- ICH GCP
- Registro de ensaios clínicos dos EUA
- Ensaio Clínico NCT04815811
Estudo das diferenças sexuais em doenças inflamatórias em crianças (SepsiX)
Diferenças sexuais na resposta imune inata foram demonstradas e foram atribuídas principalmente à influência dos esteróides sexuais (1-18). No entanto, dados clínicos recentes revelaram diferenças significativas nos marcadores inflamatórios entre meninos e meninas que sofrem de doenças inflamatórias agudas e crônicas (19-23). Os níveis de hormônios sexuais em crianças pré-púberes são particularmente baixos e insuficientes para explicar as diferenças de gênero observadas em condições inflamatórias de neonatos a idosos, sugerindo a contribuição de outro mecanismo, como a influência de genes situados nos cromossomos sexuais e envolvidos na resposta inflamatória .
O objetivo deste trabalho é avaliar o papel do cromossomo X nas diferenças sexuais em doenças inflamatórias em crianças. A fim de discriminar com mais precisão o papel do cromossomo X em relação aos esteróides sexuais na resposta inflamatória sexo-específica, algumas funções imunes inatas relacionadas a genes ligados ao X serão avaliadas em sangue total de crianças pré-púberes de ambos os sexos, sofrendo de processos inflamatórios agudos como pielonefrite causada por Escherichia coli, pneumonia com derrame pleural causada por Streptococcus pneumoniae ou sepse
Visão geral do estudo
Status
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Muitos estudos demonstraram diferenças imunológicas entre homens e mulheres que sofrem de processos inflamatórios agudos e crônicos. Nos casos de doenças inflamatórias agudas, como a sepse, o sexo feminino apresenta melhor prognóstico em relação ao masculino (1,24-28).
Ao contrário, pior prognóstico para mulheres é observado em doenças inflamatórias crônicas como asma ou fibrose cística (8-10,12,13,29).
A resposta inflamatória dependente do sexo foi atribuída à influência dos hormônios sexuais no sistema imunológico. (2,15-18). No entanto, estudos recentes revelaram diferenças no resultado clínico, mas também em marcadores inflamatórios entre meninos e meninas que sofrem de doenças inflamatórias agudas e crônicas (19-23). Os níveis de hormônios sexuais em crianças pré-púberes são particularmente baixos e insuficientes para explicar as diferenças de gênero observadas em condições inflamatórias de neonatos a idosos, sugerindo a contribuição de outro mecanismo, como a influência de genes situados nos cromossomos sexuais e envolvidos na resposta inflamatória .
O objetivo deste trabalho é identificar os potenciais mecanismos ligados ao X responsáveis por algumas das diferenças entre meninos e meninas na resposta inflamatória, tornando as meninas mais em risco de desenvolver complicações em doenças inflamatórias crônicas e os meninos em maior risco de doenças letais complicações em doenças inflamatórias agudas graves como a sepse. Vários genes que codificam componentes da imunidade inata estão ligados ao cromossomo X, como a molécula de diapedese CD99 ou genes de proteínas da via TLR. (30-33). O cromossomo X também é altamente enriquecido em genes que codificam micro RNAs (miRNAs) envolvidos na regulação pós-transcricional da expressão gênica, que desempenham um papel crítico na resposta inflamatória imune (34-36).
Assim, a fim de discriminar com mais precisão o papel do cromossomo X em relação aos esteróides sexuais na resposta inflamatória sexo-específica, algumas funções imunes inatas relacionadas a genes ligados ao X serão avaliadas em sangue total de crianças pré-púberes de ambos os sexos, sofrendo de processos inflamatórios agudos, como pielonefrite causada por Escherichia coli, pneumonia com derrame pleural causada por Streptococcus pneumoniae ou sepse. Também estudaremos as correlações entre marcadores inflamatórios e clínicos da atividade da doença para identificar indicadores de prognóstico dependendo do sexo. Além disso, para delinear a contribuição do microbioma, estudaremos a microbiota intestinal em amostras de fezes obtidas dos pacientes recrutados.
