- ICH GCP
- Registro degli studi clinici negli Stati Uniti
- Sperimentazione clinica NCT04815811
Studio delle differenze di sesso nelle malattie infiammatorie nei bambini (SepsiX)
Le differenze sessuali nella risposta immunitaria innata sono state dimostrate e sono state principalmente attribuite all'influenza degli steroidi sessuali (1-18). Tuttavia, recenti dati clinici hanno rivelato differenze significative nei marcatori infiammatori tra ragazzi e ragazze affetti da malattie infiammatorie acute e croniche (19-23). I livelli di ormoni sessuali nei bambini in età prepuberale sono particolarmente bassi e insufficienti a spiegare le differenze di genere osservate nelle condizioni infiammatorie dai neonati agli anziani, suggerendo il contributo di un altro meccanismo, come l'influenza di geni situati sui cromosomi sessuali e coinvolti nella risposta infiammatoria .
Lo scopo di questo lavoro è valutare il ruolo del cromosoma X nelle differenze di sesso nelle malattie infiammatorie nei bambini. Al fine di discriminare più precisamente il ruolo del cromosoma X rispetto agli steroidi sessuali nella risposta infiammatoria sesso-specifica, verranno valutate alcune funzioni immunitarie innate legate ai geni X-linked su sangue intero di bambini in età prepuberale di entrambi i sessi, affetti da processi infiammatori acuti come pielonefrite causata da Escherichia coli, polmonite con versamento pleurico causata da Streptococcus pneumoniae o sepsi
Panoramica dello studio
Stato
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
Molti studi hanno dimostrato differenze immunitarie tra uomini e donne che soffrono di processi infiammatori acuti e cronici. Nei casi di malattie infiammatorie acute, come la sepsi, le femmine hanno una prognosi migliore rispetto ai maschi (1,24-28).
Al contrario, la prognosi peggiore per le donne si osserva nelle malattie infiammatorie croniche come l'asma o la fibrosi cistica (8-10,12,13,29).
La risposta infiammatoria dipendente dal sesso è stata attribuita all'influenza degli ormoni sessuali sul sistema immunitario. (2,15-18). Tuttavia studi recenti hanno rivelato differenze nell'esito clinico ma anche nei marcatori infiammatori tra ragazzi e ragazze affetti da malattie infiammatorie acute e croniche (19-23). I livelli di ormoni sessuali nei bambini in età prepuberale sono particolarmente bassi e insufficienti a spiegare le differenze di genere osservate nelle condizioni infiammatorie dai neonati agli anziani, suggerendo il contributo di un altro meccanismo, come l'influenza di geni situati sui cromosomi sessuali e coinvolti nella risposta infiammatoria .
Lo scopo di questo lavoro è identificare i potenziali meccanismi legati all'X responsabili di alcune delle differenze tra ragazzi e ragazze nella risposta infiammatoria, rendendo le ragazze più a rischio di sviluppare complicanze nelle malattie infiammatorie croniche e i ragazzi più a rischio di morte complicanze in gravi malattie infiammatorie acute come la sepsi. Diversi geni che codificano per i componenti dell'immunità innata sono collegati al cromosoma X come i geni della molecola della diapedesi CD99 o delle proteine del percorso TLR. (30-33). Il cromosoma X è anche altamente arricchito di geni che codificano micro RNA (miRNA) coinvolti nella regolazione post-trascrizionale dell'espressione genica che svolgono un ruolo critico nella risposta immunitaria infiammatoria (34-36).
Pertanto, al fine di discriminare più precisamente il ruolo del cromosoma X relativamente agli steroidi sessuali nella risposta infiammatoria sesso-specifica, alcune funzioni immunitarie innate legate ai geni legati all'X saranno valutate nel sangue intero di bambini in età prepuberale di entrambi i sessi, affetti da processi infiammatori acuti come pielonefrite causata da Escherichia coli, polmonite con versamento pleurico causata da Streptococcus pneumoniae o sepsi. Studieremo inoltre le correlazioni tra marcatori infiammatori e clinici dell'attività della malattia per identificare indicatori prognostici dipendenti dal sesso. Inoltre, per delineare il contributo del microbioma, studieremo il microbiota intestinale nei campioni di feci ottenuti dai pazienti reclutati.
