Darmmikrobiota bei Kindern mit autoimmuner Lebererkrankung und ihre Auswirkung auf das Ansprechen auf die Behandlung

Ziel und Zweck – Vergleich der Darmmikrobiota (Dysbiose-Verhältnis, Alpha- und Beta-Diversität, Shannon-Index) bei Kindern mit autoimmuner Lebererkrankung im Vergleich zu Kindern mit Morbus Wilson und Untersuchung ihres Einflusses auf das Ansprechen auf die Behandlung bei Kindern mit autoimmuner Lebererkrankung.

(b) Methodik:

• Studienpopulation: Krankheitskohorte: Kinder mit Anzeichen einer chronischen Lebererkrankung mit autoimmuner Lebererkrankung und Morbus Wilson (Leberbeteiligung) unter 18 Jahren
• Kontrollkohorte: Altersangepasste gesunde Kinder unter 18 Jahren mit Studiendesign: Prospektive Beobachtungsstudie
• Studienzeitraum:Vom Zeitpunkt der ethischen Zulassung bis Juni 2025

Stuhl für die 16S-r-RNA-Sequenzierung: Von Studienteilnehmern und Kontrollpersonen werden frische Stuhlproben entnommen. Stuhlproben werden in sterilen Plastikbehältern bei 4 °C an das Labor geliefert und bis zur weiteren Analyse bei -80 °C gelagert. Die amplifizierte DNA wird in der Sequenzierungsplattform der nächsten Generation sequenziert. Sequenzdaten würden mithilfe einer standardisierten Analysepipeline verarbeitet. Kurz gesagt, Sequenzen würden zusammengefügt, von Barcodes befreit, Sequenzen <150 bp und solche mit mehrdeutigen Basenaufrufen würden entfernt. Sequenzen würden entrauscht, operative taxonomische Einheiten (OTUs) generiert und Chimären entfernt. Das Darmmikrobiom wird durch Ganzgenom-Schrotflinten-Metagenomsequenzierung (WGSM) untersucht. Durch den Nachweis bakterieller Gene für metabolische Verdauungsenzyme vorhandener Taxa, Stoffwechselkapazitäten und potenzieller Produktion von Metaboliten durch das Darmmikrobiom wird vorhergesagt. Sequenzen werden entrauscht, operative taxonomische Einheiten (OTUs) generiert und Chimären entfernt. Das Darmmikrobiom wird durch Ganzgenom-Schrotflinten-Metagenomsequenzierung (WGSM) untersucht. Durch den Nachweis bakterieller Gene für metabolische Verdauungsenzyme von Vorhandene Taxa, Stoffwechselkapazitäten und die potenzielle Produktion von Metaboliten durch das Darmmikrobiom werden vorhergesagt.

• Überwachung und Bewertung: Kinder mit Anzeichen einer chronischen Lebererkrankung mit autoimmuner Lebererkrankung und Wilson-Krankheit (Leberbeteiligung) werden eingeschlossen. Kontrollkohorte: Alter, Geschlecht und sozioökonomischer Status stimmten mit gesunden Kindern unter 18 Jahren mit TNF-alpha überein , IL-6, Plasma-Endotoxin, CRP, Procalcitonin, Zwölffingerdarmaspirat zur Kultur zur Identifizierung bakterieller Überwucherung. Stuhlproben werden zu Studienbeginn bei Patienten mit AILD, Wilson und gesunden Kontrollpersonen entnommen. AILD-Patienten werden mit der Behandlung mit Prednisolon 1 mg/kg/Tag zusammen mit Azathioprin 1 mg/kg/Tag begonnen und Stuhlproben von ihnen werden gesammelt Am Ende sehen Sie die Reaktion auf die Immunsuppression. Schwierig zu behandelnde AILD (die definiert wird) Versäumnis, AST/ALT innerhalb des 1,5-fachen zu normalisieren, oder Versäumnis, IgG innerhalb von 6 Monaten zu normalisieren. )

STATISTISCHE ANALYSE:

• Die kategorialen und kontinuierlichen Variablen werden als Häufigkeiten bzw. Mittelwert bzw. Medianwert ±SD ausgedrückt. Zur Beurteilung der Kausalität werden der Chi-Quadrat-Test und der Student-T-Test (exakter Fisher-Test) angewendet. Die Korrelation zwischen zwei kontinuierlichen Variablen wird gemäß der Spearman-Korrelation bewertet. Statistische Signifikanz wird als p-Wert <0,05, Odds Ratio und 95 %-Konfidenzintervall (95 %-KI) angegeben. Für metagenomische Daten werden wir in Ermangelung eines Genkatalogs für die Studienpopulation die metagenomischen Daten in den ersten 10 AILD, 5 Wilson und 5 Kontrollen untersuchen.