MICROBIOTA INTEGRAL EM CRIANÇAS COM DOENÇA HEPÁTICA AUTOIMUNE E SEU EFEITO NA RESPOSTA AO TRATAMENTO

Objetivo e Objetivo - Comparar a microbiota intestinal (taxa de disbiose, diversidade alfa e beta, índice de Shannon) em crianças com doença hepática autoimune versus aquelas com doença de Wilson, e estudar sua influência na resposta ao tratamento em crianças com doença hepática autoimune.

(b) Metodologia:

• População do estudo:Coorte de doenças: Crianças com evidência de doença hepática crônica com doença hepática autoimune e doença de Wilson (envolvimento hepático) menores de 18 anos de idade
• Coorte de controle: crianças saudáveis ​​de mesma idade com menos de 18 anos de idade com desenho do estudo: estudo observacional prospectivo
• Período de estudo: Desde o momento da aprovação ética até junho de 2025

Fezes para sequenciamento de 16S r-RNA: Amostras de fezes frescas serão coletadas dos sujeitos do estudo e controles. As amostras de fezes serão entregues ao laboratório em recipientes plásticos estéreis a 4°C e armazenados a -80°C até análise posterior. O DNA amplificado será sequenciado na plataforma de sequenciamento de próxima geração. Os dados de sequência seriam processados ​​usando pipeline de análise padronizado. Resumidamente, as sequências seriam unidas, sem códigos de barras, as sequências <150bp e aquelas com chamadas de base ambíguas seriam removidas. As sequências seriam eliminadas, as unidades taxonômicas operacionais (OTUs) geradas e as quimeras removidas. O microbioma intestinal será estudado por sequenciamento metagenômico shotgun de genoma completo (WGSM). Pela detecção de genes bacterianos para enzimas digestivas metabólicas de táxons presentes, capacidades metabólicas e produção potencial de metabólitos pelo microbioma intestinal serão previstas. As sequências seriam eliminadas de ruído, unidades taxonômicas operacionais (OTUs) geradas e quimeras removidas. O microbioma intestinal será estudado por sequenciamento metagenômico shotgun de genoma completo (WGSM). táxons presentes, serão previstas capacidades metabólicas e produção potencial de metabólitos pelo microbioma intestinal.

• Monitoramento e avaliação: Crianças com evidência de doença hepática crônica com doença hepática autoimune e doença de Wilson (envolvimento hepático) serão incluídas Coorte de controle: idade, sexo e status socioeconômico correspondentes a crianças saudáveis ​​menores de 18 anos com TNF-alfa , IL-6, endotoxina plasmática, PCR, procalcitonina, aspirado duodenal para cultura para identificar crescimento bacteriano excessivo. Amostras de fezes serão coletadas no início do estudo em pacientes com AILD, Wilson e controles saudáveis. Os pacientes com AILD serão iniciados em tratamento com prednisolona 1 mg/kg/dia junto com azatioprina 1 mg/kg/dia e amostras de fezes deles serão coletadas em no final você vê a resposta à imunossupressão Difícil de tratar a doença de Alzheimer (que será definida Falha na normalização de AST/ALT dentro de 1,5 vezes ou falha na normalização de IgG dentro de 6 meses. )

ANÁLISE ESTATÍSTICA:

• As variáveis ​​categóricas e contínuas serão expressas como frequências e média ou mediana ±DP, respectivamente. O teste qui-quadrado e o teste t de Student (teste exato de Fisher) serão aplicados para avaliação de causalidade. A correlação entre 2 variáveis ​​​​contínuas será avaliada de acordo com a correlação de Spearman. A significância estatística será mencionada como valor p <0,05, razão de probabilidade e intervalos de confiança de 95% (IC 95%). Para dados metagenômicos, na ausência de catálogo de genes para a população de estudo, estudaremos os dados metagenômicos nos primeiros 10 AILD, 5 Wilson e 5 controles,].