt i tre dage for at kontrollere smerte.

Distraktionsfasen blev udført efter 5 dages latens. Frekvensen var 1,5 mm pr. dag, indtil den planlagte hageposition blev opnået. I undersøgelsesgruppen, efter 10 dages distraktion, blev den forberedte BMAC (det gennemsnitlige antal celler var 3 millioner) injiceret i distraktionsgabet ved hjælp af en 18-gauge nål på dag 10 af konsolideringen. Kontrolgruppen havde ingen forbedring og blev betragtet som en negativ kontrol. Undersøgelses- og kontrolgrupperne gennemgik 6 måneders konsolidering, hvorefter distraktorstifterne blev fjernet, og CBCT blev udført for at evaluere distraktionsproceduren. Ud over CBCT-evalueringen af ​​distraktionsresultater blev den distraherede knoglemodning evalueret.

Vurderingsmetoder Ved hjælp af CBCT (iCAT, USA) blev DICOM-filernes evaluering af knogletæthed udført (ved en fast eksponeringsværdi 84 Kv, 4 mA og 12 Sec ) for at evaluere knoglekvaliteten efter distraktion. Evaluering blev udført på tre punkter placeret mellem stifterne. Den første evaluering blev udført i nøjagtigt centrum, og to andre aflæsninger blev udført 2 mm før og 2 mm efter den centrale aflæsning i CT, og gennemsnittet blev beregnet. To eksaminatorer foretog evaluering for at undgå bias, og intereksaminatorpålidelighed blev målt for at vurdere nøjagtigheden af ​​målingerne