Hodnocení účinku koncentrátu aspirátu kostní dřeně na vlastnosti distraktované mandibulární kosti

Materiály a metody:

Prospektivní případová-kontrolní studie byla provedena u pacientů vyžadujících osteogenezi mandibulární distrakce za účelem posouzení účinku BMAC na kvalitu distrakční kosti. Hodnocení kvantity a kvality nově vytvořené kosti bylo provedeno pomocí CBCT, které bylo provedeno po odstranění distraktoru jako součást rutinního sledování (v souladu s evropskými směrnicemi pro expozici ionizujícímu záření) a hodnocení kvality kosti bylo posuzováno dvěma vyšetřujícími zajistit spolehlivost mezi vyšetřovateli.

Za účelem vyhodnocení účinku BMAC na kostní zrání a možnost časného odstranění distraktoru; což nebylo v klinické studii možné z důvodu etických obav. Mechanické tříbodové ohýbání bylo aplikováno na distraktovanou dolní čelist po 30 dnech po distrakce, aby se vyhodnotilo hojení kosti a mechanická pevnost distrahované kosti. Kromě histologického a radiografického hodnocení.

Pacienti a metody:

Seskupování pacientů a technika anestezie:

Prospektivní případ-kontrolní studie byla provedena u pacientů vyžadujících osteogenezi mandibulární distrakce. Výzkum byl posouzen etickou komisí fakulty autora. Pacienti byli náhodně rozděleni do jedné ze dvou skupin (Aby se předešlo zkreslení, každý pacient měl číslo a toto číslo vybrali zkoušející (podobně jako balíček zamíchaných karet), aby pacienta přiřadili do jeho/její specifické skupiny. Kontrolní skupina (6 pacientů): kontrolní skupina, ve které probíhala distrakce rychlostí 1,5 mm/den až do dosažení plánované délky a do defektu byl injikován pouze fyziologický roztok; na základě předpokladu, že nemá žádný vliv na hojení kostí. Studijní skupina, ve které probíhala distrakce rychlostí 1,5 mm/den, dokud nebyla získána plánovaná délka. Rozptýlená kost byla zesílena injekcí koncentrátu aspirátu kostní dřeně (BMAC).

Anestezie byla indukována IV propofolem (Aspen, Irsko), 1,5-2 mg/kg, fentanylem (ADVANZ Pharma, Spojené království) 1,3 μ/kg a sukcinylcholinem (Aspen, Irsko) 1 mg/kg pro usnadnění nasotracheální intubace pomocí pancéřové trubice. Anestezie byla udržována isofluranem (AbbVie Ltd, Spojené království) v kyslíku a atrakuriu (Accord-UK Ltd, Spojené království) v dávce 0,3-0,6 mg/kg.

Příprava a sklizeň BMAC:

BMAC byl sklizen pomocí protokolu Ficoll. Kostní dřeň byla odebrána z hřebene kyčelního kloubu pomocí trokaru kostní dřeně. Fosfátem pufrovaný fyziologický roztok (PBS) byl přidán do odsáté kostní dřeně v poměru 4:1. Zředěná kostní dřeň byla titrována přes Ficoll 400 (BIOCOLL; Biochrom GmbH, Německo) a roztok byl odstřeďován rychlostí 2000 otáček za minutu po dobu 20 minut. Peleta s leukocyty, která je bohatá na BMMSC, byla odebrána pomocí pipety. Nasátý BMAC bohatý na MSC byl přidán do lahví pro tkáňové kultury pro konsolidaci do 10. dne v DMEM (Thermo Fisher Scientific, Spojené státy americké) a koncentrát streptomycinu a penicilinu 10 000 U/ml (Sigma-Aldrich, Spojené státy americké); skladovat při -80 °C až do injekce v den 10 konsolidace.

Chirurgický postup Intraoální řez byl proveden podobně jako oboustranná sagitální split osteotomie v oblasti poslední moláry, aby se obnažilo tělo dolní čelisti. Piezotom byl použit s hojným zavlažováním solným roztokem; k provedení kortikotomie, aby nedošlo k poranění nervu. Osteotomie byla dokončena pomocí dláta a paličky.

Obousměrný distraktor byl upevněn pomocí čtyř 2,0 extra orálních kolíků. Zkušební aktivace a deaktivace byla provedena na operačním sále, aby bylo zajištěno dokončení osteotomie před uzavřením rány. Lokální antibakteriální ústa byla používána po celou dobu distrakce a konsolidace, aby se snížilo riziko infekce. Pooperační fáze a protokol distrakce Lokální antibakteriální ústa byla používána po celou dobu distrakce a konsolidace, aby se snížilo riziko infekce. Amoxicilin 875 mg. /kyselina klavulanová 125 mg (Augmentin, GSK, Spojené království) kapsle dvakrát denně po dobu pěti dnů ke snížení rizika infekce. Ibuprofen 600 mg (Mylan Products Limited, Spojené království) tablety dvakrát denně po dobu tří dnů k potlačení bolesti.

Distrakční fáze byla provedena po 5 dnech latence. Frekvence byla 1,5 mm za den, dokud nebylo dosaženo plánované polohy brady. Ve studijní skupině byly po 10 dnech distrakce připravené BMAC (průměrný počet buněk 3 miliony) injikovány do distrakční mezery pomocí jehly 18 gauge v 10. dnech konsolidace. Kontrolní skupina neměla žádné zlepšení a byla považována za negativní kontrolu. Studijní a kontrolní skupiny podstoupily 6 měsíců konsolidace, poté byly odstraněny distrakční čepy a byla provedena CBCT k vyhodnocení postupu distrakce. Kromě CBCT hodnocení výsledků distrakce bylo hodnoceno distrakční kostní zrání.

Metody hodnocení Pomocí souborů CBCT (iCAT, USA) DICOM bylo provedeno vyhodnocení kostní denzity (při fixní expoziční hodnotě 84 Kv, 4 mA a 12 s) pro hodnocení kvality kosti po distrakce. Hodnocení bylo provedeno ve třech bodech umístěných mezi kolíky. První vyhodnocení bylo provedeno v přesném středu a další dva odečty byly provedeny 2 mm před a 2 mm po centrálním odečtu v CT a byl vypočten průměr. Dva zkoušející provedli hodnocení, aby se předešlo zkreslení, a byla měřena spolehlivost mezi zkoušejícími, aby se posoudila přesnost měření