Олеаноловая кислота как терапевтический адъювант при сахарном диабете 2 типа (ИССЛЕДОВАНИЕ OLTRAD) (OLTRAD)

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование OLTRAD представляет собой проспективное рандомизированное двойное слепое контролируемое исследование в параллельных группах, призванное продемонстрировать, что регулярный прием функционального оливкового масла, обогащенного ОА, эффективен в качестве дополнения к терапии метформином (в виде монотерапии или в сочетании с другие противодиабетические препараты) в метаболическом контроле у ​​пациентов с СД2. Эффект оливкового масла, обогащенного ОА, будет сравниваться с эффектом контрольного масла, которое состоит из того же коммерческого оливкового масла, не обогащенного тритерпеном.

Всего будет отобрано 100 добровольцев обоего пола из числа пациентов с СД2, находящихся на лечении в службе эндокринологии и питания университетской больницы «Вирхен дель Росио» (Севилья, ИСПАНИЯ).

РАСЧЕТ РАЗМЕРА ОБРАЗЦЫ Гликозилированный гемоглобин сыворотки (HbA1c) принят в качестве основной количественной переменной для анализа гликемического контроля. Нулевая гипотеза, заявленная в дизайне исследования, заключается в том, что диетическое вмешательство на основе ОА снизит исходные уровни HbA1c в сыворотке пациентов как минимум на 7% по сравнению с контрольной группой. Чтобы проверить этот односторонний тест гипотезы с уровнем достоверности 95% (риск α = 0,05) и мощностью 95% (риск β = 0,05), требуется размер выборки в 44 добровольца на группу. Однако из-за особенностей исследования (долгосрочное изменение образа жизни) можно предположить, что потери участников составят до 15%, в результате чего скорректированный размер выборки составит 50 человек на группу.

РАНДОМИЗАЦИЯ После набора 100 пациентов с СД2 будут случайным образом распределены в одну из двух исследовательских групп. Пятьдесят человек будут отнесены к экспериментальной группе, которая будет употреблять функциональное оливковое масло, обогащенное ОА, тогда как остальные 50 добровольцев будут отнесены к контрольной группе, которая будет получать такое же необогащенное оливковое масло. Во время госпитализации медперсонал исследования попросит по телефону клинического координатора исследования (главного исследователя 2 проекта) распределить участников по исследовательским группам (централизованная рандомизация). Распределение по этим группам будет производиться с использованием компьютерных таблиц случайных чисел. Четыре группы рандомизации будут построены по полу и возрасту (от 50 лет).

ВМЕШАТЕЛЬСТВА Участникам будет предложено принимать 55 мл/день назначенного масла, желательно в сыром виде и свободно распределять его между тремя основными приемами пищи. Как оливковое масло, обогащенное ОК, так и контрольное масло будут поставляться с маркировкой буквенно-цифровых кодов, соответствие которых будет известно только главному исследователю 1 проекта. Это обеспечивает ослепление клинических исследователей и участников относительно типа назначенного оливкового масла.

ПОСЛЕДУЮЩЕЕ НАБЛЮДЕНИЕ За участниками клинического исследования будут наблюдать в течение 12 месяцев с момента включения в соответствии с планом ежеквартальных посещений.

Во время набора и каждые три месяца после этого участникам будут измерять антропометрические данные, артериальное давление и частоту сердечных сокращений. Их также спросят о желудочно-кишечных расстройствах или других типах жалоб, и они заполнят анкету об образе жизни (диета, физическая активность, употребление алкоголя и табака), состоянии здоровья и использовании лекарств.

Также в начале участия в исследовании и каждые три месяца в дальнейшем будут брать образцы крови из локтевой вены натощак, которые будут собираться в стерильные пластиковые пробирки с помощью вакуумной системы. Аналогичным образом участники предоставят аликвоты своей первой утренней мочи в стерильных пластиковых пробирках. Аналитические определения крови и мочи будут проводиться в лаборатории клинической биохимии и анализа университетской больницы «Вирхен дель Росио» в Севильи (HUVR).

