Оценка влияния концентрата аспирата костного мозга на свойства отвлеченной кости нижней челюсти

Материал и методы:

Было проведено проспективное исследование случай-контроль на пациентах, нуждающихся в дистракционном остеогенезе нижней челюсти, для оценки влияния BMAC на качество дистракционной кости. Оценка количества и качества новообразованной кости проводилась с помощью КЛКТ, которая проводилась после удаления дистрактора в рамках планового наблюдения (в соответствии с европейскими рекомендациями по воздействию ионизирующего излучения), а оценка качества кости проводилась двумя исследователями. обеспечить межэкзаменаторскую надежность.

Для оценки влияния БМАЦ на созревание кости и возможность раннего удаления дистрактора; что было невозможно в клиническом исследовании из-за этических соображений. Через 30 дней после дистракции к отвлеченной нижней челюсти применяли механическое трехточечное сгибание для оценки заживления кости и механической прочности оторванной кости. Помимо гистологической и рентгенологической оценки.

Пациенты и методы:

Группировка пациентов и техника анестезии:

Проспективное исследование случай-контроль было проведено у пациентов, нуждающихся в дистракционном остеогенезе нижней челюсти. Исследование было рассмотрено этическим комитетом факультета-автора. Пациенты были случайным образом распределены в одну из двух групп (во избежание систематической ошибки у каждого пациента был номер, и этот номер выбирался исследователями (аналогично колоде перетасованных карт), чтобы отнести пациента к его/ее конкретной группе. Контрольная группа (6 пациентов): контрольная группа, в которой производилась дистракция со скоростью 1,5 мм/сутки до получения запланированной длины и в дефект вводился только физиологический раствор; на основании предположения, что он не влияет на заживление кости. Исследуемая группа, в которой дистракция проводилась со скоростью 1,5 мм/сутки до получения запланированной длины. Растянутая кость была усилена инъекцией концентрата аспирата костного мозга (BMAC).

Анестезию вызывали внутривенным введением пропофола (Аспен, Ирландия), 1,5–2 мг/кг, фентанила (АДВАНЗ Фарма, Великобритания) 1,3 мкг/кг и сукцинилхолина (Аспен, Ирландия) 1 мг/кг для облегчения назотрахеальной интубации с использованием армированной трубки. Анестезию поддерживали изофлураном (AbbVie Ltd, Великобритания) в кислороде и атракурием (Accord-UK Ltd, Великобритания) в дозе 0,3-0,6 мг/кг.

Подготовка и сбор БМАК:

BMAC собирали с использованием протокола Ficoll. Костный мозг собирали из гребня подвздошной кости с помощью костномозгового троакара. К аспирированному костному мозгу добавляли фосфатно-солевой буфер (PBS) в соотношении 4:1. Разведенный костный мозг титровали фиколлом 400 (BIOCOLL; Biochrom GmbH, Германия) и раствор центрифугировали со скоростью 2000 об/мин в течение 20 мин. Осадок лейкоцитарного слоя, богатый BMMSC, собирали с помощью пипетки. Аспирированный BMAC, богатый МСК, добавляли в колбы для тканевых культур для консолидации до 10-го дня в DMEM (Thermo Fisher Scientific, США) и концентрате с высоким содержанием стрептомицина-пенициллина 10000 ЕД/мл (Sigma-Aldrich, США); хранить при температуре -80 0С до инъекции на 10-й день консолидации.

Хирургическая процедура Внутриротовой разрез был выполнен аналогично билатеральной сагиттальной остеотомии в области последнего моляра, чтобы обнажить тело нижней челюсти. Использовался пьезотом с обильной промывкой физиологическим раствором; выполнить кортикотомию, чтобы избежать повреждения нерва. Остеотомия выполнялась с помощью долота и молотка.

Двунаправленный дистрактор фиксировали четырьмя дополнительными оральными штифтами 2,0 мм. Пробную активацию и дезактивацию проводили в операционной, чтобы убедиться в завершении остеотомии до закрытия раны. В течение всего периода дистракции и консолидации для снижения риска инфицирования использовали местный антибактериальный рот в течение всего периода дистракции и консолидации. Послеоперационная фаза и протокол дистракции В течение всего периода дистракции и консолидации использовали местный антибактериальный рот для снижения риска инфекции. Амоксициллин 875 мг. /клавулановая кислота 125 мг (Augmentin, GSK, United Kingdom) капсулы два раза в день в течение пяти дней для снижения риска инфекции. Ибупрофен 600 мг (Mylan Products Limited, Соединенное Королевство) Таблетки два раза в день в течение трех дней для купирования боли.

Фазу дистракции проводили после 5-дневного латентного периода. Скорость составляла 1,5 мм в сутки до достижения запланированного положения подбородка. В основной группе через 10 дней дистракции подготовленные ВМАЦ (среднее количество клеток 3 млн) вводили в дистракционную щель с помощью иглы 18G на 10-е сутки консолидации. Контрольная группа не имела усиления и рассматривалась как отрицательный контроль. Исследуемая и контрольная группы подвергались консолидации в течение 6 месяцев после того, как дистракторные штифты были удалены, и была выполнена КЛКТ для оценки процедуры дистракции. В дополнение к КЛКТ-оценке результатов дистракции оценивали созревание дистрагированной кости.

Методы оценки С использованием файлов DICOM КЛКТ (iCAT, США) была проведена оценка плотности кости (при фиксированном значении экспозиции 84 кВ, 4 мА и 12 с) для оценки качества кости после дистракции. Оценка производилась в трех точках, расположенных между отметками штифтов. Первая оценка была сделана точно в центре, а два других показания были сделаны на 2 мм до и на 2 мм после центрального показания в КТ, и было рассчитано среднее значение. Два эксперта проводили оценку, чтобы избежать предвзятости, а межэкспертная надежность измерялась для оценки точности измерений.