Valutazione della sicurezza e dell'efficacia dell'estratto P2Et in pazienti con cancro al seno

I prodotti naturali e la fitoterapia tradizionale sono un'importante fonte di composti bioattivi alternativi, ma pochissimi preparati a base di erbe sono stati scientificamente valutati e convalidati per il loro potenziale come trattamenti nella pratica medica. La fitoterapia è un campo promettente nelle attuali terapie basate su composti di origine vegetale date le sue proprietà di immunomodulazione e la sua capacità di agire contro i tumori, favorendo l'attivazione della risposta immunitaria e l'inversione del fenotipo tumorale attraverso la sua azione sul microambiente tumorale.

Negli ultimi 8 anni, i ricercatori hanno dimostrato che un estratto standardizzato di Caesalpinia spinosa, che i ricercatori chiamano P2Et e che è il farmaco in studio di questo protocollo, presenta un'attività antiossidante sia intracellulare che in soluzione, che è molto superiore a quella di dei controlli positivi utilizzati come TROLOX. P2Et può anche modulare le pompe di resistenza ai farmaci, aumentando la sensibilità alle antracicline in vitro e in vivo. Induce l'apoptosi attraverso la depolarizzazione dei mitocondri in varie cellule tumorali e in particolare nelle cellule di carcinoma mammario murino, diminuisce la clonogenicità, che sembra essere correlata alla riduzione del tumore primario e metastasi in modelli animali di carcinoma mammario. Può anche diminuire la produzione di IL-6 sierica in questi animali, probabilmente correlata a una riduzione dell'attività protumorigenica dei fibroblasti associati al tumore (risultati non ancora pubblicati). Il processo di morte tumorale indotto da P2Et è accompagnato dall'espressione di marcatori di morte immunogenici come l'espressione di calreticulina, la secrezione di HMGB1 e ATP, che partecipano all'attivazione delle cellule dendritiche. La vaccinazione degli animali con cellule tumorali trattate con P2Et consente la generazione di LT di memoria a vita lunga, produttori di IFN-gamma, TNF-alfa e IL-2, 4 e 5, che possono essere rilevati ex vivo. In vivo negli animali, il trattamento con un vaccino preparato con cellule tumorali trattate con P2Et favorisce il reclutamento e la differenziazione di LT ai linfonodi drenanti, che producono citochine in risposta agli antigeni tumorali, dimostrando la loro capacità di riconoscere il tumore. I ricercatori sono stati anche in grado di dimostrare che P2Et induce una risposta immunitaria tumore-specifica superiore a quella indotta dalla doxorubicina, poiché i LT generati presentano una maggiore multifunzionalità in termini di produzione di citochine. È noto che la doxorubicina induce anche una risposta immunitaria attraverso la morte delle cellule immunogeniche, tuttavia è stato anche osservato che il trattamento con antracicline può favorire la selezione di CMT all'interno del tumore, il che suggerisce che sebbene inducano una risposta immunitaria antitumorale, è necessario migliorare il riconoscimento degli MTC da parte del sistema immunitario. La vaccinazione di animali con cellule tumorali wild type 4T1 trattate con P2Et può indurre LT citotossici in grado di riconoscere MTC tumorali murini 4T1 chiamati H17. Ciò suggerisce fortemente che esistono antigeni cross-reattivi in ​​entrambe le linee tumorali e che in vivo il trattamento con P2Et potrebbe indurre una presentazione incrociata di antigeni che consente l'attivazione di LT specifici per CMT, che si rifletterebbe in una maggiore assenza di malattia sopravvivenza. negli animali e che lo stesso potrebbe essere osservato nei pazienti.

