A BÉL-MIKROBIOTA AUTOIMMUN MÁJBETEGSÉGŰ GYERMEKEKNÉL ÉS HATÁSA A KEZELÉSI VÁLASZRA

Cél és célkitűzés – Az autoimmun májbetegségben szenvedő gyermekek és a Wilson-kórban szenvedő gyermekek bélmikrobiótájának (dysbiosis aránya, alfa és béta diverzitás, Shannon index) összehasonlítása, és annak vizsgálata a kezelésre adott válaszreakcióra autoimmun májbetegségben szenvedő gyermekeknél.

b) Módszertan:

• Vizsgálati populáció: Betegség kohorsz: 18 éven aluli, autoimmun májbetegséggel járó krónikus májbetegségben és Wilson-kórban (májérintettség) szenvedő gyermekek
• Kontroll kohorsz: életkorhoz igazított, egészséges, 18 év alatti gyermekek vizsgálati tervvel: Prospektív megfigyeléses vizsgálat
• Tanulmányi időszak: Az etikai jóváhagyástól 2025 júniusáig

Széklet a 16S r-RNS szekvenáláshoz: Friss székletmintákat veszünk a vizsgálati alanyoktól és a kontrolloktól. A székletmintákat steril műanyag edényekben, 4°C-on szállítják a laboratóriumba, és -80°C-on tárolják a további elemzésig. Az amplifikált DNS-t a következő generációs szekvenáló platformon szekvenálják. A szekvenciaadatokat szabványosított elemzési folyamattal dolgoznák fel. Röviden, a szekvenciákat egyesítenék, kimerítenék a vonalkódokat, a 150 bp-nél kisebb szekvenciákat és a kétértelmű alaphívásokkal rendelkező szekvenciákat eltávolítanák. A szekvenciák zajtalanításra kerülnek, működő taxonómiai egységek (OTU) jönnek létre és kimérák eltávolíthatók. A bél mikrobiómát teljes genom shotgun metagenomikus szekvenálás (WGSM) segítségével vizsgálják. A jelenlévő taxonok metabolikus emésztőenzimeinek bakteriális génjeinek kimutatásával, a metabolikus kapacitással és a metabolitok potenciális termelésével. a bél mikrobióma előrejelzésre kerül. A szekvenciák zajtalanításra kerülnek, működő taxonómiai egységek (OTU) jönnek létre és kimérák eltávolíthatók. A bél mikrobiómát a teljes genom shotgun metagenomikus szekvenálás (WGSM) segítségével vizsgálják. A metabolikus emésztőenzimek bakteriális génjeinek kimutatásával A taxonok jelenléte, az anyagcsere-kapacitások és a metabolitok lehetséges termelődése a bél mikrobióma által megjósolható lesz.

• Monitoring és értékelés: Az autoimmun májbetegségben szenvedő krónikus májbetegségben és Wilson-kórban (máj érintettség) szenvedő gyermekek is szerepelnek. , IL-6, Plazma endotoxin , CRP, Procalcitonin, Duodenális aspirátum tenyésztéshez a baktériumok túlszaporodásának azonosítására. Az AILD-ben szenvedő betegeknél, Wilson- és egészséges kontrolloknál székletmintákat vesznek. a vége, látod az immunszuppresszióra adott választ Nehéz kezelni az AILD-t (melyet úgy határoznak meg, hogy az AST/ALT nem normalizálódik 1,5-szer vagy az IgG nem normalizálódik 6 hónapon belül. )

STATISZTIKAI ANALÍZIS:

• A kategorikus és a folytonos változókat gyakoriságként, illetve átlagként vagy mediánként ±SD-ként fejezzük ki. Khi-négyzet tesztet és Student-féle t-próbát (Fisher-féle egzakt teszt) alkalmazunk az ok-okozati összefüggés értékelésére. A két folytonos változó közötti korrelációt Spearman korrelációja szerint értékeljük. Statisztikai szignifikanciaként p-érték <0,05, páratlan arány és 95%-os konfidenciaintervallum (95% CI) szerepel. A metagenomikai adatokhoz a vizsgált populáció génkatalógusának hiányában az első 10 AILD, 5 Wilson és 5 kontroll metagenomikai adatait fogjuk tanulmányozni.