Tipo di studio
Iscrizione (Anticipato)
Fase
- Non applicabile
Contatti e Sedi
Contatto studio
- Nome: Alexandros Popotas, MD
- Numero di telefono: +32 2 477 24 24
- Email: alexandros.popotas@ulb.be
Backup dei contatti dello studio
- Nome: Nicolas Lefevre, MD, PhD
- Numero di telefono: +32 2 477 23 41
- Email: nicolas.lefevre@huderf.be
Luoghi di studio
-
-
-
Brussels, Belgio, 1020
- Reclutamento
- Huderf
-
Contatto:
- Alexandros Popotas, MD
- Numero di telefono: +32 2 477 24 24
- Email: alexandros.popotas@ulb.be
-
Contatto:
- Georges Casimir, MD, PhD
- Numero di telefono: + 32 2 477 29 45
- Email: georges.casimir@huderf.be
-
Investigatore principale:
- Alexandros Popotas, MD
-
Sub-investigatore:
- Francis Corazza, MD, PhD
-
-
Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Accetta volontari sani
Sessi ammissibili allo studio
Descrizione
Criteri di inclusione del gruppo sperimentale:
- Maschio (XY) e femmina (XX) di età compresa tra 6 mesi e 7 anni.
Soggetto ricoverato per:
(1) Infezione del tratto urinario causata da Escherichia Coli, con:
- Temperatura ≥ a 38,5°C
Analisi delle urine
- Esterasi leucocitaria +
- E/O Nitriti +
- E/O piuria (≥ 100 WBC/mm³)
- E/O batteriuria.
Analisi delle urine
- Urina raccolta pulita: > 10^4 unità forma colonia di Escherichia Coli (CFU)/mm (metodo di raccolta delle urine per bambini di età superiore a 3 anni o bambini addestrati all'uso del bagno o tramite stimolazione per bambini di età inferiore a 3 anni)
- Cateterismo vescicale transuretrale: > 10^4 Escherichia Coli unità forma colonia (CFU)/mm³ (metodo di raccolta delle urine per bambini <3 anni).
Aspirazione sovrapubica: > 1 Escherichia Coli unità forma colonia (CFU)/mm³ (metodo di raccolta delle urine per bambini <3 anni).
(2) Polmonite con versamento pleurico con:
- Temperatura ≥ 38,5°C
- Radiografia/ecografia del torace: versamento pleurico
Streptococcus pneumoniae identificato su sangue o coltura del liquido pleurico o mediante PCR
(3) Sepsi con:
- Infezione documentata o sospetta
- Temperatura < 36° o > 38,3°C
Ritmo cardiaco:
- 2 SD al di sopra del normale per l'età
- 6-23 mesi: >180/min
- 24-71 mesi: >140/min
- 72-84 mesi: >130/min
Frequenza respiratoria:
- 6-23 mesi: >35/min
- 24 - 71 mesi: >30/min
- 72-84 mesi: >20/min
GB:
- 6-23 mesi: >17500/µL o <5000/µL
- 24-71 mesi: >15500/µL o <6000/µL
- 72-84 mesi: >13500/µL o <4500/µL
- e/o CRP (sangue) > 2DS sopra il normale
E almeno due dei seguenti:
- PaO2/FiO2 <300
- Comprovata necessità di >50% di FiO2 per mantenere la saturazione ≥ 92%
- Necessità di ventilazione meccanica
- Punteggio Glasgow < 11
- Produzione di urina < 0,5 ml/kg/h per almeno 2 ore
Creatinina:
- 6-11 mesi: >0,4mg/dL
- 12-23 mesi: >0,5mg/dL
- 24-59 mesi: >0,8mg/dL
- 60-84 mesi: >1mg/dL
- Oppure la creatinina aumenta di oltre 0,5 mg/dL
- Conta piastrinica <100000/ml
- Bilirubina >2 mg/dL
Pressione arteriosa media (MAP)
- 6-11 mesi: <55 mmHg
- 12 -23 mesi: <60 mmHg
- 24-59 mesi: <62 mmHg
- 60-84 mesi: <65 mmHg
- SBP inferiore a due SD al di sotto del normale per l'età
- Ricarica capillare prolungata: > 5 sec
Criteri di inclusione del gruppo di controllo:
- Maschio (XY) e femmina (XX) di età compresa tra 6 mesi e 7 anni.