Кроме того, аликвоты плазмы будут отправлены в Институт де ла Граса (IG-CSIC) для дополнительных биохимических исследований. Лаборанты обоих учреждений получат образцы, идентифицированные буквенно-цифровыми идентификационными кодами, и, следовательно, не будут знать группы вмешательства.

Во время этих ежеквартальных посещений волонтеры будут участвовать в занятиях программы обучения правильному питанию и бесплатно получат 6 л назначенного масла. Соблюдение диетического вмешательства будет оцениваться ежеквартально с помощью теста на соблюдение требований, проводимого Хейнсом-Сакеттом, и возврата предположительно употребленных пустых бутылочек.

Основным результатом исследования является улучшение гликемического контроля, оцениваемого по изменению HbA1c. В качестве вторичных результатов мы получим данные об антропометрических и клинических переменных, а также о биохимических параметрах крови и мочи.

АНАМНЕЗ И КЛИНИЧЕСКОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ УЧАСТНИКОВ. Медицинские исследователи проекта имеют доступ к электронным медицинским записям участников на платформе DIRAYA Службы здравоохранения Андалузии и проведут анамнез и физическое обследование участников, которое будет включать жизненно важные данные. и общий медицинский и хирургический анамнез, а также последующее фармакологическое лечение. Также будет получена информация об образе жизни, восприятии образа собственного тела, диете, а также типе и интенсивности физической активности. Кроме того, будет проведено общее клиническое обследование, включая общий внешний вид и осмотр кистей и рук, ступней и ног, кожи, лица, глаз, рта, шеи, живота, отеков, лимфатических узлов и жизненно важных показателей (температура, пульс, частота дыхания и артериальное давление).

АНТРОПОМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ И СОСТАВ ТЕЛА Антропометрическое исследование будет включать определение общей массы тела, роста, индекса массы тела (ИМТ), а также окружностей талии и бедер. Исследование и оценка этих переменных будут проводиться в соответствии с рекомендациями Международного общества развития кинантропометрии (ISAK). Исследование состава тела будет проводиться методом электрического биоимпеданса. Жировая масса, безжировая масса, мышечная масса, общее количество воды, костная масса, базальный обмен и висцеральный жир будут количественно определены с помощью этого метода с использованием проверенных уравнений прогнозирования, скорректированных с учетом возраста и пола.

ОЦЕНКА ПОТРЕБЛЕНИЯ ПИЩЕВЫХ ПИЩЕВ И ОБУЧЕНИЕ ПО ПИТАНИЮ Будет реализована программа обучения правильному питанию для оценки потребления пищи участниками и усиления соблюдения данных диетических рекомендаций. Для измерения потребления пищи мы будем использовать форму регистрации приема пищи, разработанную Университетом Наварры (Испания) и успешно использованную в других исследованиях, таких как исследование PREvención con Dieta MEDiterránea (PREDIMED). Эта форма представляет собой проверенный инструмент, позволяющий количественно оценить потребление пищи в виде порций или групп продуктов для взрослых, живущих в Испании. С другой стороны, все участники присоединятся к семинарам, где они получат конкретные диетические рекомендации для пациентов с СД2, а также будут проинструктированы о здоровом питании, лучших вариантах питания и адекватных порциях, ограничении продуктов с высокой степенью переработки, пирожных, сахара, жирная пища, а также сладкие и алкогольные напитки. Кроме того, пациенты получат информацию о рецептах, списках сезонных покупок и использовании оливкового масла для приготовления пищи и заправки. Привычки питания участников будут анализироваться ежеквартально с помощью 24-часового опросника. Программное обеспечение «НУТРИУМ» (https://nutrium.com/; Брага; Португалия) для оценки пищевой ценности рационов.