Tipo de estudo
Inscrição (Antecipado)
Estágio
- Não aplicável
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Alexandros Popotas, MD
- Número de telefone: +32 2 477 24 24
- E-mail: alexandros.popotas@ulb.be
Estude backup de contato
- Nome: Nicolas Lefevre, MD, PhD
- Número de telefone: +32 2 477 23 41
- E-mail: nicolas.lefevre@huderf.be
Locais de estudo
-
-
-
Brussels, Bélgica, 1020
- Recrutamento
- Huderf
-
Contato:
- Alexandros Popotas, MD
- Número de telefone: +32 2 477 24 24
- E-mail: alexandros.popotas@ulb.be
-
Contato:
- Georges Casimir, MD, PhD
- Número de telefone: + 32 2 477 29 45
- E-mail: georges.casimir@huderf.be
-
Investigador principal:
- Alexandros Popotas, MD
-
Subinvestigador:
- Francis Corazza, MD, PhD
-
-
Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Gêneros Elegíveis para o Estudo
Descrição
Critérios de Inclusão do Grupo Experimental:
- Masculino (XY) e feminino (XX) com idade de 6 meses a 7 anos.
Sujeito hospitalizado por:
(1) Infecção do trato urinário causada por Escherichia Coli, com:
- Temperatura ≥ a 38,5°C
urinálise
- Esterase leucocitária +
- E/OU Nitritos +
- E/OU piúria (≥ 100WBC/mm³)
- E/OU bacteriúria.
urinálise
- Urina eliminada limpa: > 10^4 Unidade de forma de colônia de Escherichia Coli (CFU)/mm (método de coleta de urina para crianças >3 anos de idade ou crianças treinadas no banheiro ou por estimulação para crianças <3 anos de idade)
- Cateterismo vesical transuretral: > 10^4 unidades de forma de colônia de Escherichia Coli (CFU)/mm³ (método de coleta de urina para crianças <3 anos).
Aspiração suprapúbica: > 1 unidade de forma de colônia de Escherichia Coli (UFC)/mm³ (método de coleta de urina para crianças <3 anos).
(2) Pneumonia com derrame pleural com:
- Temperatura ≥ 38,5°C
- Radiografia/ultrassom de tórax: Derrame pleural
Streptococcus pneumoniae identificado em cultura de sangue ou líquido pleural ou por PCR
(3) Sepse com:
- Infecção documentada ou suspeita
- Temperatura < 36° ou > 38,3°C
Ritmo do coração:
- 2 DP acima do normal para a idade
- 6-23 meses: >180/min
- 24-71 meses: >140/min
- 72-84 meses: >130/min
Frequência respiratória:
- 6-23 meses: >35/min
- 24 - 71 meses: >30/min
- 72-84 meses: >20/min
glóbulos brancos:
- 6-23 meses: >17500/µL ou <5000/µL
- 24-71 meses: >15500/µL ou <6000/µL
- 72-84 meses: >13500/µL ou <4500/µL
- e/ou PCR (sangue) > 2DP acima do normal
E pelo menos dois dos seguintes:
- PaO2/FiO2 <300
- Necessidade comprovada de >50% FiO2 para manter a saturação ≥ 92%
- Necessidade de ventilação mecânica
- Pontuação de Glasgow < 11
- Débito urinário < 0,5mL/kg/h por pelo menos 2h
Creatinina:
- 6-11 meses: >0,4mg/dL
- 12-23 meses: >0,5mg/dL
- 24-59 meses: >0,8mg/dL
- 60-84 meses: >1mg/dL
- Ou aumento de creatinina superior a 0,5 mg/dL
- Contagem de plaquetas <100000/mL
- Bilirrubina >2 mg/dL
Pressão arterial média (PAM)
- 6-11 meses: <55 mmHg
- 12 -23 meses: <60 mmHg
- 24-59 meses: <62 mmHg
- 60-84 meses: <65 mmHg
- PAS inferior a dois DP abaixo do normal para a idade
- Reenchimento capilar prolongado: > 5 seg
Critérios de inclusão do grupo de controle:
- Masculino (XY) e feminino (XX) com idade de 6 meses a 7 anos.
- Intervenção cirúrgica programada para uma patologia não infecciosa.
Critério de exclusão:
- Uso de drogas antitrombóticas (ácido acetilsalicílico, tienopiridínicos, dipiridamol, antagonistas da glicoproteína IIb / IIIa, antagonistas da vitamina K, heparinas).
- Imunodeficiência congênita ou adquirida: drogas imunossupressoras, transplante de células-tronco hematopoiéticas, terapia com imunoglobulinas, oxigenação por membrana extracorpórea (ECMO).
- Hemodiálise.
- 48h após operação cardíaca de qualquer tipo.