- Intervento chirurgico programmato per una patologia non infettiva.
Criteri di esclusione:
- Uso di farmaci antitrombotici (acido acetilsalicilico, tienopiridine, dipiridamolo, antagonisti della glicoproteina IIb/IIIa, antagonisti della vitamina K, eparine).
- Immunodeficienze congenite o acquisite: farmaci immunosoppressori, trapianto di cellule staminali emopoietiche, terapia con immunoglobuline, ossigenazione extracorporea di membrana (ECMO).
- Emodialisi.
- 48 ore dopo un'operazione cardiaca di qualsiasi tipo.
- Cancro maligno.
- HIV.
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: SCIENZA BASILARE
- Assegnazione: NON_RANDOMIZZATO
- Modello interventistico: PARALLELO
- Mascheramento: NESSUNO
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
|---|---|
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SPERIMENTALE: Bambini che soffrono di processi infiammatori acuti.
La popolazione in studio sarà composta da bambini maschi e femmine, di età compresa tra 6 mesi e 7 anni, ricoverati in ospedale per uno dei tre seguenti tipi di processi infiammatori acuti:
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Prelievi di campioni di sangue per valutare il potenziale ruolo dei cromosomi sessuali nella risposta immunitaria innata analizzando la produzione di citochine infiammatorie (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e IFN-α), studiando il recettore della diapedesi cellulare CD99 su PMN, monociti e linfociti, analizzando il contributo dei geni legati all'X delle vie TLR e l'influenza dei miRNA legati all'X.
Raccolta di campioni fecali per delineare il contributo del microbioma, studieremo il microbiota intestinale in campioni fecali ottenuti dai pazienti reclutati.
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ALTRO: Gruppo di controllo
Bambini maschi e femmine, di età compresa tra 6 mesi e 7 anni, ricoverati in ospedale per intervento programmato per patologia non infiammatoria.
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Prelievi di campioni di sangue per valutare il potenziale ruolo dei cromosomi sessuali nella risposta immunitaria innata analizzando la produzione di citochine infiammatorie (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e IFN-α), studiando il recettore della diapedesi cellulare CD99 su PMN, monociti e linfociti, analizzando il contributo dei geni legati all'X delle vie TLR e l'influenza dei miRNA legati all'X.
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Produzione di sangue intero della citochina IL-6
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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La produzione di IL6 è misurata mediante tecniche multiplex.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Produzione di sangue intero della citochina IL-1β
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Produzione di sangue intero della citochina IL-8
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Produzione di sangue intero della citochina IL-10
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Produzione di sangue intero di citochina TNF-α
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Produzione di sangue intero di citochina interferone-α
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Quantità intracellulare delle forme fosforilate di NF-κB p65 nella popolazione leucocitaria.
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Quantità intracellulare delle forme fosforilate di ERK1/2 nella popolazione leucocitaria.
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Quantità intracellulare delle forme fosforilate di p38 MAPK nella popolazione leucocitaria.
