Estado Imunitário e Controlo da Doença das Doenças Inflamatórias das Vias Aéreas (ISDC-IAD)

Este estudo de coorte observacional prospetivo e unicêntrico visa caracterizar de forma abrangente o panorama imunológico de doentes com doenças inflamatórias crónicas das vias aéreas através da aplicação de tecnologias de células únicas de alta dimensão. O estudo planeia recrutar aproximadamente 205 a 215 participantes, incluindo múltiplos grupos de doenças e controlos saudáveis correspondentes.

Uma inovação metodológica central deste estudo é a utilização de CyTOF (Citometria por Tempo de Voo), uma plataforma de citometria de massa capaz de analisar simultaneamente até 40-100 marcadores imunes ao nível da célula única. Esta abordagem permite uma caracterização fenotípica e funcional altamente detalhada de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), possibilitando a descoberta de subconjuntos de células imunes associados à doença com maior resolução do que a citometria de fluxo convencional.

Os participantes serão estratificados por tipo de doença e gravidade com base em critérios de diagnóstico clínico, testes funcionais (por exemplo, FEV1, AHI, FeNO) e pontuações clínicas estabelecidas (por exemplo, ACQ, CAT, GOLD, SGRQ, E-FACED). As amostras de sangue serão processadas para isolamento de PBMCs e submetidas a análise por CyTOF. As avaliações complementares incluem a caracterização de citocinas via ELISA, sequenciação de RNA de célula única (scRNA-seq) para insights transcriptómicos e análise de expetoração via cultura e sequenciação de próxima geração (NGS) para avaliar a colonização microbiana e os perfis de células inflamatórias.

Este estudo investigará a correlação entre fenótipos imunes e níveis de controlo clínico, gravidade da doença, métricas de hipóxia e mediadores inflamatórios (por exemplo, IL-6, TNF-α). Também procura identificar características imunopatológicas-chave que possam diferenciar subtipos dentro de cada doença (por exemplo, asma T2-alto vs. T2-baixo; bronquiectasias Pseudomonas-positivas vs. negativas) e avaliar estados transicionais como PRISm em relação à progressão da DPOC. Serão desenvolvidos modelos multivariados que combinam parâmetros imunes e clínicos para facilitar a estratificação preditiva e orientar futuras estratégias imunoterapêuticas individualizadas.

Ao integrar dados de CyTOF, scRNA-seq e clínicos, este protocolo aspira a definir biomarcadores imunes preditivos do controlo e gravidade da doença das vias aéreas e a fornecer uma compreensão a nível de sistemas da disfunção imune em distúrbios respiratórios heterogéneos.