Avaliação da Segurança e Eficácia do Extrato P2Et em Pacientes com Câncer de Mama

Produtos naturais e fitoterápicos tradicionais são uma fonte importante de compostos bioativos alternativos, mas muito poucas preparações à base de ervas foram cientificamente avaliadas e validadas quanto ao seu potencial como tratamentos na prática médica. A fitoterapia é um campo promissor nas terapias atuais baseadas em compostos derivados de plantas, devido às suas propriedades imunomoduladoras e sua capacidade de atuar contra tumores, favorecendo a ativação da resposta imune e a reversão do fenótipo tumoral por meio de sua ação no microambiente tumoral.

Nos últimos 8 anos, os pesquisadores demonstraram que um extrato padronizado de Caesalpinia spinosa, que os pesquisadores chamam de P2Et e que é a droga de estudo deste protocolo, apresenta uma atividade antioxidante tanto intracelular quanto em solução, muito superior à do dos controles positivos usados ​​como TROLOX. A P2Et também pode modular as bombas de resistência a drogas, aumentando a sensibilidade às antraciclinas in vitro e in vivo. Induz apoptose através da despolarização das mitocôndrias em várias células tumorais e especificamente em células de câncer de mama murino, diminui a clonogenicidade, o que parece estar relacionado com a redução do tumor primário e metástases em modelos animais de câncer de mama. Também pode diminuir a produção de IL-6 sérica nesses animais, possivelmente relacionada à redução da atividade protumorigênica dos fibroblastos associados ao tumor (resultados ainda não publicados). O processo de morte tumoral induzido por P2Et é acompanhado pela expressão de marcadores imunogênicos de morte, como a expressão de calreticulina, secreção de HMGB1 e ATP, que participam da ativação de células dendríticas. A vacinação dos animais com células tumorais tratadas com P2Et permite a geração de LTs de memória longeva, produtores de IFN-gama, TNF-alfa e IL-2, 4 e 5, que podem ser detectados ex vivo. In vivo em animais, o tratamento com vacina preparada com células tumorais tratadas com P2Et favorece o recrutamento e a diferenciação de LT para os linfonodos de drenagem, que produzem citocinas em resposta aos antígenos tumorais, mostrando sua capacidade de reconhecer o tumor. Os pesquisadores também conseguiram mostrar que a P2Et induz uma resposta imune tumor-específica superior à induzida pela Doxorrubicina, uma vez que os LTs gerados apresentam maior multifuncionalidade na produção de citocinas. Sabe-se que a doxorrubicina também induz uma resposta imune por morte celular imunogênica, porém, também foi observado que o tratamento com antraciclinas pode favorecer a seleção de CMT dentro do tumor, o que sugere que apesar de induzirem resposta imune antitumoral, é necessário melhorar o reconhecimento de CMTs pelo sistema imune. A vacinação de animais com células tumorais 4T1 de tipo selvagem tratadas com P2Et pode induzir LTs citotóxicos capazes de reconhecer MTCs tumorais 4T1 murinos denominados H17. Isso sugere fortemente que existem antígenos de reação cruzada em ambas as linhagens tumorais e que, in vivo, o tratamento com P2Et poderia induzir uma apresentação cruzada de antígenos que permite a ativação de LTs específicos de CMT, o que se refletiria em uma maior sobrevivência. em animais, e que o mesmo pode ser observado em pacientes.

A capacidade do P2Et de realizar sua atividade antitumoral também foi observada em um modelo murino de melanoma, no qual os pesquisadores mostram que o tratamento com P2Et induz LT CD8 específico para o antígeno tumoral específico do melanoma Trp-2, por meio de um cruzamento eficaz apresentação e apresentação antigênica por células dendríticas. De fato, a atividade antitumoral do P2Et foi reduzida em animais imunodeficientes RAGg KO, que não apresentam LT ou LB, confirmando que o efeito desse fitomedicamento é parcialmente mediado pela resposta imune e que a resposta imune precisa ser ativada, para exercer a sua função.

A atividade antitumoral da P2Et pode ser devida à forma particular de indução da morte celular imunogênica diferente daquela induzida pelas antraciclinas, que permite que os antígenos tumorais não se degradem facilmente quando a célula está morrendo, devido à sua alta capacidade. antioxidante, que é concomitante com a expressão pela célula tumoral de marcadores imunogênicos de morte celular. Esses dois elementos, juntos, permitem que as células dendríticas realizem um melhor processamento antigênico com antígenos completos e, portanto, a diversidade da resposta LT, medida em nível clonotípico, é maior.

Os investigadores estão atualmente avaliando a resposta imune local intratumoral e periférica induzida pelo tratamento com antraciclina em pacientes com câncer de mama no Hospital San Ignacio, em conjunto com uma análise clonotípica dos LTs gerados em ambos os compartimentos (dados não publicados). Esses resultados servirão de base para compararmos posteriormente se a qualidade da resposta em pacientes tratados com P2Et em conjunto com a quimioterapia convencional é diferente e se isso pode estar relacionado à sua atividade antitumoral in vivo.

Por outro lado, em estudos anteriores foi observado que o P2Et pode modular a expressão de PD-L1 em ​​células tumorais, melhorando o efeito terapêutico do anticorpo anti PD-L1 in vivo em um modelo de melanoma murino. Embora a mesma resposta aditiva ao cotratamento (P2Et + anti-PD-L1) não tenha sido observada no modelo de câncer de mama, a proteção das células hematopoiéticas afetadas foi evidenciada com a terapia anti-PD-L1 com melhora no número de plaquetas , linfócitos, monócitos e granulócitos em animais que receberam P2Et em conjunto com anti-PD-L1 em ​​comparação com aqueles que receberam apenas anti-PD-L1. As diferenças no melanoma e na mama podem ser devidas ao aumento da expressão de PD-L1 principalmente na linhagem de melanoma murino e não na linhagem 4T1 em resposta ao P2Et, por isso é importante medir o efeito do extrato P2Et no Expressão de PD-L1 em ​​células tumorais humanas e estudar a relação com o tipo de tumor e outras variáveis ​​biológicas.

Com esse histórico e os resultados do estudo clínico de Fase I realizado em voluntários saudáveis ​​que mostraram que o extrato é seguro, os pesquisadores propõem que o tratamento com o extrato P2Et em pacientes com câncer de mama pode melhorar seu estado geral, impactando sua qualidade de vida vida. , e induzem uma resposta imune antitumoral, melhorando o infiltrado imune e atuando como um agente transformador de um tumor frio para um tumor quente. Isso levaria a uma melhora na sobrevida a longo prazo dos pacientes tratados com fitoterápicos em conjunto com o tratamento quimioterápico selecionado pelo oncologista responsável.

Para avançar neste caminho, e respondendo aos ajustes sugeridos no estudo de fase I em indivíduos saudáveis, propõe-se a realização de um estudo clínico que permita determinar a dose biológica ótima do extrato P2Et em um desenho baseado em simulações aleatórias de forma adaptativa e tendo como objetivo a segurança do extrato em pacientes com câncer de mama. Adicionalmente, serão avaliados os parâmetros que permitem definir os melhores indicadores da efetividade da P2Et neste grupo de pacientes, como modulação da resposta imune, qualidade de vida, redução de efeitos adversos e sobrevida livre de progressão.