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione del recettore della diapedesi cellulare CD99 sui PMN
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni del recettore della diapedesi cellulare CD99 sui leucociti saranno effettuate mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione del recettore della diapedesi cellulare CD99 sui monociti
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni del recettore della diapedesi cellulare CD99 sui leucociti saranno effettuate mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione del recettore della diapedesi cellulare CD99 sui linfociti
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni del recettore della diapedesi cellulare CD99 sui leucociti saranno effettuate mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione di TLR2 su PMN
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni delle forme fosforilate intracellulari delle proteine del pathway TLR così come l'espressione di TLR2 e TLR4 saranno eseguite mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione di TLR2 sui monociti
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni delle forme fosforilate intracellulari delle proteine del pathway TLR così come l'espressione di TLR2 e TLR4 saranno eseguite mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione di TLR2 sui linfociti
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni delle forme fosforilate intracellulari delle proteine del pathway TLR così come l'espressione di TLR2 e TLR4 saranno eseguite mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione di TLR4 su PMN
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
|
Le misurazioni delle forme fosforilate intracellulari delle proteine del pathway TLR così come l'espressione di TLR2 e TLR4 saranno eseguite mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione di TLR4 sui monociti
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
|
Le misurazioni delle forme fosforilate intracellulari delle proteine del pathway TLR così come l'espressione di TLR2 e TLR4 saranno eseguite mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
|
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Espressione di TLR4 sui linfociti
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni delle forme fosforilate intracellulari delle proteine del pathway TLR così come l'espressione di TLR2 e TLR4 saranno eseguite mediante citometria a flusso
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione del gene BTK
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni saranno effettuate utilizzando il kit Quantitect Reverse Transcription (Qiagen, Manchester, UK) per la PCR quantitativa (qPCR) sui leucociti.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione del gene IRAK1
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni saranno effettuate utilizzando il kit Quantitect Reverse Transcription (Qiagen, Manchester, UK) per la PCR quantitativa (qPCR) sui leucociti.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione del gene NEMO
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Le misurazioni saranno effettuate utilizzando il kit Quantitect Reverse Transcription (Qiagen, Manchester, UK) per la PCR quantitativa (qPCR) sui leucociti.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione di miRNA legati all'X nei leucociti
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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L'espressione dei miRNA legati all'X viene misurata mediante sequenziamento e qRT-PCR su leucociti e/o campioni di plasma.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Espressione di miRNA legati all'X nel plasma
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
|
L'espressione dei miRNA legati all'X viene misurata mediante sequenziamento e qRT-PCR su leucociti e/o campioni di plasma.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Popolazione leucocitaria
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Conta dei globuli bianchi inclusi neutrofili, monociti, sottotipi di monociti e linfociti.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Popolazione leucocitaria
Lasso di tempo: Giorno 1
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Conta dei globuli bianchi inclusi neutrofili, monociti, sottotipi di monociti e linfociti.
Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi
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Giorno 1
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Popolazione leucocitaria
Lasso di tempo: Giorno 2
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Conta dei globuli bianchi inclusi neutrofili, monociti, sottotipi di monociti e linfociti.
Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi
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Giorno 2
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Popolazione leucocitaria
Lasso di tempo: Giorno 3
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Conta dei globuli bianchi inclusi neutrofili, monociti, sottotipi di monociti e linfociti.
Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi
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Giorno 3
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PCR
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
|
entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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PCR
Lasso di tempo: Giorno 1
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Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi
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Giorno 1
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PCR
Lasso di tempo: Giorno 2
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Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi
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Giorno 2
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PCR
Lasso di tempo: Giorno 3
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Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi
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Giorno 3
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Totale 17β-estradiolo
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Testosterone
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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IGF1
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Analisi del microbioma
Lasso di tempo: Durante il ricovero del soggetto
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Durante il ricovero del soggetto
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Punteggio pSOFA
Lasso di tempo: entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi.
Il pSOFA sarà valutato ogni 24 ore al fine di confrontare i dati di laboratorio e clinici.