La capacità di P2Et di svolgere la sua attività antitumorale è stata osservata anche in un modello murino di melanoma, in cui i ricercatori dimostrano che il trattamento con P2Et induce LT CD8 specifico per l'antigene tumorale specifico del melanoma Trp-2, attraverso un efficace cross- presentazione e presentazione antigenica da parte delle cellule dendritiche. Infatti, l'attività antitumorale di P2Et è stata ridotta in animali immunodeficienti RAGg KO, che non presentano LT o LB, confermando che l'effetto di questo fitomedicinale è parzialmente mediato dalla risposta immunitaria e che la risposta immunitaria è necessaria per essere attivata, per esercitare la sua funzione.

L'attività antitumorale di P2Et può essere dovuta alla particolare forma di induzione della morte cellulare immunogenica diversa da quella indotta dalle antracicline, che consente agli antigeni tumorali di non degradarsi facilmente quando la cellula sta morendo, a causa della sua elevata capacità. antiossidante, che è concomitante con l'espressione da parte della cellula tumorale di marcatori immunogenici di morte cellulare. Questi due elementi, insieme, consentono alle cellule dendritiche di effettuare una migliore elaborazione dell'antigene con antigeni completi e quindi la diversità della risposta LT, misurata a livello clonotipico, è maggiore.

I ricercatori stanno attualmente valutando la risposta immunitaria locale intratumorale e periferica indotta dal trattamento con antracicline in pazienti con carcinoma mammario presso l'Ospedale San Ignacio, insieme a un'analisi clonotipica dei LT generati in entrambi i compartimenti (dati non pubblicati). Questi risultati serviranno come base per confrontare successivamente se la qualità della risposta nei pazienti trattati con P2Et in combinazione con la chemioterapia convenzionale è diversa e se ciò può essere correlato alla sua attività antitumorale in vivo.

D'altra parte, in studi precedenti è stato osservato che P2Et può modulare l'espressione di PD-L1 nelle cellule tumorali, migliorando l'effetto terapeutico dell'anticorpo anti PD-L1 in vivo in un modello murino di melanoma. Sebbene la stessa risposta additiva al co-trattamento (P2Et + anti-PD-L1) non sia stata osservata nel modello di carcinoma mammario, la protezione delle cellule ematopoietiche interessate è stata evidenziata con la terapia anti-PD-L1 con un miglioramento del numero di piastrine , linfociti, monociti e granulociti negli animali che hanno ricevuto P2Et in combinazione con anti-PD-L1 rispetto a quelli che hanno ricevuto solo anti-PD-L1. Le differenze nel melanoma e nella mammella potrebbero essere dovute all'aumento dell'espressione di PD-L1 principalmente nella linea di melanoma murino e non nella linea 4T1 in risposta a P2Et, quindi è importante misurare l'effetto dell'estratto di P2Et sul Espressione di PD-L1 in cellule tumorali umane e studio della relazione con il tipo di tumore e altre variabili biologiche.

Con questo presupposto e i risultati dello studio clinico di fase I condotto su volontari sani che hanno dimostrato che l'estratto è sicuro, i ricercatori propongono che il trattamento con l'estratto P2Et in pazienti con carcinoma mammario potrebbe migliorare le loro condizioni generali, influenzando la loro qualità di vita. , e inducono una risposta immunitaria antitumorale, migliorando l'infiltrato immunitario e agendo come agente di trasformazione da un tumore freddo a un tumore caldo. Ciò porterebbe ad un miglioramento della sopravvivenza a lungo termine dei pazienti trattati con fitomedicina in concomitanza con il trattamento chemioterapico scelto dall'oncologo curante.

Per avanzare su questa strada e rispondere agli aggiustamenti suggeriti nello studio di fase I su individui sani, si propone di realizzare uno studio clinico che consenta di determinare la dose biologica ottimale dell'estratto P2Et in un disegno basato su simulazioni randomizzate di forma adattativa e considerando la sicurezza dell'estratto come un obiettivo nei pazienti con carcinoma mammario. Inoltre, verranno valutati quei parametri che consentono di definire i migliori indicatori dell'efficacia della P2Et in questo gruppo di pazienti, come la modulazione della risposta immunitaria, la qualità della vita, la riduzione degli effetti avversi e la sopravvivenza libera da progressione.