БИОХИМИЯ КРОВИ ПРИ ГУВР. В образцах локтевой крови определяли содержание циркулирующих липидов [общее количество триглицеридов, общий холестерин, ЛПНП, ЛПВП, общий аполипопротеин В и липопротеин А]; гомеостаз глюкозы [гликемия, инсулинемия, С-пептид, индекс HOMA-IR, HbA1c]; окислительный стресс и воспаление [мочевая кислота, билирубин, малоновый диальдегид, сверхчувствительный С-реактивный белок, тиреотропный гормон (ТТГ)], а также связанные с поражением печени и почек [лактатдегидрогеназа (ЛДГ), печеночные трансаминазы (АЛТ, АСТ) , ГГТ) и креатинин].

Также будет оценен уровень витамина B12 в плазме. Кроме того, возможное появление фиброза печени будет оцениваться с помощью шкалы Hepamet Fibrosis Score, неинвазивного метода, который рассчитывает оценку с учетом таких факторов, как возраст, пол, наличие диабета, уровень глюкозы, инсулина, альбумина, тромбоцитов, и АСТ. Этот инструмент, разработанный Севильским институтом биомедицины (IBiS), предназначен для оценки предполагаемого фиброза у пациентов с ожирением, диабетом, метаболическим синдромом, стеатозом печени и/или маркерами аномальной функции печени. Этот метод обеспечивает диагностическую надежность и соотношение затрат и выгод, превосходящее другие методы, такие как FIB-4 и показатель фиброза НАЖБП.

НЕПРЕРЫВНЫЙ МОНИТОРИНГ ГЛЮКОЗЫ В КРОВИ Глюкоза в плазме будет постоянно контролироваться с использованием подкожной системы FreeStyle Libre (ABBOTT Diagnostics; Чикаго, Иллинойс; США). Датчики будут прикреплены к участникам два раза на протяжении всего исследования: в начале исследования и через 12 месяцев наблюдения, и будут собирать данные в течение 48 часов. С помощью этой системы будут определяться различные параметры гликемии, такие как площадь под кривой (AUC), средняя амплитуда гликемического отклонения (MAGE), средняя гликемия, а также стандартное отклонение (SD) и коэффициент гликемии. вариация (CV).

БИОХИМИЯ ПЛАЗМЫ В IG-CSIC. Исследователи IG-CSIC проведут ряд дополнительных определений в образцах плазмы, таких как плазменные концентрации ОА, уровни глутатиона (GSH и GSSG), состав жирных кислот, сывороточные адипокины (церулоплазмин). , адипонектин, лептин, резистин и грелин). Также будут определяться сывороточные антиоксидантные ферменты (супероксиддисмутаза, каталаза) и провоспалительные цитокины (TNF-α, IL-1β, IL-6).

С другой стороны, фракция ЛПОНП липопротеинов плазмы будет выделена ультрацентрифугированием (230 000 × g в течение 18 часов при 4 ° C). В этих частицах будет измерено общее содержание жирных кислот, триглицеридов, диглицеридов, фосфолипидов и общего аполипопротеина В.

АНАЛИЗ МОЧИ Первые утренние образцы мочи будут проанализированы на обычные физические, химические и микроскопические показатели (рН, плотность, глюкозурия, кетоны, нитриты, уробилиноген, билирубин, осадок, лейкоциты, микроальбуминурия/г креатинина). Определение этих параметров также будет проводиться на базе лаборатории клинической биохимии и анализа университетской больницы «Вирхен дель Росио» в Севильи.

СТАТИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ Исследование будет проводиться по принципу «назначенное лечение» (ITT). Качественные переменные будут выражаться их абсолютными и относительными частотами, тогда как количественные с нормальным распределением будут выражаться средним и стандартным отклонением, а переменные с ненормальным распределением - медианой и интерквартильным размахом (IQR). Сравнение качественных переменных между исследовательскими группами будет проводиться с помощью критериев Хи-квадрат и Макнемара, тогда как сравнение количественных переменных будет выполняться с помощью t-критерия Стьюдента и дисперсионного анализа. Однородность популяций, включенных в группы распределения, будет оцениваться с использованием U-критерия Манна-Уитни-Уилкоксона. Все значения P будут двусторонними при α = 0,05. Статистический анализ будет выполняться с использованием программного обеспечения SPSS 27 (IBM SPSS Статистика, Нью-Йорк, США).