Il punteggio sarà basato sul rapporto PaO2: FiO2 o SpO2: FiO2, conta piastrinica, livello di bilirubina, pressione arteriosa media (MAP), punteggio di Glasgow e livello di creatinina.
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entro 24 ore dal ricovero in ospedale (Giorno 0)
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Punteggio pSOFA
Lasso di tempo: Giorno 1
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Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi.
Il pSOFA sarà valutato ogni 24 ore al fine di confrontare i dati di laboratorio e clinici.
Il punteggio sarà basato sul rapporto PaO2: FiO2 o SpO2: FiO2, conta piastrinica, livello di bilirubina, pressione arteriosa media (MAP), punteggio di Glasgow e livello di creatinina.
|
Giorno 1
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Punteggio pSOFA
Lasso di tempo: Giorno 2
|
Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi.
Il pSOFA sarà valutato ogni 24 ore al fine di confrontare i dati di laboratorio e clinici.
Il punteggio sarà basato sul rapporto PaO2: FiO2 o SpO2: FiO2, conta piastrinica, livello di bilirubina, pressione arteriosa media (MAP), punteggio di Glasgow e livello di creatinina.
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Giorno 2
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Punteggio pSOFA
Lasso di tempo: Giorno 3
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Applicabile solo per il sottogruppo della sepsi.
Il pSOFA sarà valutato ogni 24 ore al fine di confrontare i dati di laboratorio e clinici.
Il punteggio sarà basato sul rapporto PaO2: FiO2 o SpO2: FiO2, conta piastrinica, livello di bilirubina, pressione arteriosa media (MAP), punteggio di Glasgow e livello di creatinina.
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Giorno 3
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Collaboratori e investigatori
Collaboratori
Investigatori
- Investigatore principale: Alexandros Popotals, MD, Huderf
Pubblicazioni e link utili
Pubblicazioni generali
- Venn A, Lewis S, Cooper M, Hill J, Britton J. Questionnaire study of effect of sex and age on the prevalence of wheeze and asthma in adolescence. BMJ. 1998 Jun 27;316(7149):1945-6. doi: 10.1136/bmj.316.7149.1945. No abstract available.
- Schroder J, Kahlke V, Staubach KH, Zabel P, Stuber F. Gender differences in human sepsis. Arch Surg. 1998 Nov;133(11):1200-5. doi: 10.1001/archsurg.133.11.1200.
- Angele MK, Pratschke S, Hubbard WJ, Chaudry IH. Gender differences in sepsis: cardiovascular and immunological aspects. Virulence. 2014 Jan 1;5(1):12-9. doi: 10.4161/viru.26982. Epub 2013 Nov 5.
- Wichmann MW, Inthorn D, Andress HJ, Schildberg FW. Incidence and mortality of severe sepsis in surgical intensive care patients: the influence of patient gender on disease process and outcome. Intensive Care Med. 2000 Feb;26(2):167-72. doi: 10.1007/s001340050041.
- Schoeneberg C, Kauther MD, Hussmann B, Keitel J, Schmitz D, Lendemans S. Gender-specific differences in severely injured patients between 2002 and 2011: data analysis with matched-pair analysis. Crit Care. 2013 Nov 29;17(6):R277. doi: 10.1186/cc13132.
- Moss M, Mannino DM. Race and gender differences in acute respiratory distress syndrome deaths in the United States: an analysis of multiple-cause mortality data (1979- 1996). Crit Care Med. 2002 Aug;30(8):1679-85. doi: 10.1097/00003246-200208000-00001.
- Carr MJ, Moss E, Waters A, Dean J, Jin L, Coughlan S, Connell J, Hall WW, Hassan J. Molecular epidemiological evaluation of the recent resurgence in mumps virus infections in Ireland. J Clin Microbiol. 2010 Sep;48(9):3288-94. doi: 10.1128/JCM.00434-10. Epub 2010 Jul 21.
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