- Câncer maligno.
- HIV.
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: CIÊNCIA BÁSICA
- Alocação: NON_RANDOMIZED
- Modelo Intervencional: PARALELO
- Mascaramento: NENHUM
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
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EXPERIMENTAL: Crianças que sofrem de processos inflamatórios agudos.
A população do estudo será constituída por crianças de ambos os sexos, com idades compreendidas entre os 6 meses e os 7 anos, internadas no hospital por um dos três seguintes tipos de processos inflamatórios agudos:
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Coletas de amostras de sangue para avaliação do potencial papel dos cromossomos sexuais na resposta imune inata por meio da análise da produção de citocinas inflamatórias (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e IFN-α), estudando o receptor de diapedese celular CD99 em PMNs, monócitos e linfócitos, analisando a contribuição de genes ligados ao X das vias TLR e a influência de miRNAs ligados ao X.
Coleta de amostras fecais para delinear a contribuição do microbioma, estudaremos a microbiota intestinal em amostras fecais obtidas dos pacientes recrutados.
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OUTRO: Grupo de controle
Crianças de ambos os sexos, com idades compreendidas entre os 6 meses e os 7 anos, internadas para operação programada de patologia não inflamatória.
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Coletas de amostras de sangue para avaliação do potencial papel dos cromossomos sexuais na resposta imune inata por meio da análise da produção de citocinas inflamatórias (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e IFN-α), estudando o receptor de diapedese celular CD99 em PMNs, monócitos e linfócitos, analisando a contribuição de genes ligados ao X das vias TLR e a influência de miRNAs ligados ao X.
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Produção de sangue total de citocina IL-6
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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A produção de IL6 é medida por técnicas multiplex.
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Produção de sangue total de citocina IL-1β
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Produção de sangue total de citocina IL-8
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Produção de sangue total de citocina IL-10
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Produção de sangue total de citocina TNF-α
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Produção de sangue total de citocina interferon-α
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Quantidade intracelular das formas fosforiladas de NF-κB p65 em população leucocitária.
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Quantidade intracelular das formas fosforiladas de ERK1/2 em população leucocitária.
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Quantidade intracelular das formas fosforiladas da p38 MAPK na população leucocitária.
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão do receptor de diapedese celular CD99 em PMNs
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições do receptor de diapedese celular CD99 em leucócitos serão realizadas por citometria de fluxo
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão do receptor de diapedese celular CD99 em monócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições do receptor de diapedese celular CD99 em leucócitos serão realizadas por citometria de fluxo
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão do receptor de diapedese celular CD99 em linfócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições do receptor de diapedese celular CD99 em leucócitos serão realizadas por citometria de fluxo
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão de TLR2 em PMNs
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições das formas intracelulares fosforiladas de proteínas da via TLR, bem como a expressão de TLR2 e TLR4 serão realizadas por citometria de fluxo
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão de TLR2 em monócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições das formas intracelulares fosforiladas de proteínas da via TLR, bem como a expressão de TLR2 e TLR4 serão realizadas por citometria de fluxo
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão de TLR2 em linfócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições das formas intracelulares fosforiladas de proteínas da via TLR, bem como a expressão de TLR2 e TLR4 serão realizadas por citometria de fluxo
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão de TLR4 em PMNs
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições das formas intracelulares fosforiladas de proteínas da via TLR, bem como a expressão de TLR2 e TLR4 serão realizadas por citometria de fluxo
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão de TLR4 em monócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Medições das formas intracelulares fosforiladas de proteínas da via TLR, bem como a expressão de TLR2 e TLR4 serão realizadas por citometria de fluxo
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
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Expressão de TLR4 em linfócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
Medições das formas intracelulares fosforiladas de proteínas da via TLR, bem como a expressão de TLR2 e TLR4 serão realizadas por citometria de fluxo
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão do gene BTK
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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As medições serão realizadas usando o Quantitect Reverse Transcription Kit (Qiagen, Manchester, Reino Unido) para PCR quantitativo (qPCR) em leucócitos.
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão do gene IRAK1
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
As medições serão realizadas usando o Quantitect Reverse Transcription Kit (Qiagen, Manchester, Reino Unido) para PCR quantitativo (qPCR) em leucócitos.
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
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Expressão do gene NEMO
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
As medições serão realizadas usando o Quantitect Reverse Transcription Kit (Qiagen, Manchester, Reino Unido) para PCR quantitativo (qPCR) em leucócitos.
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Expressão de miRNAs ligados ao X em leucócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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A expressão de miRNAs ligados ao X é medida por sequenciamento e qRT-PCR em leucócitos e/ou amostras de plasma.
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
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Expressão de miRNAs ligados ao X no plasma
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
A expressão de miRNAs ligados ao X é medida por sequenciamento e qRT-PCR em leucócitos e/ou amostras de plasma.
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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População de leucócitos
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Contagem de glóbulos brancos, incluindo neutrófilos, monócitos, subtipos de monócitos e linfócitos.
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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População de leucócitos
Prazo: Dia 1
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Contagem de glóbulos brancos, incluindo neutrófilos, monócitos, subtipos de monócitos e linfócitos.
Aplicável apenas para o subgrupo de sepse
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Dia 1
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População de leucócitos
Prazo: Dia 2
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Contagem de glóbulos brancos, incluindo neutrófilos, monócitos, subtipos de monócitos e linfócitos.
Aplicável apenas para o subgrupo de sepse
|
Dia 2
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População de leucócitos
Prazo: Dia 3
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Contagem de glóbulos brancos, incluindo neutrófilos, monócitos, subtipos de monócitos e linfócitos.
Aplicável apenas para o subgrupo de sepse
|
Dia 3
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PCR
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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PCR
Prazo: Dia 1
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Aplicável apenas para o subgrupo de sepse
|
Dia 1
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PCR
Prazo: Dia 2
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Aplicável apenas para o subgrupo de sepse
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Dia 2
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PCR
Prazo: Dia 3
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Aplicável apenas para o subgrupo de sepse
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Dia 3
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17β-estradiol total
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Testosterona
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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IGF1
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Análise de microbioma
Prazo: Durante a hospitalização do sujeito
|
Durante a hospitalização do sujeito
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pontuação pSOFA
Prazo: dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
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Aplicável apenas para o subgrupo de sepse.
O pSOFA será avaliado a cada 24 horas para comparação de dados laboratoriais e clínicos.
A pontuação será baseada na relação PaO2:FiO2 ou SpO2:FiO2, contagem de plaquetas, nível de bilirrubina, pressão arterial média (PAM), pontuação de Glasgow e nível de creatinina.
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dentro de 24 horas após a admissão hospitalar (dia 0)
|
|
pontuação pSOFA
Prazo: Dia 1
|
Aplicável apenas para o subgrupo de sepse.
O pSOFA será avaliado a cada 24 horas para comparação de dados laboratoriais e clínicos.
A pontuação será baseada na relação PaO2:FiO2 ou SpO2:FiO2, contagem de plaquetas, nível de bilirrubina, pressão arterial média (PAM), pontuação de Glasgow e nível de creatinina.
|
Dia 1
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|
pontuação pSOFA
Prazo: Dia 2
|
Aplicável apenas para o subgrupo de sepse.
O pSOFA será avaliado a cada 24 horas para comparação de dados laboratoriais e clínicos.
A pontuação será baseada na relação PaO2:FiO2 ou SpO2:FiO2, contagem de plaquetas, nível de bilirrubina, pressão arterial média (PAM), pontuação de Glasgow e nível de creatinina.
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Dia 2
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pontuação pSOFA
Prazo: Dia 3
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Aplicável apenas para o subgrupo de sepse.
O pSOFA será avaliado a cada 24 horas para comparação de dados laboratoriais e clínicos.
A pontuação será baseada na relação PaO2:FiO2 ou SpO2:FiO2, contagem de plaquetas, nível de bilirrubina, pressão arterial média (PAM), pontuação de Glasgow e nível de creatinina.
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Dia 3
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Investigador principal: Alexandros Popotals, MD, Huderf
Publicações e links úteis
Publicações Gerais
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- Schroder J, Kahlke V, Staubach KH, Zabel P, Stuber F. Gender differences in human sepsis. Arch Surg. 1998 Nov;133(11):1200-5. doi: 10.1001/archsurg.133.11.1200.
- Angele MK, Pratschke S, Hubbard WJ, Chaudry IH. Gender differences in sepsis: cardiovascular and immunological aspects. Virulence. 2014 Jan 1;5(1):12-9. doi: 10.4161/viru.26982. Epub 2013 Nov 5.
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- P2019/LABO/SepsiX
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